Mycelial culture and inoculumStock

Mycelial culture and inoculumStock
cultures from each sporocarp of P. albus isolates wereobtained by aseptically transferring a piece of the pileus tramato solid modified Melin-Norkrans Medium (MNM) (Marx, 1969)containing: KH2PO4(0.5 g L−1), (NH4)2HPO4(0.25 g L−1), CaCl2(0.05 g L−1), NaCl (0.025 g L−1), MgSO4•7H2O (0.15 g L−1), thi-amine hydrochloride (100 _g L−1), FeCl3•6H2O (0.03 g L−1), glucose(10 g L−1), malt extract (3 g L−1) and agar (14 g L−1). The pH wasadjusted to 5.6 with 1 M HCl and the medium autoclaved for 20 minat 120◦C. All fungal strains were maintained as sub-cultures at24◦C on the same medium. Vegetative inocula were prepared asdescribed in Brundrett et al. (1996). Briefly: large scale inoculawere produced by incubating each fungal mycelium from cultureson Petri dishes inoculated into a sterile solid substrate (peat-vermiculite mixture, 1:10, w:w), saturated with MNM liquid mediain large plastic bags (1.5 L). The incubation was carried out at 30◦Cin a dark room for 8 weeks.

Plant growth and treatmentsEucalyptus globulus Labill. subsp. bicostata (Maiden et al.) J.B.Kirkp. seed lot N◦16731 was obtained from the Australian Tree SeedCentre (Kingston, ACT, Australia). Acacia spirorbis subsp. spirorbisLabill. seed lot N◦036/11 was obtained from the New CaledonianAgronomic Institut (IAC, Païta, New Caledonia). A set of experi-ments was carried out in a glasshouse as described in Brundrettet al. (1996). Briefly, seeds were pre-treated for 2 min in 70% ethanolsupplemented with 0.1% (v/v) Tween 20, then surface sterilized for5 min in H2O2(30%) and washed 3 times in sterile water. Germina-tion occurred after 1 week at 28◦C in the dark. Seedlings were thenplaced for a week in a growth chamber with an 18/6 h day/nightcycle at a light intensity of 200 _mol m−2s−1photosynthetic activeradiation and at temperature 25/18◦C. Two-week-old seedlingswere transplanted into plastic containers of 1 litre capacity andfilled with (i) neutral growth substrate composed of vermiculiteor (ii) ultramafic substrate from site 4 (Mont Dore). Plants wereinoculated with 100 mL of 8-week-old mycelial inoculum preparedas described above. Plants inoculated with inoculum killed aftersterilization by autoclaving (20 min at 120◦C) were used as nonmycorrhizal controls. All plants received nutrient by watering thecontainers to field capacity with a nutrient solution (as suggestedin Brundrett et al., 1996) in which