EFB collection and preparationEFB w

EFB collection and preparation
EFB was collected from a local palm oil processing mill in Klang, Malaysia. The bunch was dried at 100 ±
5°C and cut into smaller pieces. It was then milled, sieved, and separated in fractions using a test sieve shaker
(Endecotts EFL 2000). The particle size of EFB used for this study was in the range of 91-106 μm.
Bioconversion of EFB
1. Chemical pretreatment of EFB
The dried EFB at 10% (w/v) solid loading (10 g EFB in 100 ml H2SO4) were hydrolysed in H2SO4 solution
at different concentrations. The process parameters to be examined and optimised were: temperature (105 and
125°C), holding time (90 and 120 min) and acid concentration (0.5–3.0%, v/v). The hydrolysed biomass was
washed with hot water to a neutral pH. The hydrolysate was analysed for the content of sugars, and the solid
biomass was dried overnight at 80°C prior to delignification.
The optimised acid-pretreated EFB residue was subsequently delignified with different delignifying agents
i.e. NaOH, NaClO2, and H2O2 at 2.0% (w/v) concentration at 100°C for 1 h. The delignified biomass was then
filtered and the cellulosic residue was washed thoroughly with hot water and dried overnight at 80°C.
2. Enzymatic saccharification of pretreated EFB
The enzymatic hydrolysis was performed using a commercial cellulase derived from Trichoderma reesei
(Novozymes A/S, Bagsvaerd, Denmark). The amount of enzyme used was 30 FPU U/g of dry pretreated solid
(filter paper unit, FPU). One unit of FPU is defined as the enzyme amount which converts 1 µmol glucose
equivalents from Whatman no. 1 filter paper in 1 min reaction time [10]. Three non-ionic surfactants were tested
i.e. Tween 20, Tween 80 and Triton X-100 at 0.5% (v/v) concentrations to enhance saccharification and to
compare with the NaOH-pretreated EFB which is surfactant-free. The solid loading of 5.0% (w/v) EFB were
suspended in 50 mM citrate buffer (pH 4.8) and added with cellulase together with respective surfactants. The
samples were incubated at 50°C, 150 rpm for 72 h. Sample aliquots were withdrawn at 24 h interval and
analysed for the released sugars.
3. Microorganism growth conditions and fermentation
Saccharomyces cerevisiae ATCC 24860 was grown on YPD agar (1% yeast extract, 2% peptone, 2%
glucose and 1% agar) at room temperature for 3 days. To prepare a seed culture for bioethanol fermentation, S.
cerevisiae was cultivated in 10 ml YPD medium (1% yeast extract, 2% peptone and 2% glucose) for 18 h. Log
phase cultures of S. cerevisiae (10%, v/v) were used as inoculum and inoculated into a saccharified medium.
The samples were fermented employing optimised conditions as described in previous work [11] i.e. pH 4.0,
temperature of 30°C and agitation of 150 rpm. Sample aliquots were withdrawn at every 24 h interval up to 72 h
and quantified for its sugars consumption and bioethanol formation. Cell density was measured via absorbance
at 600 nm using UV/Vis spectrophotometer (Genesys 20, Thermo Scientific, USA).
Analytical procedures
1. Lignocellulosic compositions
The chemical compositions of pulverised EFB was analysed according to ASTM 1104-56 and ASTM
D1103-60 method for holocellulose and α-cellulose, respectively. For the gravimetric method of lignin
determination, 0.5 g of sample was weighed into a 100-ml Erlenmeyer flask and stirred for 2 h in 10 ml of cold
72% (v/v) H2SO4 solution. The mixture was transferred into a 500-ml beaker and boiled for 4 h in 300 ml
distilled water under continuous stirring. The mixture was filtered off using glass microfiber filter grade GF/B
(Whatman) in porcelain crucible. The residue retained on the filter was washed with hot water until it was acidfree
and allowed to dry at 105°C for 2 h and weighed.
