2.5. Colour Change Recording
Since the developed biosensor was intended to be used in visual mode, so that colour changes during alcohol detection can be easily viewed by the naked eye, for quantification of colour measurements of the indicator, a simple method using a scanner (Cano Scan, Canon, Tokyo, Japan) was used.The colour change of the biosensor from green to blue was used as the measurable response of the biosensor toward ethanol, after the biosensor (as a dip stick test) was dipped to the sample solution for 5 s. The colour change of the biosensor was assessed using an ImageJ program, after it was scanned, to determine the mean RGB value of the colour. ImageJ is a public domain, Java-based image processing program developed at the National Institutes of Health [30]. It is also possible to solve many image processing and analysis problems using ImageJ’s built-in editor and a Java compiler [31–34]. ImageJ can be run as an online applet, a downloadable application, or on any computer with Java 5 or a virtual machine [35,36]. The source code for ImageJ is freely available and has made image analysis simple, practical and affordable.
2.6. Interferences Measurement
Methanol, gallic acid, cysteine, ascorbic acid and sodium sulphite (as preservative agent) were checked as potential interferences with the colour change of the biosensor response. For all of them, an adequate dilution (1:10) in phosphate buffer 0.1 M pH 7 was the only sample treatment needed. The biosensor in dip stick format was dipped into different solution samples and the colour changes were recorded using the experimental procedure described above. In addition, catalase (C3515 EC 1.11.1.6, 4,000 units/mg from Aspergillus niger, Sigma, ~10 units of catalase in phosphate buffer) was add to the sample that contained 1% of ethanol.
For application of ethanol detection in coloured solutionss, several colour interference tests have performed, by testing red wine (12% v/v, for red colour), orange (for yellow colour), apple (for brown) and grape juices (purple/dark colour). For all the fruit juices, 1% of ethanol was added to the samples. For all of them, an adequate dilution (1:10) in phosphate buffer 0.1 M pH 7 was needed for sample treatment. The biosensor was dipped in each different colored sample and after the color change, the fluid surrounding the surface of the biosensor was flushed gently with water to remove any colour bound on the surface, then the colour change was visually detected and recorded using the experimental procedure given above.
2.5 บันทึกการเปลี่ยนแปลงสีตั้งแต่ biosensor พัฒนาตั้งใจว่าจะใช้ในโหมดภาพ เพื่อให้การเปลี่ยนแปลงสีตรวจหาแอลกอฮอล์สามารถดูได้ง่าย ด้วยตาเปล่า การนับของการวัดสีของตัวบ่งชี้ มีใช้วิธีง่าย ๆ โดยใช้เครื่องสแกน (Cano Scan แคนนอน โตเกียว ญี่ปุ่น) การเปลี่ยนแปลงสีของ biosensor จากสีเขียวเป็นสีน้ำเงินใช้วัดผลตอบรับของ biosensor ต่อเอทานอล หลังจาก biosensor ตามจุ่มติด) ถูกจุ่มลงไปโซลูชันตัวอย่างสำหรับ 5 s เปลี่ยนสี biosensor ถูกประเมินโดยใช้โปรแกรม ImageJ หลังจากที่สแกน การกำหนดค่า RGB ของสีหมายถึง ImageJ คือ โดเมนสาธารณะ Java ตามภาพประมวลผลโปรแกรมที่พัฒนาขึ้นที่ในชาติสถาบันสุขภาพ [30] ก็ไปแก้ในรูปประมวลผลและวิเคราะห์ปัญหาของ ImageJ ในตัวแก้ไขและคอมไพเลอร์จาวา [31-34] ImageJ สามารถรัน เป็น ล็ตออนไลน์ โปรแกรมดาวน์โหลด หรือ บนคอมพิวเตอร์ ด้วย Java 5 หรือเครื่องจักรเสมือน [35,36] รหัสแหล่งที่มาสำหรับ ImageJ มีอิสระ และได้ทำการวิเคราะห์ภาพแบบง่าย การปฏิบัติ และราคาไม่แพง2.6 วัด interferencesเมทานอล กรด gallic, cysteine กรดแอสคอร์บิค และ sulphite โซเดียม (เป็นตัวแทน preservative) ถูกตรวจสอบเป็น interferences อาจมีการเปลี่ยนแปลงสีของการตอบสนอง biosensor ทั้งหมดของพวกเขา เจือจางที่เพียงพอ (1:10) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M pH 7 เป็นเฉพาะตัวอย่างการรักษาที่จำเป็น Biosensor ในรูปไม้จุ่มถูกจุ่มลงในโซลูชันต่าง ๆ ตัวอย่าง และบันทึกการเปลี่ยนแปลงสีโดยใช้กระบวนการทดลองที่อธิบายไว้ข้างต้น , Catalase (C3515 EC 1.11.1.6 หน่วย 4000 มิลลิกรัมจากสาธารณรัฐไนเจอร์ Aspergillus ซิก, ~ 10 หน่วยของ catalase ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์) ถูกเพิ่มลงในตัวอย่างที่มีอยู่ 1% ของเอทานอลใช้ตรวจหาเอทานอลในสี solutionss สัญญาณรบกวนสีต่าง ๆ ที่ได้ดำเนินการทดสอบ โดยทดสอบไวน์แดง (12% v/v สำหรับสีแดง), ส้ม (ตัวสีเหลือง), แอปเปิ้ล (สำหรับสีน้ำตาล) และองุ่นเปิด (สีม่วง/ดำ) สำหรับทั้งหมดน้ำผลไม้ 1% ของเอทานอลถูกเพิ่มเข้าไปตัวอย่าง สำหรับทั้งหมดของพวกเขา เจือจางที่เพียงพอ (1:10) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M pH 7 จำเป็นสำหรับการรักษาตัวอย่าง Biosensor ถูกจุ่มลงในตัวอย่างแต่ละสีแตกต่างกัน และหลังจากเปลี่ยนสี น้ำล้อมรอบผิวของ biosensor ถูกล้างเบา ๆ น้ำเอาสีต่าง ๆ ผูกไว้บนพื้นผิว นั้นเปลี่ยนสีที่พบเห็น และบันทึกไว้โดยใช้กระบวนการทดลองที่ให้ไว้ข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 เปลี่ยนสีได้บันทึก
ตั้งแต่การพัฒนาไบโอเซนเซอร์ตั้งใจที่จะนำมาใช้ในโหมดภาพเพื่อให้การเปลี่ยนแปลงสีในระหว่างการตรวจสอบเครื่องดื่มแอลกอฮอล์สามารถดูได้ง่ายด้วยตาเปล่าสำหรับปริมาณของการวัดสีของตัวบ่งชี้ที่เป็นวิธีการที่ง่ายใช้สแกนเนอร์ (คาโนสแกน , Canon, กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) เป็น used.The การเปลี่ยนแปลงสีของไบโอเซนเซอร์จากสีเขียวเป็นสีฟ้าที่ใช้เป็นที่วัดการตอบสนองของเอทานอลไบโอเซนเซอร์ที่มีต่อหลังจากที่ไบโอเซนเซอร์ (เป็นแบบทดสอบที่กรมทรัพย์สินทางปัญญาติด) ถูกจุ่มลงไปแก้ปัญหาตัวอย่างสำหรับ 5 s การเปลี่ยนสีของไบโอเซนเซอร์ได้รับการประเมินโดยใช้โปรแกรม ImageJ หลังจากที่มันได้รับการสแกนเพื่อตรวจสอบค่าเฉลี่ยค่า RGB ของสี ImageJ เป็นสาธารณสมบัติโปรแกรมการประมวลผลภาพ Java-based พัฒนาที่สถาบันสุขภาพแห่งชาติ [30] นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะแก้ปัญหาการประมวลผลภาพจำนวนมากและการวิเคราะห์โดยใช้ ImageJ บรรณาธิการในตัวคอมไพเลอร์และ Java [31-34] ImageJ สามารถใช้เป็นแอปเพล็ออนไลน์แอพลิเคชันที่ดาวน์โหลดหรือบนคอมพิวเตอร์ที่มี Java 5 หรือเครื่องเสมือนใด ๆ [35,36] รหัสที่มาสำหรับ ImageJ สามารถใช้ได้อย่างอิสระและได้ทำง่ายๆการวิเคราะห์ภาพในทางปฏิบัติและราคาไม่แพง.
2.6 รบกวนวัด
เมทานอล, ฝรั่งเศสกรด, cysteine วิตามินซีและโซเดียมซัลไฟต์ (เป็นตัวแทนสารกันบูด) ได้รับการตรวจสอบเป็นการรบกวนที่อาจเกิดขึ้นกับการเปลี่ยนแปลงสีของการตอบสนองไบโอเซนเซอร์ สำหรับทั้งหมดของพวกเขาลดสัดส่วนที่เพียงพอ (01:10) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M พีเอช 7 เป็นตัวอย่างการรักษาเฉพาะที่จำเป็น ไบโอเซนเซอร์ในรูปแบบจุ่มติดถูกจุ่มลงไปในตัวอย่างวิธีการแก้ปัญหาที่แตกต่างกันและการเปลี่ยนแปลงสีที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้ขั้นตอนการทดลองอธิบายไว้ข้างต้น นอกจากนี้ catalase (C3515 EC 1.11.1.6 4,000 หน่วย / มก. จากเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์ซิก ~ 10 หน่วย catalase ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต) เป็นเพิ่มกลุ่มตัวอย่างที่มี 1% ของเอทานอล.
