Northern blot analysis showed that

Northern blot analysis showed that Venus siRNAs arisen from the dsVenus accumulated at comparable level irrespective of co-infection with VIp19, VI⊿p19, V2Ip19 or V2I⊿p19, comfirming induction of RNA silencing by the dsVenus (Figure 3C). Quantitative RTPCR
analysis indicated that co-infection of the dsVenus construct decreased Venus accumulation in VIp19 and VI⊿p19 to half of that without dsVenus (Figure 3D). This result may indicate that neither VIp19 nor VI⊿p19 mRNAs were protected from RNA silencing. In contrast, co-infection of dsVenus decreased the accumulation of Venus in both V2I⊿p19 and V2Ip19 but the reduction was less in V2Ip19 than in V2I⊿p19 (Figure 3E). We confirmed these results by microscopic examination. After co-infection with dsVenus, fluorescence of Venus from V2Ip19 was clearly observed while weaker fluorescence was seen in VIp19 (Figure 3F). When p19 protein translation was inhibited by replacing the first codon with TTG (V2I⊿p19) we could observe very low fluorescence at the same level as that of VIp19 when coinfected with dsVenus. This result indicated polycistronic expression and translation of p19 protein suppressed its own mRNA gene silencing depending on the dose of p19.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คืนในตาเหนือวิเคราะห์พบว่า siRNAs วีนัสเกิดจาก dsVenus ที่สะสมระดับเทียบไม่ติดเชื้อร่วมกับ VIp19, VI⊿p19, V2Ip19 หรือ V2I⊿p19, comfirming การเหนี่ยวนำของอาร์เอ็นเอ silencing โดย dsVenus (รูปที่ 3C) เชิงปริมาณ RTPCRวิเคราะห์ระบุว่า ติดเชื้อร่วมของ dsVenus การก่อสร้างลดลงสะสมวีนัสใน VIp19 และ VI⊿p19 ครึ่งหนึ่งของที่โดย dsVenus (ภาพ 3D) ผลนี้อาจบ่งชี้ว่า mRNAs ทั้ง VIp19 และ VI⊿p19 ไม่ถูกป้องกันจากอาร์เอ็นเอ silencing ในทางตรงกันข้าม ติดเชื้อร่วมของ dsVenus ลดลงสะสมของวีนัสทั้ง V2I⊿p19 และ V2Ip19 แต่ที่ลดถูก V2Ip19 ในน้อยกว่าใน V2I⊿p19 (รูปที่ 3E) เรายืนยันผลลัพธ์เหล่านี้ โดยตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ หลังจากการติดเชื้อร่วมกับ dsVenus, fluorescence ของวีนัสจาก V2Ip19 ได้ชัดเจนสังเกตขณะ weaker fluorescence ถูกเห็นใน VIp19 (รูปที่ 3F) เมื่อ p19 โปรตีนแปลถูกห้าม โดยแทนรหัสพันธุกรรมแรก TTG (V2I⊿p19) เราสามารถสังเกต fluorescence ต่ำมากในระดับเดียวกันกับ VIp19 เมื่อ coinfected กับ dsVenus ผลนี้แสดงนิพจน์ polycistronic และแปลของโปรตีน p19 ระงับตัวเอง mRNA ยีน silencing ขึ้นอยู่กับปริมาณของ p19

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์ทางตอนเหนือของดวงแสดงให้เห็นว่าดาวศุกร์ siRNAs เกิดขึ้นจาก dsVenus สะสมในระดับที่เทียบเคียงได้โดยไม่คำนึงถึงการติดเชื้อร่วมกับ VIp19, VI⊿p19, V2Ip19 หรือV2I⊿p19, comfirming การเหนี่ยวนำของสมร RNA โดย dsVenus (รูปที่ 3 C) ปริมาณ RTPCR
วิเคราะห์ชี้ให้เห็นว่าการติดเชื้อร่วมของโครงสร้าง dsVenus ลดลงสะสมวีนัส VIp19 และVI⊿p19ถึงครึ่งหนึ่งของที่ได้โดยไม่ต้อง dsVenus (รูป 3D) ผลที่ได้นี้อาจบ่งชี้ว่าไม่ VIp19 หรือVI⊿p19 mRNAs ได้รับการคุ้มครองจากสมรอาร์เอ็นเอ ในทางตรงกันข้ามการติดเชื้อร่วมของ dsVenus ลดการสะสมของดาวศุกร์ทั้งในและV2I⊿p19 V2Ip19 แต่ลดน้อยใน V2Ip19 กว่าในV2I⊿p19 (3E รูป) เราได้รับการยืนยันผลการเหล่านี้โดยการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ หลังจากติดเชื้อร่วมกับ dsVenus, การเรืองแสงของดาวศุกร์จาก V2Ip19 ก็สังเกตเห็นได้อย่างชัดเจนในขณะที่เรืองแสงที่อ่อนแอกว่าที่เห็นใน VIp19 (รูป 3F) เมื่อแปลโปรตีน p19 ถูกยับยั้งโดยการเปลี่ยน codon ครั้งแรกกับ TTG (V2I⊿p19) เราสามารถสังเกตการเรืองแสงที่ต่ำมากในระดับเดียวกับที่ของ VIp19 เมื่อ coinfected กับ dsVenus ผลที่ได้นี้ชี้ให้เห็นการแสดงออกและการแปล polycistronic ของโปรตีน p19 ปราบปรามสมรยีน mRNA ของตัวเองขึ้นอยู่กับปริมาณของ P19

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Northern blot analysis พบว่า sirnas ดาวศุกร์ที่เกิดจาก dsvenus สะสมในระดับเทียบเท่าโดยไม่คำนึงถึง Co มีการติดเชื้อ vip19 6 ⊿ p19 v2ip19 , หรือวีทูไอ⊿ p19 comfirming , การเหนี่ยวนำโดย dsvenus silencing RNA ( รูปที่ 3 )
rtpcr เชิงปริมาณการวิเคราะห์พบว่า CO การติดเชื้อของ dsvenus สร้างลดลง วีนัส ที่สะสมใน vip19 และ 6 ⊿ p19 ครึ่งหนึ่ง โดยที่ dsvenus ( รูปที่ 3 ) ผลที่ได้นี้อาจบ่งชี้ว่าทั้ง vip19 หรือ 6 ⊿ p19 รหัสได้รับการปกป้องจาก RNA สามารถ . ในทางตรงกันข้ามการติดเชื้อของ dsvenus CO ลดลงการสะสมของวีนัส ทั้งในและ⊿วีทูไอ p19 v2ip19 แต่ลดน้อยใน v2ip19 มากกว่าวีทูไอ⊿ p19 ( รูป 3E ) เรายืนยันผลลัพธ์เหล่านี้ด้วยกล้องจุลทรรศน์ . หลังจากร่วมการติดเชื้อกับ dsvenus เรืองแสงของดาวศุกร์จาก v2ip19 ชัดเจนสังเกตในขณะที่แข็งแกร่งเรืองแสงที่เห็นใน vip19 ตัวเลข ( ขา )เมื่อโปรตีนแปล p19 ถูกยับยั้งโดยการแทนที่ codon แรกกับทีทีจี ( วีทูไอ⊿ p19 ) เราสามารถสังเกตการเรืองแสงต่ำมากในระดับเดียวกันกับของ vip19 เมื่อจาก dsvenus . พบการแสดงออกของโปรตีนยับยั้ง polycistronic และการแปล p19 ของตัวเองของยีนไซเลนซิง ขึ้นอยู่กับปริมาณของ p19 .