The holocellulose - a composite of cellulose and hemicellulose - was extracted from EFB using acidified
sodium chlorite method. Approximately 24.0 g of sample was mixed with 960 ml distilled water and treated
with 3.0 ml acetic acid and 9.0 g sodium chlorite at 70-80°C for 4 h under continuous stirring. The mixture was
then washed with hot water, filtered and dried at 105°C for 24 h. Determination of holocellulose was carried out
using dry weight method. A total of 12.0 g of dried holocellulose obtained was further dissolved in 240 ml of
17.5% (v/v) NaOH solution and stirred for 30 min. A total of 60 ml of NaOH solution was added into the
mixture and allowed to mix to separate hemicellulose from the holocellulose and leaving α-cellulose. The
insoluble α-cellulose was filtered and washed separately with 8.3% (v/v) NaOH solution followed by 10% (v/v)
acetic acid. The α-cellulose was finally washed with hot water to a neutral pH and dried overnight at 80°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คอลเลกชัน EFB และเตรียมEFB รวบรวมจากโรงสีแปรรูปน้ำมันปาล์มท้องถิ่นกลาง มาเลเซีย พวงที่แห้งที่ 100 ±5° C และตัดเป็นชิ้นเล็ก มันถูกแล้วปลาย sieved และแยกแบบแยกส่วนโดยใช้การทดสอบตะแกรงเชคเกอร์(Endecotts EFL 2000) ขนาดอนุภาคของ EFB ที่ใช้สำหรับการศึกษานี้อยู่ในช่วงของ 91-106 μmBioconversion EFB1. เคมี pretreatment ของ EFBEFB แห้งที่ 10% (w/v) แข็งโหลด (10 g EFB ใน 100 ml กำมะถัน) ถูก hydrolysed ในโซลูชันกำมะถันที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน พารามิเตอร์กระบวนการตรวจสอบ และเหมาะงานกราฟฟิกได้: อุณหภูมิ (105 และ125 ° C), เวลา (90 และ 120 นาที) และความเข้มข้นกรด (0.5-3.0%, v/v) มีชีวมวล hydrolysedล้าง ด้วยน้ำอุ่นจะมี pH เป็นกลาง ด้วยการถูก analysed สำหรับเนื้อหาของน้ำตาล และของแข็งชีวมวลที่แห้งข้ามคืนที่ 80° C ก่อน delignificationการบวม pretreated กรด EFB สารตกค้างถูก delignified กับตัวแทน delignifying ที่แตกต่างกันในเวลาต่อมาเช่น NaOH, NaClO2 ก H2O2 ที่ความเข้มข้น 2.0% (w/v) ที่ 100° C สำหรับ 1 h ชีวมวล delignified ถูกแล้วกรอง และสารตกค้าง cellulosic ล้างสะอาด ด้วยน้ำอุ่น และแห้งข้ามคืนที่ 80 องศาเซลเซียส2. เอนไซม์ในระบบ saccharification ของ pretreated EFBทำไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบใช้ cellulase พาณิชย์ที่มาจาก Trichoderma reesei(Novozymes a/s, Bagsvaerd เดนมาร์ก) จำนวนของเอนไซม์ที่ใช้มี FPU U 30 กรัมของแข็งแห้ง pretreated(กระดาษกรองหน่วย FPU) กำหนดหน่วยของ FPU เป็นจำนวนเอนไซม์ที่แปลงกลูโคส µmol 1เทียบเท่าจากกระดาษกรอง Whatman หมายเลข 1 ในเวลา 1 นาทีปฏิกิริยา [10] ทดสอบ surfactants ionic ไม่สามเช่น Tween 20, Tween 80 และไตรตั้น X-100 ที่ความเข้มข้น 0.5% (v/v) เพื่อเพิ่ม saccharification และเพื่อเปรียบเทียบกับ EFB NaOH pretreated ซึ่งเป็นฟรี surfactant โหลด 5.0% (w/v) EFB ทึบได้หยุดชั่วคราวใน 50 มม.ซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 4.8) และเพิ่ม มี cellulase surfactants ที่เกี่ยวข้องกับการ ที่ตัวอย่างที่ incubated ที่ 50° C, 150 rpm สำหรับ aliquots 72 h. อย่างถูกถอนในช่วงเวลา 24 ชม และanalysed สำหรับน้ำตาลออก3. จุลินทรีย์ที่เจริญเติบโตสภาพและหมักSaccharomyces cerevisiae ATCC 24860 ถูกปลูกใน YPD agar (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% peptone, 2%กลูโคสและ 1% agar) ที่อุณหภูมิห้อง 3 วัน การเตรียมเมล็ดวัฒนธรรมสำหรับหมัก bioethanol, S.cerevisiae ที่ปลูกใน 10 ml YPD ปานกลาง (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% peptone และกลูโคส 2%) 18 h. ล็อกวัฒนธรรมระยะของ S. cerevisiae (10%, v/v) ถูกใช้เป็น inoculum และ inoculated เป็นกลาง saccharifiedตัวอย่างถูกหมักใช้เงื่อนไขบวมในงานก่อนหน้านี้ [11] เช่นค่า pH 4.0อุณหภูมิ 30° C และอาการกังวลต่อ 150 รอบต่อนาที ตัวอย่าง aliquots ถูกถอนในทุกช่วงเวลา 24 ชมถึง 72 hและ quantified สำหรับของน้ำตาลปริมาณและ bioethanol ก่อตัว เป็นวัดความหนาแน่นของเซลล์ผ่าน absorbanceที่ 600 nm โดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง UV/Vis (Genesys 20 เทอร์โมวิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา)ขั้นตอนวิเคราะห์1. องค์ที่ lignocellulosicจนเคมีของ pulverised EFB ถูก analysed ตาม ASTM 1104-56 และ ASTMวิธี D1103 60 holocellulose และα-เซลลูโลส ตามลำดับ สำหรับวิธีการ lignin ต้องกำหนด 0.5 g ของตัวอย่างให้น้ำหนักไป 100 ml Erlenmeyer หนาว และกวนสำหรับ h 2 ใน 10 ml ของเย็น72% (v/v) กำมะถันโซลูชัน ส่วนผสมเป็นแบบบีกเกอร์ 500 ml และต้มสำหรับ h 4 ใน 300 มล.น้ำกลั่นภายใต้กวนอย่างต่อเนื่อง ส่วนผสมที่กรองอย่างแก้ว microfiber กรองชั้น GF/B(Whatman) ในครูซิเบิลเครื่องเคลือบดินเผา สารตกค้างสะสมบนตัวถูกล้าง ด้วยน้ำอุ่นจนมัน acidfreeและได้รับอนุญาตให้แห้งที่ 105° C สำหรับ 2 h และชั่งน้ำหนักHolocellulose -เป็นส่วนประกอบของเซลลูโลสและ hemicellulose - ถูกสกัดจาก EFB ใช้ acidifiedโซเดียม chlorite วิธีการ ตัวอย่างประมาณ 24.0 g ผสมน้ำ 960 ml กลั่น และถือว่ามี 3.0 ml กรดอะซิติกและ 9.0 กรัมโซเดียม chlorite ที่ 70-80° C สำหรับ h 4 ใต้ต่อเนื่องกวน มีส่วนผสมแล้ว ล้าง ด้วยน้ำอุ่น กรอง และแห้งที่ 105° C 24 h. กำหนด holocellulose ได้ดำเนินการใช้วิธีน้ำหนักแห้ง จำนวน 12.0 g ของ holocellulose แห้งได้ถูกละลายใน 240 ml ของเพิ่มเติม17.5% (v/v) NaOH โซลูชัน และกวนใน 30 นาที จำนวน 60 มิลลิลิตรของ NaOH ถูกเพิ่มเข้าไปในตัวส่วนผสมและผสม hemicellulose จาก holocellulose และα-เซลลูโลสออกจากกัน ที่α-เซลลูโลสที่ไม่ละลายน้ำกรอง และล้างต่างหาก 8.3% (v/v) NaOH โซลูชันตาม ด้วย 10% (v/v)กรดอะซิติก Αเซลลูโลสและสุดท้ายล้าง ด้วยน้ำอุ่นจะมี pH เป็นกลาง และแห้งข้ามคืนที่ 80 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คอลเลกชัน EFB และการเตรียม
EFB ถูกเก็บรวบรวมจากการประมวลผลโรงงานน้ำมันปาล์มท้องถิ่นในกลางมาเลเซีย พวงแห้งที่ 100 ±
5 องศาเซลเซียสและตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ มันเป็นข้าวสารแล้วร่อนและแยกเศษส่วนโดยใช้เครื่องปั่นตะแกรงทดสอบ
(EFL Endecotts 2000) ขนาดอนุภาค EFB ใช้ในการศึกษาครั้งนี้อยู่ในช่วงของ 91-106 ไมครอน.
