The LIVE/DEAD Sperm viability Kit w

The LIVE/DEAD Sperm viability Kit was purchased from Molecular Probes Inc. (Eugene, OR, USA). The Accudenz® was purchased from Accurate Chemical & Scientific Corporation (Westbury, NY 11590 USA). The other chemicals used in this study were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO).

2.2. Birds and semen treatment

Mericanel della Brianza chicken breeders were kept in the experimental facilities of the University of Milan (Polo Universitario di Lodi, Lodi, Italy); Hybrid Large White turkey breeders were kept in a private commercial breeding farm (Amadori, Canzano, Italy); and Ring-necked pheasant breeders were kept in the experimental facilities of the University of Pisa (San Piero a Grado, Pisa, Italy). Ejaculates were collected by dorso-abdominal massage and pooled (one ejaculate/male; at least 12 ejaculates/pool; three replicates of pooled semen samples for each species) to avoid individual differences among males and also to provide sufficient material for semen processing and analysis. Only ejaculates exhibiting a white color appearance and no contamination were used. Semen samples were diluted in pre-freezing diluents, cooled at 5 °C, added with dimethylacetamide (DMA) as cryoprotectant and following equilibration were directly placed in a liquid nitrogen bath to form frozen semen pellets. Thawing was performed in water bath at high temperature (60, 50 and 75 °C for chicken, pheasant and turkey semen, respectively) for few seconds (Cerolini et al., 2008). Details of the freezing/thawing procedure used according to the species are provided in Table 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชีวิตอสุจิสด/ตายซื้อชุดจากโมเลกุล Probes Inc. (ยูจีน หรือ สหรัฐอเมริกา) The Accudenz® ซื้อจากแม่นยำเคมีและวิทยาศาสตร์ คอร์ปอเรชั่น (เดอะโซโห NY 11590 สหรัฐอเมริกา) สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้ในการศึกษานี้ได้ซื้อจาก บริษัทสารเคมี Sigma (เซนต์หลุยส์ MO)2.2. นก และการรักษาน้ำเชื้อพ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่ Mericanel della Brianza ถูกเก็บไว้ในห้องทดลองของมหาวิทยาลัยมิลาน (โลดี้โปโล Universitario di โลดี้ อิตาลี); พ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่งวงสีขาวขนาดใหญ่ไฮบริดสลีถูกเก็บไว้ในฟาร์มเพาะพันธุ์เพื่อการค้าส่วนตัว (Amadori, Canzano อิตาลี); และพ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่ฟ้า necked –แหวนถูกเก็บไว้ในห้องทดลองของมหาวิทยาลัยปิซา (ซานเปียโรเป็นกราโด ปิซา อิตาลี) ปีที่ถูกจัดเก็บ โดยท้อง dorso นวด และพู (หนึ่งอุทาน/ชายน้อย 12 ปีสระ เหมือนกับสามตัวอย่างน้ำเชื้อ pooled สำหรับแต่ละสายพันธุ์) เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกต่างของแต่ละวัย และ เพื่อให้วัสดุเพียงพอสำหรับน้ำเชื้อประมวลผลและวิเคราะห์ เฉพาะปีที่แสดงลักษณะที่ปรากฏของสีขาวและไม่ปนเปื้อนใช้ ตัวอย่างน้ำเชื้อเจือจางในตัวก่อนแช่แข็ง เย็น 5 ° c เพิ่ม dimethylacetamide (DMA) เป็น cryoprotectant และ equilibration ต่อตรงไว้ในอ่างไนโตรเจนเหลวให้ฟอร์มเม็ดน้ำเชื้อแช่แข็ง ทำละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิสูง (50, 60 และ 75 ° C สำหรับน้ำเชื้อไก่ ไก่ฟ้า และไก่งวง ตามลำดับ) สำหรับไม่กี่วินาที (Cerolini et al. 2008) รายละเอียดของกระบวนการแช่แข็งละลายใช้ตามสายพันธุ์ไว้ในตารางที่ 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สด / DEAD Kit อสุจิมีชีวิตที่ถูกซื้อมาจากวัดระดับโมเลกุลอิงค์ (Eugene, OR, สหรัฐอเมริกา) Accudenz®ซื้อมาจากที่ถูกต้องทางเคมีและวิทยาศาสตร์คอร์ปอเรชั่น (Westbury, NY 11590 USA) สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้ในการศึกษานี้ที่ซื้อมาจากซิกเคมิคอล จำกัด ( St. Louis, มิสซูรี).

