Among the a-s1 casein peptides iden

Among the a-s1 casein peptides identified by auto-MS/MS analysis,
three peptides were then selected according to their MS/MS
signal intensities and the absence of missed cleavages and posttranslational
modification sites (Johnson et al., 2011). In order to
0
10000
20000
30000
40000
50000
60000
70000
80000
90000
100000
0 20 40 60 80 100 120 140 160
peak area
milk concentration (mg/kg)
data set 1
data set 2
data set 3
calibration curve 1
calibration curve 2
calibration curve 3
Fig. 3. Plot of MS response versus added milk concentration: data obtained from three replicates of the calibration curve (5–150 mg/kg).
L. Cristina et al. / Food Chemistry 199 (2016) 119–127 123
avoid false-positive results, peptide sequence specificity was veri-
fied by BLAST search (algorithm: blastp; database: UniprotKB;
matrix: PAM 30). Table 1 reports m/z signals of selected peptides
and corresponding product ions. Based on the data reported in
Table 1, the MRM method was developed. According to their signal
intensity, transition 692.86 ? 920.49 m/z was chosen for protein
quantification, while transition 634.35 ? 991.56 m/z was monitored
for confirmatory purposes. LC–MS/MS chromatographic pro-
files of the two monitored transitions and the fragmentation
pattern of the corresponding peptides are shown in Fig. 2.
In order to develop a robust and reliable analytical method,
studies of linearity, sensitivity, accuracy, precision and recovery
were performed on the chosen peptide (FFVAPFPEVFGK), by
monitoring the corresponding 692.86 ? 920.49 m/z transition.
Linear dynamic range was explored over two orders of magnitude.
Linearity was mathematically verified by residual graphical
analysis. Only data points with a percentage error of less than 25%
were accepted. Moreover, more than 75% of calibration curve data
points were required to comply with our accuracy threshold, while
lowest and highest data points could not be excluded. According to
these criteria, the calibration curve was linear from 5 mg/kg to
150 mg/kg (six data points; equation: y = 558.38 ± 20.10x;
correlation coefficient greater than 0.99) (Fig. 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระหว่างเปปไทด์ของเคซีนเป็น s1 ที่ระบุ โดยอัตโนมัติ-MS/MS วิเคราะห์เปปไทด์สามแล้วเลือกตามของ MS/MSปลดปล่อยก๊าซสัญญาณและการขาดงาน ของพลาด cleavages และ posttranslationalปรับเปลี่ยนไซต์ (Johnson et al., 2011) ในอันที่จะ01000020000300004000050000600007000080000900001000000 20 40 60 80 100 120 140 160ตั้งสูงสุดน้ำนมเข้มข้น (mg/kg)ข้อมูลชุดที่ 1ข้อมูลชุดที่ 2ข้อมูลชุด 3เทียบเส้นโค้ง 1เทียบเส้นโค้ง 2เทียบเส้นโค้ง 3Fig. 3 พล็อตของ MS ตอบเทียบกับนมเพิ่มความเข้มข้น: ข้อมูลที่ได้จากการคัดลอกตัวเองสามโค้งเทียบ (5 – 150 mg/kg)L. เรจ et al. / เคมีอาหาร 199 (2016) 119-127 123หลีกเลี่ยงผลบวกเท็จ specificity ลำดับของเพปไทด์ veri-ฟองตามค้นหาระเบิด (อัลกอริทึม: blastp ฐานข้อมูล: UniprotKBเมตริกซ์: แพม 30) ตารางที่ 1 รายงานสัญญาณ m/z ของเปปไทด์ที่เลือกและผลิตภัณฑ์ที่สอดคล้องกัน ตามข้อมูลรายงานในตารางที่ 1 วิธี MRM ได้รับการพัฒนา ตามสัญญาณของพวกเขาความเข้ม เปลี่ยน 692.86 m 920.49 z ถูกเลือกให้เป็นโปรตีนนับ ขณะเปลี่ยน 634.35 มีการตรวจสอบ 991.56 m