ทางชีวภาพของ EFB
1 การปรับสภาพทางเคมีของ EFB
EFB แห้ง 10% (w / v) โหลดของแข็ง (10 กรัม EFB ใน 100 มล. H2SO4) ถูกย่อยในการแก้ปัญหา H2SO4
ที่ระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน พารามิเตอร์กระบวนการที่จะตรวจสอบและปรับให้เหมาะสมคืออุณหภูมิ (105 และ
125 ° C) เวลาการถือครอง (90 และ 120 นาที) และความเข้มข้นของกรด (0.5-3.0% v / v) ชีวมวลย่อยได้รับการ
ล้างด้วยน้ำร้อนเพื่อค่า pH เป็นกลาง ไฮโดรไลวิเคราะห์เนื้อหาของน้ำตาลและของแข็ง
ชีวมวลแห้งค้างคืนที่ 80 ° C ก่อนที่จะ delignification.
ตกค้าง EFB กรดที่ดีที่สุดได้รับการปรับสภาพ delignified ต่อมาตัวแทน delignifying ที่แตกต่างกัน
คือ NaOH, NaClO2 และ H2O2 ที่ 2.0% (w / v) ความเข้มข้นที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ชีวมวล delignified แล้ว
กรองและสารตกค้างเซลลูโลสถูกล้างให้สะอาดด้วยน้ำร้อนและแห้งในชั่วข้ามคืนที่ 80 ° C.
2 saccharification เอนไซม์ของ EFB ปรับสภาพ
การย่อยของเอนไซม์ได้รับการดำเนินการโดยใช้เซลลูเลสในเชิงพาณิชย์ที่ได้มาจากเชื้อรา Trichoderma reesei
(Novozymes A / S, Bagsvaerd, เดนมาร์ก) ปริมาณของเอนไซม์ที่ใช้เป็น FPU 30 U / กรัมของของแข็งปรับสภาพแห้ง
(หน่วยกรองกระดาษ FPU) หนึ่งหน่วยของ FPU หมายถึงจำนวนเงินเอนไซม์ซึ่งจะแปลง 1 ไมโครโมลกลูโคส
เทียบเท่าจาก Whatman ไม่มี กระดาษ 1 ตัวกรองใน 1 นาทีเวลาปฏิกิริยา [10] สามลดแรงตึงผิวที่ไม่ได้มีการทดสอบไอออนิก
กล่าวคือ Tween 20 Tween 80 และ Triton X-100 ที่ 0.5% (v / v) เพื่อเพิ่มความเข้มข้น saccharification และ
เปรียบเทียบกับ NaOH EFB-ปรับสภาพผิวซึ่งเป็นฟรี โหลดแข็ง 5.0% (w / v) EFB ถูก
ระงับใน 50 มิลลิซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 4.8) และเพิ่มด้วยเซลลูเลสพร้อมกับลดแรงตึงผิวที่เกี่ยวข้อง
ตัวอย่างที่ถูกบ่มที่ 50 ° C, 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง aliquots ตัวอย่างถูกถอนออกในช่วงเวลา 24 ชั่วโมงและ
วิเคราะห์น้ำตาลปล่อยออกมา.