the final concentrations ofmineral elements expressed in mg kg−1of substrate (w/w) were:NH4NO3, 36; K2SO4, 111.6; Ca(H2PO4)2•H2O, 40; CaSO4•2H2O, 51.5;MgSO4•7H2O, 33.7; FeCl3, 11; MnSO4•4H2O, 16.9; CuSO4•5H2O, 8.2;ZnSO4•7H2O, 9.2; Na2B4O7•10H2O 1.1; (NH4)6Mo7O24•4H2O, 0.46;CoCl2•6H2O, 0.34. Plants were grown in the glasshouse under anatural light cycle for 12 months with average maximum and min-imum temperatures of 25 ± 2◦C and 20 ± 2◦C, respectively. Waterwas applied by spraying 2 min per hour, 6 times per day. The water-ing system operated day and night. Once per month, a top dressingof NH4NO3was applied at 30 mg kg−1of substrate. All experimentswere carried out on three independent assays, with each treatmentcontaining 15 plant replicates.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Mycelial วัฒนธรรมและ inoculumStock
Melin Norkrans กลาง (MNM) (Marx, 1969) การปรับเปลี่ยนวัฒนธรรมจากแต่ละ sporocarp wereobtained แยกไหลนา P. โดย aseptically โอนย้ายชิ้นส่วนของ tramato pileus ทึบประกอบด้วย: KH2PO4 (0.5 g L−1), (NH4) 2HPO4 (0.25 g L−1), CaCl2 (0.05 g L−1) NaCl (0.025 g L−1), MgSO4•7H2O (0.15 g L−1), ที-amine ไฮโดรคลอไรด์ (100 _g L−1), FeCl3•6H2O (003 g L−1), กลูโคส (10 g L−1), มอลต์สกัด (3 g L−1) และ agar (14 g L−1) Wasadjusted ค่า pH ไป 5.6 1 M HCl และสื่อ autoclaved สำหรับ 20 minat 120◦C สายพันธุ์เชื้อราทั้งหมดถูกเก็บเป็นย่อยทางวัฒนธรรมปลูก at24◦C ในสื่อเดียวกัน Inocula ผักเรื้อรังได้เตรียม asdescribed ใน Brundrett et al. (1996) สั้น ๆ: inoculawere ขนาดใหญ่ที่ผลิต โดย incubating ละ mycelium เชื้อราจากจาน Petri cultureson inoculated เข้ากับกระบอกทึบพื้นผิว (พรุ vermiculite ผสม 1:10, w:w), อิ่มตัวกับ MNM mediain เหลวขนาดใหญ่ถุงพลาสติก (1.5 L) คณะทันตแพทยศาสตร์ที่ได้รับการดำเนินที่ 30◦Cin มืดเป็นห้องสำหรับ 8 สัปดาห์

พืชเจริญเติบโตและ treatmentsEucalyptus globulus Labill ถั่ว bicostata (หญิงสาว et al.) เจB.Kirkp เมล็ดจำนวนมาก N◦16731 ได้รับจาก SeedCentre ต้นไม้ออสเตรเลีย (คิงส์ตัน บัญญัติ ออสเตรเลีย) เซีย spirorbis ถั่ว spirorbisLabill เมล็ดจำนวนมาก N◦036/11 ได้รับจากสถาบัน CaledonianAgronomic ใหม่ (IAC, Païta นิวแคลิโดเนีย) ชุดของ experi ments ถูกดำเนินในเรือนกระจกสำหรับปลูกต้นไม้เป็นตามที่อธิบายไว้ใน Brundrettet al. (1996) สั้น ๆ เมล็ดถูกบำบัดก่อนใน 2 นาทีใน ethanolsupplemented 70% 0.1% (v/v) Tween 20 แล้วผิว sterilized นาที for5 H2O2(30%) และหิน 3 ครั้งในกระบอกน้ำ Germina สเตรชันเกิดขึ้นหลังจาก 1 สัปดาห์ที่ 28◦C ในมืด กล้าไม้ได้ thenplaced สัปดาห์ในหอเติบโตกับ h 18/6 วัน/nightcycle ที่ความเข้มแสงของ 200 _mol