zสำหรับวัตถุประสงค์เสร็จ LC – MS/MS chromatographic pro-แฟ้มที่สองตรวจสอบช่วงการเปลี่ยนภาพและการกระจายตัวของแสดงรูปแบบของเปปไทด์ที่สอดคล้องกันใน Fig. 2การพัฒนาประสิทธิภาพ และความน่าเชื่อถือวิเคราะห์วิธีการศึกษาแบบดอกไม้ ความไว ความแม่นยำ ความแม่นยำ และการกู้คืนได้ดำเนินการบนเพปไทด์ท่าน (FFVAPFPEVFGK), โดยตรวจสอบ 692.86 ที่สอดคล้องกันหรือไม่ ช่วงการเปลี่ยนภาพ 920.49 m zช่วงเชิงเส้นถูกอุดมกว่าสองอันดับของขนาดแบบดอกไม้ถูกตรวจสอบ โดยส่วนที่เหลือจากกราฟิก mathematicallyวิเคราะห์ เฉพาะจุดข้อมูล มีข้อผิดพลาดเป็นเปอร์เซ็นต์น้อยกว่า 25%ยอมรับได้ นอกจากนี้ มากกว่า 75% ของการเทียบเส้นโค้งข้อมูลจุดที่ถูกต้องเพื่อให้สอดคล้องกับขีดจำกัดของความถูกต้อง ขณะที่ไม่แยกจุดต่ำสุด และสูงที่สุดจากข้อมูล ตามที่เกณฑ์เหล่านี้ เทียบเส้นโค้งเป็นเส้นตั้งแต่ 5 mg/kg ให้150 mg/kg (จุดข้อมูล 6 สมการ: y = 558.38 ± 20.10 xสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์มากกว่า 0.99) (Fig. 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ท่ามกลางเปปไทด์เคซีน-s1 ระบุอัตโนมัติ-MS / MS วิเคราะห์,
สามเปปไทด์ที่ถูกเลือกแล้วตาม MS / MS
ของพวกเขาความเข้มของสัญญาณและการขาดของปริพลาดและposttranslational
เว็บไซต์การปรับเปลี่ยน (จอห์นสัน et al., 2011) เพื่อที่จะได้
0
10000
20000
30000
40000
50000
60000
70000
80000
90000
100000
0 20 40 60 80 100 120 140 160
สูงสุดพื้นที่ความเข้มข้นของนม (mg / kg) ข้อมูลการตั้งค่า 1 ข้อมูลชุดที่ 2 ข้อมูลการตั้งค่า 3 กราฟมาตรฐาน 1 เส้นโค้งการสอบเทียบ 2 กราฟมาตรฐาน 3 มะเดื่อ. 3. พล็อตของการตอบสนองกับความเข้มข้นของ MS นมเพิ่ม:. ข้อมูลที่ได้รับจากสามซ้ำของเส้นโค้งการสอบเทียบ (5-150 มิลลิกรัม / กิโลกรัม) ลิตร คริสตินาและอัล / อาหารเคมี 199 (2016) 119-127 123 หลีกเลี่ยงผลบวกเท็จจำเพาะลำดับเปปไทด์ได้รับการพิสูจน์ความจริงกระแสไฟจากการค้นหาระเบิด (อัลกอริทึม: blastp; ฐานข้อมูล: UniprotKB; เมทริกซ์: PAM 30) ตารางที่ 1 รายงาน m / สัญญาณซีเปปไทด์ที่เลือกและไอออนผลิตภัณฑ์ที่สอดคล้องกัน บนพื้นฐานของข้อมูลที่มีการรายงานในตารางที่ 1 วิธี MRM ได้รับการพัฒนา ตามสัญญาณเข้มเปลี่ยน 692.86? 920.49 เมตร / z เป็นทางเลือกสำหรับโปรตีนปริมาณในขณะที่การเปลี่ยนแปลง634.35? 991.56 เมตร / z คือการตรวจสอบเพื่อวัตถุประสงค์ในการยืนยัน LC-MS / MS โปรโครไฟล์ของทั้งสองตรวจสอบการเปลี่ยนและการกระจายตัวรูปแบบของเปปไทด์ที่สอดคล้องกันมีการแสดงในรูป 2. เพื่อที่จะพัฒนาวิธีการวิเคราะห์ที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ศึกษาเชิงเส้นไวความถูกต้องแม่นยำและการกู้คืนได้ดำเนินการเกี่ยวกับการได้รับการแต่งตั้งเปปไทด์(FFVAPFPEVFGK) โดยการตรวจสอบ692.86 สอดคล้องกัน? 920.49 เมตร / การเปลี่ยนแปลงซี. เชิงเส้นช่วงแบบไดนามิกการสำรวจกว่าสองคำสั่งของขนาด. เส้นตรงคือการตรวจสอบทางคณิตศาสตร์โดยกราฟิกที่เหลือการวิเคราะห์ เฉพาะจุดที่ข้อมูลที่มีข้อผิดพลาดร้อยละของน้อยกว่า 25% ได้รับการยอมรับ นอกจากนี้กว่า 75% ของข้อมูลการสอบเทียบโค้งจุดที่ถูกต้องสอดคล้องกับเกณฑ์ความถูกต้องของเราในขณะที่ต่ำสุดและสูงสุดจุดข้อมูลที่ไม่สามารถได้รับการยกเว้น ตามเกณฑ์เหล่านี้เส้นโค้งการสอบเทียบเป็นเชิงเส้นจาก 5 มิลลิกรัม / กิโลกรัม 150 mg / kg (หกจุดข้อมูลสม: Y = 558.38 ± 20.10x; ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์สูงกว่า 0.99) (รูปที่ 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โครงการอันเนื่องมาจากพระราชดำริส่วนใหญ่จะเป็นวิธีการที่จะทำนุบำรุงและปรับปรุงสภาพทรัพยากรและสิ่งแวดล้อมให้ดีขึ้นในด้านต่างๆเช่นการอนุรักษ์และพัฒนาทรัพยากรธรรมชาติดิน a rescue และป่าไม้