3 จุลินทรีย์สภาวะการเจริญเติบโตและการหมัก
Saccharomyces cerevisiae ATCC 24860 ได้รับการปลูกใน YPD วุ้น (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% เปปโตน, 2%
กลูโคสและวุ้น% 1) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 วัน เพื่อเตรียมความพร้อมวัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์สำหรับการหมักเอทานอลเอส
cerevisiae ได้รับการปลูกฝังใน 10 มล. ขนาดกลาง YPD (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% เปปโตนและกลูโคส 2%) เป็นเวลา 18 ชั่วโมง เข้าสู่ระบบ
วัฒนธรรมขั้นตอนของ S. cerevisiae (10% v / v) ถูกนำมาใช้เป็นหัวเชื้อและเชื้อเป็นสื่อ saccharified.
ตัวอย่างที่ถูกหมักเงื่อนไขการจ้างงานที่ดีที่สุดตามที่อธิบายไว้ในการทำงานก่อนหน้านี้ [11] คือค่า pH 4.0
อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส และการกวน 150 รอบต่อนาที aliquots ตัวอย่างถูกถอนออกในทุกช่วงเวลา 24 ชั่วโมงถึง 72 ชั่วโมง
และปริมาณน้ำตาลเพื่อการบริโภคและการก่อตัวของเอทานอล ความหนาแน่นของเซลล์ได้รับการวัดการดูดกลืนแสงผ่าน
ที่ 600 นาโนเมตรโดยใช้ UV / Vis spectrophotometer (Genesys 20, เทอร์โมวิทยาศาสตร์สหรัฐอเมริกา).
ขั้นตอนการวิเคราะห์
1 องค์ประกอบลิกโนเซลลูโลส
องค์ประกอบทางเคมีของ EFB แหลกลาญวิเคราะห์ตามมาตรฐาน ASTM 1104-56 และ ASTM
D1103-60 สำหรับวิธี holocellulose และα-เซลลูโลสตามลำดับ สำหรับวิธีการของลิกนิน gravimetric
กำหนด 0.5 กรัมของกลุ่มตัวอย่างได้รับการชั่งน้ำหนักเป็น Erlenmeyer ขวด 100 มล. และขยับเป็นเวลา 2 ชั่วโมง 10 มล. เย็น
72% (v / v) การแก้ปัญหา H2SO4 ส่วนผสมที่ถูกโอนเข้ามาในบีกเกอร์ขนาด 500 มล. และต้ม 4 ชั่วโมงใน 300 มล.
น้ำกลั่นภายใต้กวนอย่างต่อเนื่อง ส่วนผสมที่ถูกกรองออกโดยใช้กระจกกรองไมโครไฟเบอร์เกรด GF / B
(Whatman) ในเบ้าหลอมพอร์ซเลน ที่เหลือเก็บไว้ในตัวกรองที่ถูกล้างด้วยน้ำร้อนจนมันเป็น Acidfree
และได้รับอนุญาตให้แห้งที่อุณหภูมิ 105 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมงและชั่งน้ำหนัก.
holocellulose - คอมโพสิตของเซลลูโลสเฮมิเซลลูโลสและ - ถูกสกัดจากกรด EFB ใช้
วิธีโซเดียมคลอไร ประมาณ 24.0 กรัมของตัวอย่างผสมกับ 960 มล. น้ำกลั่นและรับการรักษา
ด้วย 3.0 มล. กรดอะซิติกและ 9.0 กรัมโซเดียมคลอไรที่ 70-80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงภายใต้การกวนอย่างต่อเนื่อง ส่วนผสมที่ถูก
ล้างแล้วด้วยน้ำร้อนกรองและแห้งที่อุณหภูมิ 105 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง การกำหนด holocellulose ได้ดำเนินการ
โดยใช้วิธีการของน้ำหนักแห้ง รวม 12.0 กรัม holocellulose แห้งก็เลือนหายไปได้ต่อไปใน 240 มล
17.5% (v / v) การแก้ปัญหา NaOH และขยับเป็นเวลา 30 นาที รวม 60 มล. ของการแก้ปัญหา NaOH ถูกบันทึกลงใน
ส่วนผสมและได้รับอนุญาตให้ผสมในการแยกจากเฮมิเซลลูโลส holocellulose และออกจากα-เซลลูโลส
ที่ไม่ละลายน้ำα-เซลลูโลสถูกกรองและแยกซักกับ 8.3% (v / v) การแก้ปัญหาตามด้วย NaOH 10% (v / v)
กรดอะซิติก α-เซลลูโลสในที่สุดถูกล้างด้วยน้ำร้อนที่จะมีค่า pH เป็นกลางและแห้งค้างคืนที่ 80 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้คอลเลกชันและการเตรียม
ใช้เก็บรวบรวมข้อมูลจากโรงงานสกัดน้ำมันปาล์ม ผลิตในท้องถิ่นใน Klang , มาเลเซีย พวงก็แห้ง 100 ±
5 ° C และตัดเป็นชิ้นเล็ก ก็สำหรับขนาดและแยกในส่วนที่ใช้ทดสอบตะแกรง Shaker
( endecotts EFL 2000 ) ขนาดอนุภาคของแก๊สที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ ในช่วงของการใช้ของ 91-106 μม.

