Identtification of V.parahaemolytic

Identtification of V.parahaemolyticus by PCR.
The seventy isolates recognized as V. parahaemolyticus by the biochemical test were confirmed by a PCR method for the detection of the species-specific toxR gene (12). One bacterial colony was suspended in 1 ml of sterile water and centrifuged at 13,000 × g for 1 min. DNA was extracted using the GenomicMini kit (A&A Biotechnology, Gdynia, poland) according to the producer ‘s instructions. The PCR was performed in a thermocyclear (Biometra GmbH,Goettingen ,Germany) as follows : 5 min of initial denaturation at 96 ͦC ; 30 cycles of denaturation at 94 ͦC for 1 min, annealing at 63 ͦC for 1.5 min , and extension at 72 ͦC for 1.5 min; and a final extension at 72 ͦC for 7 min. The PCR products were stained with ethidium bromide (Sigma-Aldrich,St. Louis , MO) and visualized in 1.5 % agarose gels (Sigma-Aldrich) using the Gel Doc 2000 documentation system (Bio-red,Hercules,CA). The confirmed V.parahaemolyticus isolates were stored at -80 ͦC until further analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Identtification ของ V.parahaemolyticus โดย PCRเจ็ดแยกเป็น V. parahaemolyticus โดยการทดสอบทางชีวเคมีได้รับการยืนยัน โดยวิธี PCR สำหรับตรวจหายีนสาย toxR (12) หนึ่งในโคโลนีแบคทีเรียระงับใน 1 มิลลิลิตรของน้ำผ่านการฆ่าเชื้อ และผลิตภัณฑ์ที่ 13,000 × g สำหรับ 1 นาทีดีเอ็นเอถูกสกัดโดยใช้ชุด GenomicMini (A และ A เทคโนโลยีชีวภาพ Gdynia โปแลนด์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต การ PCR ได้ดำเนินการใน thermocyclear (Biometra GmbH กอตติงเกน เยอรมนี) เป็นดังนี้: แปรสภาพเริ่มต้นที่ 96 ͦC; 5 นาที 30 รอบของการแปรสภาพที่ 94 ͦC 1 นาที หลอมที่ 63 ͦC 1.5 นาที และส่วนขยายที่ ͦC 72 นาที 1.5 และนามสกุลเป็นขั้นสุดท้ายที่ ͦC 72 7 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย้อม ด้วยโบรไมด์ ethidium (Sigma Aldrich เซนต์หลุยส์ MO) และแสดงเป็นภาพในเจล 1.5% agarose (Sigma Aldrich) ใช้เจล Doc 2000 เอกสารประกอบระบบ (ไบโอเรด เฮอร์คิวลิส CA) แยก V.parahaemolyticus ยืนยันถูกเก็บไว้ที่ ͦC-80 จนวิเคราะห์เพิ่มเติม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Identtification ของ V.parahaemolyticus โดยวิธี PCR.
เจ็ดสิบแยกได้รับการยอมรับเป็น V. parahaemolyticus โดยการทดสอบทางชีวเคมีที่ได้รับการยืนยันโดยวิธี PCR ในการตรวจหาสายพันธุ์เฉพาะ toxR ยีน (12) หนึ่งในอาณานิคมของแบคทีเรียถูกระงับใน 1 มิลลิลิตรของน้ำหมันและหมุนเหวี่ยงที่ 13,000 ×กรัมเป็นเวลา 1 นาที ดีเอ็นเอถูกสกัดโดยใช้ชุด GenomicMini (A & A เทคโนโลยีชีวภาพ Gdynia, โปแลนด์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตฯ PCR ที่ได้ดำเนินการใน thermocyclear (Biometra GmbH, Goettingen, เยอรมนี) ดังต่อไปนี้: 5 นาที denaturation เริ่มต้นที่ 96 C; 30 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที, การอบที่ 63 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1.5 นาทีและส่วนขยายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1.5 นาที; และขยายสุดท้ายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย้อมด้วย ethidium bromide (Sigma-Aldrich, St. Louis, มิสซูรี) และมองเห็นใน 1.5% agarose เจล (Sigma-Aldrich) โดยใช้เจล Doc ระบบเอกสาร 2000 (Bio-สีแดง, ดาว, CA) ได้รับการยืนยันสายพันธุ์ V.parahaemolyticus ถูกเก็บไว้ที่ -80 C จนการวิเคราะห์ต่อไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

identtification ของ v.parahaemolyticus โดย PCRได้รับการยอมรับว่าเป็นเจ็ดสายพันธุ์ tdh โดยการทดสอบทางชีวเคมีที่ได้รับการยืนยันโดยวิธีพีซีอาร์เพื่อตรวจหายีน toxr เผ่าพันธุ์ - เฉพาะ ( 12 ) แบคทีเรียกลุ่มหนึ่งลอยอยู่ 1 มล. ของน้ำหมันไฟฟ้าที่ 13000 ×กรัม ต่อ 1 นาที ดีเอ็นเอโดยใช้ genomicmini Kit ( & เทคโนโลยีชีวภาพ , Kolobrzeg , โปแลนด์ ) ตามที่ผู้ผลิตของคำสั่ง ร่วมแสดงใน thermocyclear ( biometra GmbH , เกิททิงเกน , เยอรมนี ) ดังนี้ 5 นาทีแรก ( 96 ͦ C ; 30 รอบ ( ที่ 94 ͦองศาเซลเซียสนาน 1 นาที อบอ่อนที่อุณหภูมิ 63 ͦ C 1.5 นาที และนามสกุลที่ 72 ͦเป็นเวลา 1.5 นาที และสุดท้ายที่ขยาย 72 ͦองศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกย้อมด้วยทิเดียมโบรไมด์ ( ซิกม่า Aldrich St . Louis , MO ) และมองเห็นใน 1.5 % เจลโรส ( ซิกม่า Aldrich ) ใช้เจลหมอ 2000 เอกสารระบบ ( Bio สีแดง , Hercules , CA ) ได้รับการยืนยัน v.parahaemolyticus สายพันธุ์ที่อุณหภูมิ - 80 ͦ C จนถึงการวิเคราะห์ต่อไป