m−2s−1photosynthetic activeradiation และ ที่อุณหภูมิ 25/18◦C อายุสองสัปดาห์ seedlingswere transplanted ลงในภาชนะพลาสติกของ andfilled 1 ลิตรความจุกับพื้นผิวเจริญเติบโต (i) เป็นกลางประกอบด้วยพื้นผิว (ii) ultramafic vermiculiteor จากไซต์ 4 (Dore มง) Wereinoculated พืชกับ 100 mL ของ inoculum mycelial อายุ 8 สัปดาห์ preparedas ข้าง พืช inoculated กับ aftersterilization inoculum ฆ่า โดย autoclaving (20 นาทีที่ 120◦C) ถูกใช้เป็นตัวควบคุม nonmycorrhizal ธาตุอาหารพืชที่ได้รับทั้งหมด โดยรดน้ำ thecontainers กับฟิลด์กำลังการผลิตมีปัญหาธาตุอาหาร (เป็น suggestedin Brundrett et al., 1996) ในองค์ประกอบความเข้มข้นสุดท้าย ofmineral แสดงใน ที่ มีพื้นผิว kg−1of มิลลิกรัม (w/w): NH4NO3, 36 K2SO4, 111.6 Ca (H2PO4) 2•H2O, 40 CaSO4•2H2O, 51.5MgSO4•7H2O, 33.7 FeCl3, 11 MnSO4•4H2O, 16.9 CuSO4•5H2O, 8.2ZnSO4•7H2O, 9.2 Na2B4O7•10H2O 1.1 (NH4) 6Mo7O24•4H2O, 0.46CoCl2•6H2O, 0.34 พืชที่ปลูกในเรือนกระจกสำหรับปลูกต้นไม้ภายใต้วงจรไฟ anatural เดือน 12 มีค่าเฉลี่ยสูงสุดและ imum นาทีอุณหภูมิ 20 ± 2◦C และ 25 ± 2◦C ตามลำดับ Waterwas ที่ใช้ฉีดพ่น 2 นาทีต่อชั่วโมง 6 ครั้งต่อวัน ระบบน้ำกำลังดำเนินกลางวันกลางคืน ครั้งต่อเดือน dressingof บน NH4NO3was ใช้ที่พื้นผิว kg−1of 30 mg Experimentswere ทั้งหมดดำเนินการในสาม assays เป็นอิสระ มีแต่ละ treatmentcontaining 15 โรงงานเหมือนกับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

mycelial วัฒนธรรมและ inoculumstock
ทางวัฒนธรรมในแต่ละ sporocarp ของ P . albus แยก wereobtained aseptically โดยการโอนการชิ้นของ pileus tramato แข็งแกร่งแก้ไข melin-norkrans ขนาดกลาง( mnm )(มาร์กซ์, 1969 )ประกอบด้วย: KH 2 PO 4 ( 0.5 G L - 1 ),( NH 4 ) 2 hpo 4 ( 0.25 G L - 1 ), cacl 2 ( 0.05 G L - 1 ), NaCl ( 0.025 กรัม L - 1 ), mgso 4 • 7 H 2 O ( 0.15 G L - 1 ),บ้านธิ - amine hydrochloride ( 100 _ g L - 1 ), fecl 3 • 6 H 2 O ( 0 )03 L G - 1 )กลูโคส( 10 กรัม L - 1 ),สูตรสกัด( 3 G L - 1 )และสาหร่ายทะเล( 14 กรัม L - 1 ). pH ที่ wasadjusted กับ 5.6 พร้อมด้วย 1 M HCL และ autoclaved ขนาดกลางสำหรับ 20 minat 120 ◦c ความตึงเครียดเชื้อราทั้งหมดได้รับการดูแลรักษาเป็นอย่างดีเป็นคณะอนุกรรมการ - วัฒนธรรมที่ 24 ◦c ในขนาดกลางเหมือนกับที่ inocula เป็นอัมพาตได้เตรียมความพร้อมใน brundrett asdescribed et al . ( 1996 ) ช่วงระยะเวลาสั้นๆinoculawere ขนาดใหญ่ผลิตโดยแต่ละศูนย์บ่มเพาะเชื้อรา mycelium จาก cultureson PETRI อาหาร inoculated เข้าไปในที่ฆ่าเชื้อขวดนมที่แข็งแกร่งซับสเตรต(โอเลแอนเดอร์สัน - vermiculite ผสมผสาน, 1 : 10 , W : W ),อิ่มตัวด้วย mnm ของเหลว mediain ขนาดใหญ่ใส่ถุงพลาสติก( 1.5 ลิตร) ผู้ประกอบการที่เป็นการกระทำที่ 30 ◦cin ห้องสีเข้มที่สำหรับ 8 สัปดาห์. J .