1 .การบำบัดทางเคมีของแก๊สแห้งใช้
ที่ 10 % ( w / v ) ภาระของแข็ง ( 10 กรัม ใช้ในกรดซัลฟิวริก 100 มิลลิลิตรพบใน
โซลูชั่นกรดซัลฟิวริกที่ความเข้มข้นต่างๆ ขั้นตอนพารามิเตอร์ที่จะได้รับการตรวจสอบและเพิ่มประสิทธิภาพ ได้แก่ อุณหภูมิและ
125 °องศาเซลเซียส ) , ระยะเวลา ( 90 และ 120 นาที ) และความเข้มข้นของกรด ( 0.5 - 3.0 % v / v ) ส่วนที่เป็นชีวมวล
ล้างด้วยน้ำร้อนเพื่อการปร .มีผู้วิเคราะห์สำหรับเนื้อหาของน้ำตาล และชีวมวลของแข็ง
อยู่ค้างคืนที่ 80 องศา C ก่อนใช้แห้ง กรดแก๊ส
ที่ดีที่สุดได้รับสารตกค้างและ delignified ที่มี delignifying ตัวแทน
เช่น NaOH naclo2 และ H2O2 ที่ 2.0 % ( w / v ) ที่ความเข้มข้น 100 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง การ delignified ชีวมวลแล้ว
กรองและสารตกค้างเซลลูโลสถูกล้างให้สะอาดด้วยน้ำอุ่นและค้างคืนที่ 80 องศา C .
2 แห้ง เส้นผ่านเอนไซม์ของเอนไซม์เอนไซม์ใช้
การใช้เชิงพาณิชย์ได้มาจาก Trichoderma reesei
เซล ( กุ้ง / S , bagsvaerd , เดนมาร์ก ) ปริมาณของเอนไซม์ที่ใช้คือ 30 FPU U / g
( แข็งแห้งที่ผ่านหน่วยกรองกระดาษ FPU )หนึ่งหน่วย FPU หมายถึง เอนไซม์ที่แปลงเงิน 1 µโมลกลูโคส
เทียบเท่าจาก whatman 1 กรองกระดาษใน 1 นาทีเวลาปฏิกิริยา [ 10 ] สามด้านไม่ทดสอบ
เช่น Tween 20 , ทวีน 80 และ Triton X-100 ที่ 0.5% ( v / v ) และความเข้มข้นเพิ่ม

ถูกเปรียบเทียบกับ NaOH ที่ได้รับใช้ซึ่งเป็นสารลดแรงตึงผิวฟรี โหลดของแข็ง 50 % ( w / v ) ใช้เป็น
แขวนลอยใน 50 mm ซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 4.8 ) และเสริมด้วยเอนไซม์ร่วมกับสารลดแรงตึงผิวที่เกี่ยวข้อง
ตัวอย่างที่อุณหภูมิ 50 องศา C , 150 รอบ / นาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ตัวอย่างเฉยๆถูกถอนออกในช่วงเวลา 24 ชั่วโมง วิเคราะห์ออกน้ำตาลและ
.
3 จุลินทรีย์การเจริญเติบโตเงื่อนไขและหมัก Saccharomyces cerevisiae ATCC 24860
ปลูกบน ypd ( สารสกัดจากยีสต์ 1 %2% ตามลำดับ กลูโคส 2 %
1 % Agar ) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 วัน เพื่อเตรียมเพาะเมล็ดสำหรับการหมักเอทานอล , S .
