Screening and Identification of Cel

Screening and Identification of Cellulase Producers
Five microlitres of overnight grown culture was spot plated
on CMC agar (0.2% NaNO3, 0.1% K2HPO4, 0.05% MgSO4,
0.05% KCl, 0.2% carboxymethylcellulose (CMC) sodium
salt, 0.02% peptone, and 1.7% agar) (HiMedia, India). Plates
incubated at 288C for 48 hours were flooded with 1% hexadecyltrimethyl
ammonium bromide (HAB) for 30 to 40
minutes [6]. From cellulase-producing microorganisms, two
potential bacterial strains RK3 (Gram ?ve) and MN34
(Gram –ve) and one fungal strain RS2 were selected for
identification and further studies. Genomic DNA from bacterial
strains was isolated and amplified by using universal
16S rRNA primers [9], and fungal DNA was isolated and
amplified by using internal transcribed spacer 1 (ITS 1) and
internal transcribed spacer 4 (ITS 4) primers [15]. The
amplified gene products were purified from agarose gel using
Qiaquick Gel Extraction Kit (Qiagen, Germany). Nucleotide

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การตรวจคัดกรองและบัตรประจำตัวของผู้ผลิตเซลลูเลส
ห้า microlitres ของวัฒนธรรมที่ปลูกในชั่วข้ามคืนได้รับการชุบจุด
cmc บนอาหารเลี้ยงเชื้อ (0.2% Nano3 0.1% K2HPO4 0.05% MgSO4,
0.05% kcl 0.2% carboxymethylcellulose (CMC) โซเดียม
เกลือ 0.02% เปปโตนและ 1.7% วุ้น) (himedia, อินเดีย) แผ่น
บ่มที่ 288C เป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่ถูกน้ำท่วมด้วย 1% hexadecyltrimethyl แอมโมเนียมโบรไมด์
(HAB) ใน 30 ถึง 40 นาที
[6]จากจุลินทรีย์ที่ผลิตเซลลูเลสสอง
ศักยภาพแบคทีเรีย rk3 (กรัม? ได้) และ mn34
(กรัมได้) และเป็นหนึ่งในสายพันธุ์ของเชื้อรา RS2 ถูกเลือกสำหรับการ
ประชาชนและการศึกษาต่อไป ดีเอ็นเอจากแบคทีเรีย
สายพันธุ์ที่แยกได้และขยายโดยใช้สากล
16s rRNA ไพรเมอร์ [9] และดีเอ็นเอของเชื้อราที่แยกได้และขยาย
โดยใช้ภายใน spacer คัดลอก 1 (1) และ
spacer คัดลอกภายใน 4 (ที่ 4) ไพรเมอร์ [15]
ขยายผลิตภัณฑ์ยีนที่บริสุทธิ์จากการใช้เจล agarose
qiaquick ชุดสกัดเจล (QIAGEN, เยอรมนี) เบื่อหน่าย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คัดกรองและผลิตรหัส Cellulase
ชุบ microlitres ห้าของแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์วัฒนธรรมปลูกถูกจุด
ใน CMC agar (0.2% NaNO3, 0.1% K2HPO4 % MgSO4,
0.05% KCl 0.05, 0.2% carboxymethylcellulose (CMC) โซเดียม
เกลือ peptone 0.02% และ 1.7% agar) (HiMedia อินเดีย) แผ่น
incubated ที่ 288C 48 ชั่วโมงถูกน้ำท่วม ด้วย 1% hexadecyltrimethyl
แอมโมเนียโบรไมด์ (ถล่ม) สำหรับ 30 ถึง 40
นาที [6] จาก cellulase ผลิตจุลินทรีย์ สอง
RK3 strains ของแบคทีเรียอาจเกิดขึ้น (กรัม? ve) และ MN34
(Gram –ve) และต้องใช้เชื้อราหนึ่ง RS2 ถูกเลือกสำหรับ
รหัสและศึกษาเพิ่มเติม Genomic DNA จากแบคทีเรีย
สายพันธุ์แยกต่างหาก และขยายโดยสากล
16S rRNA ไพรเมอร์ [9], และเชื้อราดีเอ็นเอถูกแยก และ
ขยาย โดยใช้เป็นตัวเว้นวรรคใช้ทับภายใน 1 (เป็น 1) และ
ภายในการทับศัพท์เป็นตัวเว้นวรรค 4 (เป็น 4) ไพรเมอร์ [15] ใน
ยีนเอาต์ได้บริสุทธิ์ใช้เจล agarose
Qiaquick เจแยกชุด (Qiagen เยอรมนี) นิวคลีโอไทด์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คัดกรองและการระบุตัวตนของ cellulase ผู้ผลิต
ห้า microlitres พักค้างคืนของวัฒนธรรมขึ้นเป็นที่เคลือบทอง
บนเจ๋อหมิสาหร่ายทะเล( 0.2% nano3 , 0.1% K 2 hpo4 , 0.05% mgso4 ,
0.05% kcl , 0.2% carboxymethylcellulose (เจ๋อหมิ)(
เกลือ, 0.02% เนื้อยุ่ยเมื่อถูกเพพซิน,และ 1.7% สาหร่ายทะเล)( himedia ,อินเดีย) แผ่นทำความร้อน
incubated ที่ 288 C สำหรับ 48 ชั่วโมงมีน้ำท่วมพร้อมด้วย 1% hexadecyltrimethyl
its ammonium ไม่น่าทึ่ง(ตัวเบียนฯลฯทํา)สำหรับ 30 ถึง 40
นาที[ 6 ]จาก cellulase - จุลชีพการผลิต,สอง
ศักยภาพ เกิดจากเชื้อแบคทีเรียพันธุ์ RK 3 (กรัม? ve )และนาที 34
(กรัม - ve )และหนึ่งเชื้อราความเมื่อยล้า RS 2 คนที่เลือกสำหรับ
การระบุตัวตนและการศึกษาต่อไป. ดีเอ็นเอ genomic จากเกิดจากเชื้อแบคทีเรีย
พันธุ์เป็นโดดเดี่ยวและแอมพลิฟายโดยการใช้อเนกประสงค์
16 S rrna primers [ 9 ]และดีเอ็นเอเป็นเชื้อราและ
แอมพลิฟายโดยการใช้ ภายใน ถอดสคริปต์ spacer graphic 1 ( 1 ของ)และ
ถอดสคริปต์ spacer graphic ภายใน 4 ( 4 ของ) primers [ 15 ] ผลิตภัณฑ์ ยีนที่
แอมพลิฟายก็บริสุทธิ์จากเจล agarose โดยใช้เจลการขุดชุด
qiaquick ( qiagen เยอรมัน) nucleotide
ตามมาตรฐาน