2.2 นกและน้ำอสุจิรักษา

Mericanel della Brianza พ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่ที่ถูกเก็บไว้ในสถานที่ทดลองของมหาวิทยาลัยมิลาน (โปโลยูนิเวอร์ดิ Lodi, Lodi, อิตาลี); ไฮบริดขนาดใหญ่พ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่งวงสีขาวที่ถูกเก็บไว้ในการปรับปรุงพันธุ์ฟาร์มเชิงพาณิชย์เอกชน (Amadori, Canzano, อิตาลี); และพ่อพันธุ์แม่พันธุ์ไก่ฟ้าคอแหวนที่ถูกเก็บไว้ในสถานที่ทดลองของมหาวิทยาลัยปิซา (San Piero a Grado, ปิซา, อิตาลี) ejaculates ถูกเก็บรวบรวมโดยนวด dorso-ท้องและสำรอง (หนึ่งอุทาน / ชายอย่างน้อย 12 ejaculates / สระว่ายน้ำสามซ้ำของ pooled ตัวอย่างน้ำเชื้อสำหรับแต่ละชนิด) เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกต่างระหว่างบุคคลในหมู่เพศชายและยังเพื่อให้วัสดุที่เพียงพอสำหรับการประมวลผลน้ำอสุจิและการวิเคราะห์ . ejaculates เพียงการแสดงลักษณะสีขาวและปนเปื้อนไม่ถูกนำมาใช้ ตัวอย่างน้ำเชื้อถูกเจือจางในสารก่อนการแช่แข็งเย็น 5 องศาเซลเซียสเพิ่มด้วย dimethylacetamide (DMA) เป็น cryoprotectant และต่อไปนี้การปรับสมดุลถูกวางไว้โดยตรงในอ่างไนโตรเจนเหลวในรูปแบบเม็ดน้ำเชื้อแช่แข็ง ละลายได้ดำเนินการในอ่างน้ำที่อุณหภูมิสูง (60, 50 และ 75 องศาเซลเซียสเป็นเวลาไก่ไก่ฟ้าและไก่งวงน้ำอสุจิตามลำดับ) สำหรับไม่กี่วินาที (Cerolini et al., 2008) รายละเอียดของขั้นตอนการแช่แข็ง / ละลายที่ใช้แล้วตามสายพันธุ์ได้แสดงไว้ในตารางที่ 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คอนเสิร์ต / ตายอสุจิชุดซื้อมาจากโมเลกุลโพรบ อิงค์ ( ยูจีน , หรือ , USA ) การ accudenz ®ซื้อมาจากสารเคมีที่ถูกต้องและวิทยาศาสตร์ Corporation ( Westbury , NY 11590 USA ) และสารเคมีอื่น ๆที่ใช้ในการศึกษา คือ ซื้อจาก Sigma Chemical Co . ( St . Louis , MO )2.2 . นกรักษาน้ำเชื้อmericanel เดลลา บริพันธ์ไก่ไว้ในเครื่องทดลองของมหาวิทยาลัยแห่งมิลาน ( โปโล universitario di Lodi , Lodi , อิตาลี ) ; ลูกผสมพันธ์ไก่งวงสีขาวขนาดใหญ่ถูกเพาะพันธุ์ฟาร์มเอกชน ( amadori canzano , อิตาลี ) ; และแหวนคอไก่แม่พันธุ์ไว้ในเครื่องทดลองของมหาวิทยาลัยปิซา ( San Piero a Grado , ปิซา , อิตาลี ) ejaculates ครั้งนี้ dorso นวดช่องท้อง และ pooled ( หนึ่งอุทาน / ชาย อย่างน้อย 12 ejaculates สระ / ; 3 ซ้ำรวมตัวอย่างอสุจิแต่ละชนิด ) เพื่อหลีกเลี่ยงความแตกต่างระหว่างเพศชาย และยังเพื่อให้มีวัสดุเพียงพอสำหรับการประมวลผลน้ำเชื้อและการวิเคราะห์ เพียง ejaculates exhibiting ลักษณะสี ขาว และไม่มีการใช้ ตัวอย่างน้ำเชื้อถูกเจือจางก่อนการแช่สาร , เย็น 5 องศา C เพิ่มกับไดเมทิลอะซิทาไมด์ ( DMA ) และต่อไปนี้ equilibration น้ำยาโดยตรงอยู่ในไนโตรเจนเหลวอาบน้ำในรูปแบบเม็ดน้ำเชื้อแช่แข็ง ละลายได้ในน้ำร้อนที่อุณหภูมิสูง ( 60 , 50 และ 75 องศา C สำหรับไก่ ไก่และไก่งวงน้ำเชื้อตามลำดับ ) สำหรับไม่กี่วินาที ( cerolini et al . , 2008 ) รายละเอียดของกระบวนการที่ใช้ในการแช่แข็ง / ละลายตามชนิดมีการระบุไว้ในตารางที่ 1