S . cerevisiae คือปลูกใน 10 ml ( กลาง ypd extract 2 % สารสกัดจากยีสต์กลูโคส 1% และ 2% ) 18 . เข้าสู่ระบบ
เฟสวัฒนธรรมของ S . cerevisiae ( 10% v / v ) ที่ใช้เลี้ยงเชื้อ หัวเชื้อใน saccharified
)ตัวอย่างการเพิ่มประสิทธิภาพการหมักเงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ในก่อนหน้านี้ทำงาน [ 11 ] เช่น pH 4.0
อุณหภูมิ 30 องศา C และการกวน 150 รอบต่อนาที ตัวอย่างเฉยๆถูกถอนทุก 24 ชั่วโมง ช่วงถึง 72 H
และปริมาณน้ำตาลสำหรับการบริโภคและการพัฒนาเอทานอล . ความหนาแน่นเซลล์อยู่วัดผ่านการดูดกลืนแสง
ที่ 600 nm ใช้ UV / VIS Spectrophotometer ( เจเนซิส 20 , เทอร์โมวิทยาศาสตร์สหรัฐอเมริกา ) วิเคราะห์กระบวนการ

1 องค์ประกอบ lignocellulosic
องค์ประกอบทางเคมีของ pulverised ใช้วิเคราะห์ตามมาตรฐาน ASTM และมาตรฐาน ASTM 1104-56
d1103-60 วิธีการ holocellulose และแอลฟาเซลลูโลสตามลำดับ สำหรับวิธีการของลิกนินด้วย
กำหนด 0.5 กรัมของตัวอย่างหนักเป็น 100 ml ขวดเออร์เลนเมเยอร์กวน 2 H 10 ml ของเย็น
72 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กรดซัลฟิวริกโซลูชั่นส่วนผสมจะถูกถ่ายโอนลงในบีกเกอร์ 500 ml และต้มประมาณ 4 ชั่วโมง ใน 300 ml
น้ำใต้อย่างต่อเนื่อง กวน ส่วนผสมจะถูกกรองออก การใช้กระจกกรองไมโครไฟเบอร์เกรด GF / b
( whatman ) ในเบ้าเครื่องลายคราม สารตกค้างสะสมบนแผ่นกรองก็ล้างด้วยน้ำอุ่นจนมัน acidfree
และอนุญาตให้แห้งที่ 105 ° C 2 H
และชั่งน้ำหนักการ holocellulose - เป็นส่วนประกอบของเซลลูโลสและเฮมิเซลลูโลส - สกัดจากแก๊สที่ใช้โซเดียมไฮโปคลอไรท์
ปรับวิธี ประมาณ 24.0 กรัม จำนวน 960 ml ผสมกับน้ำกลั่นและปฏิบัติ
กับ 3.0 มล. กรด 9.0 กรัม และโซเดียมไฮโปคลอไรท์ที่ 70-80 องศา C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง ภายใต้อย่างต่อเนื่องกวน . ส่วนผสม
แล้วล้างด้วยน้ำอุ่น , กรองและอบแห้งที่อุณหภูมิ 105 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงการกำหนด holocellulose ทำการ
โดยใช้วิธีน้ำหนักแห้ง รวม 12.0 กรัม ละลายใน holocellulose แห้งได้รับเพิ่มเติม 240 มิลลิลิตร
17.5 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์และคนเป็นเวลา 30 นาที รวม 60 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ถูกเพิ่มลงในส่วนผสม และได้รับอนุญาตให้ผสม
แยกเฮมิเซลลูโลสจาก holocellulose และออกจากแอลฟาเซลลูโลส
แอลฟาเซลลูโลสที่ไม่ละลายน้ำถูกกรองและซักแยกกับ 8.3 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ตามด้วยสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ 10% ( v / v )
กรดแอซีติก และแอลฟาเซลลูโลสก็ล้างด้วยน้ำร้อนเพื่อ pH เป็นกลาง และค้างคืนที่ 80 องศา อบแห้ง