สำหรับการประยุกต์ใช้การตรวจสอบเอทานอลใน solutionss สี สีหลายรบกวนการทดสอบได้ดำเนินการโดยการทดสอบไวน์แดง (12% v / V สีแดง), สีส้ม (สีเหลือง), แอปเปิ้ล (สีน้ำตาล) และน้ำผลไม้องุ่น (สีม่วง / สีเข้ม) สำหรับทุกน้ำผลไม้, 1% ของเอทานอลถูกบันทึกอยู่ในตัวอย่าง สำหรับทั้งหมดของพวกเขาลดสัดส่วนที่เพียงพอ (01:10) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M พีเอช 7 เป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการรักษาตัวอย่าง ไบโอเซนเซอร์ถูกจุ่มลงในแต่ละตัวอย่างสีที่แตกต่างกันและหลังการเปลี่ยนแปลงสีน้ำโดยรอบพื้นผิวของไบโอเซนเซอร์ที่ถูกล้างเบา ๆ ด้วยน้ำที่จะเอาสีใด ๆ ที่ถูกผูกไว้บนพื้นผิวแล้วเปลี่ยนสีที่ตรวจพบสายตาและบันทึกโดยใช้ขั้นตอนการทดลอง ดังกล่าวข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 เปลี่ยนสีบันทึก
ตั้งแต่การพัฒนาไบโอเซนเซอร์มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในโหมดภาพที่เปลี่ยนสีในช่วงตรวจจับแอลกอฮอล์สามารถดูได้ด้วยตาเปล่า สำหรับปริมาณของสีการวัดตัวบ่งชี้ วิธีง่าย ๆโดยใช้เครื่องสแกน ( สแกน CANO , แคนนอน , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) คือใช้การเปลี่ยนสีของไบโอเซนเซอร์จากสีเขียวเป็นสีฟ้าที่ใช้ในการตอบสนองการวัดของไบโอเซนเซอร์ต่อเอทานอล ไบโอเซนเซอร์หลัง ( เป็นจุ่มแท่งทดสอบ ) คืออาบให้โซลูชันตัวอย่าง 5 . สีเปลี่ยนของกระบวนการประเมินโดยใช้โปรแกรม ImageJ , หลังจากที่มันสแกนหาหมายถึง RGB ค่าของสี ImageJ เป็นโดเมนสาธารณะโปรแกรมประมวลผลภาพที่ใช้จาวาพัฒนาที่สถาบันสุขภาพแห่งชาติ [ 30 ] นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะแก้ไขปัญหาการประมวลผลภาพหลายและการวิเคราะห์โดยใช้ ImageJ ของในตัวบรรณาธิการและ Java ตัวแปลภาษา [ 31 – 34 ) ImageJ สามารถวิ่งเป็นแอปเพล็ออนไลน์ โปรแกรมที่สามารถดาวน์โหลดหรือในคอมพิวเตอร์เครื่องใดก็ได้ที่มีจาวาเครื่องเสมือน 35,36 [ 5 ]รหัสที่มาสำหรับ ImageJ สามารถใช้ได้อย่างอิสระ และมีการวิเคราะห์ภาพง่ายจริงและราคาไม่แพง
2.6 จากการศึกษาการวัด
เมทานอล , เพิ่มขึ้น , 8-12 , กรดแอสคอร์บิค และโซเดียมซัลไฟท์ ( เป็นตัวแทนสารกันบูด ) ถูกตรวจสอบโดยการแทรกแซงที่อาจเกิดขึ้นกับการเปลี่ยนสีของไบโอเซนเซอร์ตอบสนอง สำหรับทั้งหมดของพวกเขา การเจือจางเพียงพอ ( 1 : 10 ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 01 M พีเอช 7 เป็นเพียงตัวอย่างการรักษาที่จำเป็น โดยไบโอเซ็นเซอร์ในรูปแบบแท่งจิ้มจุ่มลงในตัวอย่างเป็นโซลูชั่นที่แตกต่างกันและสี การเปลี่ยนแปลงที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้การทดลองขั้นตอนที่อธิบายข้างต้น นอกจากนี้ คาตาเลส ( c3515 EC 1.11.1.6 4000 หน่วย / มิลลิกรัมจาก Aspergillus niger , Sigma , ~ 10 หน่วยของคะตะเลสในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ) คือเพิ่มตัวอย่างที่ประกอบด้วย 1% ของเอทานอล .
สำหรับการใช้เอทานอลตรวจจับสี solutionss การทดสอบสัญญาณรบกวนหลายสีแสดงโดยไวน์แดงทดสอบ ( 12 % v / v , สีแดง ) , สีส้ม ( สีเหลือง ) , แอปเปิ้ล ( สีน้ำตาล ) และผลไม้องุ่น ( สีม่วงเข้ม / สี ) สำหรับผลไม้ผลไม้ทั้งหมด , 1 % เอทานอลเพิ่มเติมตัวอย่าง สำหรับทั้งหมดของพวกเขา การเจือจางเพียงพอ ( 1 : 10 ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 01 M pH 7 ที่จำเป็นสำหรับตัวอย่างการรักษา โดยไบโอเซนเซอร์ถูกจุ่มลงในแต่ละที่แตกต่างกันสีตัวอย่างและหลังจากเปลี่ยนสี , ของเหลวรอบพื้นผิวของไบโอเซนเซอร์ถูกล้างเบา ๆ กับน้ำเพื่อลบสีผูกไว้บนพื้นผิว แล้วเปลี่ยนสีเป็นสายตาที่ตรวจพบและบันทึกไว้โดยใช้การทดลองขั้นตอนที่ระบุข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..