โรงงานและการขยายตัว treatmentseucalyptus globulus labill . subsp. bicostata (นามสกุลเดิม et al .)B . kirkp จำนวนมากเมล็ดพันธุ์ n◦ 16731 ได้มาจากออสเตรเลียทรี seedcentre ( Kingston พระราชบัญญัติประเทศออสเตรเลีย) Acacia spirorbis subsp. spirorbislabill จำนวน มาก 036/11 n◦ เมล็ดพันธุ์ได้จาก caledonianagronomic HOME กิจกรรมมูลนิธิ( iac païta New Caledonia ) ตั้งค่าของ experi - ประสิทธิภาพ เชิงสถิต( static efficiencies )เป็นการกระทำในเรือนกระจกที่ตามที่อธิบายไว้ใน brundrettet al . ( 1996 ) ช่วงระยะเวลาสั้นๆเมล็ดพันธุ์พืชได้ก่อนการปฏิบัติสำหรับ 2 นาทีใน ethanolsupplemented 70% พร้อมด้วย 0.1% ( v V /)เขา 20 แล้วพื้นผิวไปฆ่าเชื้อได้ทั้งใบเพื่อ 5 นาทีในชั่วโมง 2 O 2 ( 30% )และล้าง 3 ครั้งในน้ำฆ่าเชื้อขวดนม germina - การเกิดขึ้นหลังจาก 1 สัปดาห์ที่ 28 ◦c ในที่มืดมีต้นไม้แคระ thenplaced สำหรับหนึ่งสัปดาห์ในการขยายตัวช่องเก็บเศษหนวดด้วย 18/6 H วัน/ nightcycle ที่ความเข้มของแสง: 200 _mol ม. - 2 S - 1 การเปลี่ยนแปลงในทางเคมีโดยอาศัยแสง activeradiation และที่ อุณหภูมิ 25/18 ◦c . สองสัปดาห์ - เก่า seedlingswere สารเคมีเข้าไปใน ภาชนะ พลาสติกของ 1 ลิตรความจุ andfilled ด้วย( i )เป็นกลางการขยายตัวยึดเข้ากับฐานประกอบด้วย vermiculiteor ( ii ) ultramafic ยึดเข้ากับฐานจากเว็บไซต์ 4 ( Mont dore )พันธุ์ไม้ wereinoculated พร้อมด้วย 100 มล. preparedas 8 สัปดาห์ - เก่า mycelial inoculum อธิบายไว้ด้านบน พันธุ์ไม้ inoculated ด้วย aftersterilization ฆ่า inoculum โดย autoclaving ( 20 นาทีที่ 120 ◦c )ได้ถูกนำมาใช้ในการควบคุม nonmycorrhizal พันธุ์ไม้ต่างๆทั้งหมดที่ได้รับสารอาหารที่ยั่วน้ำลาย thecontainers เพื่อความจุสนามพร้อมด้วยโซลูชันสารอาหาร ประเภท (เป็น suggestedin brundrett et al .1996 )ซึ่งสุดท้ายความเข้มข้น ofmineral องค์ประกอบในมก.กก. - 1 ของซับสเตรต( W / W )ได้: NH 4 no3 , 36 , K 2 so4 , 111.6 , CA ( H 2 PO 4 ) 2 • H 2 O , 40 ; caso 4 • 2 H 2 O , 51.5 ; mgso 4 • 7 H 2 O , 33.7 , fecl3 , 11 ; mnso 4 • 4 H 2 O , 16.9 , cuso 4 • 5 H 2 O , 8.2 ; znso 4 • 7 H 2 O , 9.2 ,นา 2 B 4 o 7 • 10 H 2 O 1.1 ;( NH 4 ) 6 หมอ 7 O 24 • 4 H 2 O , 0.46 ; Phoshene )( COCl 2 • 6 H 2 O , 0.34 .พันธุ์ไม้ได้เติบโตในเรือนกระจกที่ตามวัฏจักรแสง anatural สำหรับ 12 เดือนมี อุณหภูมิ สูงสุดเฉลี่ยและต่ำสุด - imum 25 ± 2 ◦c และ 20 ± 2 ◦c ตามลำดับ waterwas นำมาใช้โดยการพ่นสเปรย์ 2 นาทีต่อชั่วโมง 6 ครั้งต่อวัน ระบบน้ำ - ไอเอ็นจีประกันชีวิตที่ใช้งานในยามค่ำคืนและวัน เดือนละหนึ่งครั้งบน dressingof NH 4 ไม่มี 3 ที่ถูกนำไปใช้ที่ 30 มก.กก. - 1 ของฐานexperimentswere ทั้งหมดดำเนินการในสาม assays treatmentcontaining แต่ละแบบอิสระที่พร้อมด้วย 15 หาดจอมเทียนโรงงาน.