กรดอะมิโนวิเคราะห์วิธีการย่อยกรดของ

กรดอะมิโนวิเคราะห์
วิธีการย่อยกรดของวัสดุโปรตีน
ดัดแปลงมาจาก Zumwalt et al, [22] หลอดทดสอบที่มี
ฝาเกลียวที่มีการเคลือบ PTFE ได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างจริงจัง
10 มิลลิกรัมของวัสดุที่แห้ง ตัวอย่างแต่ละ 2 มิลลิลิตร
กรดไฮโดรคลอริก (HCl) 6 M ถูกบันทึก; เนื้อหาของ
หลอดถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวอพยพในช่วง 1 นาที
กับปั๊มสุญญากาศและเติมด้วยไนโตรเจน หลังจาก
ละลายระงับถูก sonicated เป็นเวลา 5 นาทีใน
อาบน้ำอัลตราซาวนด์ที่อุณหภูมิห้อง ขั้นตอนของการ
แช่แข็งสูญญากาศ sonication ซ้ำเป็นครั้งที่สอง
การย่อยสลายเกิดขึ้นในช่วง 24 ชั่วโมงที่ 110 องศาเซลเซียสโดยใช้ความร้อน
กลุ่ม หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง 500 LL ของ
มะเดื่อ 1 ลูกแพร์เอส Bartolomeu
ลูกแพร์สดและแห้งโดยลูกแพร์
เทคโนโลยีที่แตกต่างกัน
ขดั้งเดิมค GH1, D GH2
และ e HAT
Eur อาหาร Res เทคโนโลยี (2011) 233: 637-646 639
123
สารละลายมาตรฐานภายใน (norleucine 5.0 มิลลิใน HCl
0.1 M) ถูกบันทึกและเนื้อหาหลอดถูกระเหยไป
ความแห้งกร้านภายใต้สุญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยง
วัตถุอันเป็นผลถูกละลายใน 1 มิลลิลิตร 0.1 M HCl และ
กรอง 0.45 ไมครอนกรอง สำหรับการวิเคราะห์ของอะมิโนอิสระ
กรด 10 มิลลิกรัมของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกระงับใน 2 มิลลิลิตร
การแก้ปัญหาของ HCl 0.1 M และถูกแทงด้วยของ 500 LL
ภายในสารละลายมาตรฐาน ระงับถูกทิ้งกวน
เป็นเวลาหลายชั่วโมงแล้วถูกกรองด้วยตัวกรอง 0.45 ไมครอน
การแก้ปัญหาที่มีการปล่อยตัวเป็นกรดอะมิโน
แห้งภายใต้สูญญากาศใช้เครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยง
อนุพันธ์ของกรดอะมิโนสำหรับการวิเคราะห์ GC เป็น
ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายโดย
แม็คเคนซี่, et al [23] สารตกค้างที่เป็นของแข็งเป็นผล
ละลายใน 200 LL ของการแก้ปัญหาของ 3 M HCl ใน isobutanol
การแก้ปัญหานี้ถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 270 LL ของ acetyl
คลอไรด์ต่อมิลลิลิตร isobutanol แห้ง; isobutanol แห้ง
ไฮไดรด์ที่มีแคลเซียมกลั่นและเก็บไว้กับโมเลกุล
sieves 4 ° ส่วนผสมที่ถูกความร้อนถึง 120 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที
และหลังจากที่เขย่าในน้ำวน, ถูกความร้อนต่อการ
30 นาที หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิโดยรอบส่วนที่เกินจาก
สารระเหยได้รับภายใต้สูญญากาศใช้แรงเหวี่ยง
สิ่งที่ทำให้ระเหิด จากนั้น 200 LL ของการแก้ปัญหา 0.2 มิลลิกรัมมิลลิลิตร-1
บาทจัดทำขึ้นเอทิลอะซิเตถูกบันทึกและตัวทำละลาย
จะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยง
หลังจากนั้น 100 LL ของสารประกอบ heptafluorobutyric เป็น
เพิ่มและส่วนผสมที่ถูกความร้อนในช่วง 10 นาทีที่ 150 องศาเซลเซียส
หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องเกินของตัวทำละลาย
จะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศและวัสดุที่ได้รับคือ
ละลายใน 50 LL ของน้ำนมและวิเคราะห์ได้ทันที
หรือแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์
แยกกรดอะมิโนได้สำเร็จโดยโคก๊าซ
การดำเนินการใน PerkinElmer Clarus 400
เครื่องดนตรี (PerkinElmer, Massachusetts, สหรัฐอเมริกา) ติดตั้ง
กับเครื่องตรวจจับเปลวไฟ Ionisation (FID) หัวฉีดเป็น
เก็บไว้ที่ 250 องศาเซลเซียสและเครื่องตรวจจับที่ 260 องศาเซลเซียส ไฮโดรเจนเป็น
ใช้เป็นก๊าซ DB-1 (30 ม., 0.25 มม i.d. และ
0.15 ความหนา LM) คอลัมน์ฝอยผสมซิลิกา (J & W
วิทยาศาสตร์) ถูกนำมาใช้กับโปรแกรมอุณหภูมิต่อไปนี้:
1 นาทีไว้ที่ 70 องศาเซลเซียสเพิ่มขึ้นถึง 170? C ที่ 2.0 องศาเซลเซียส /
นาทีแล้วถึง 250? C (5 นาทีถือ) ที่ 16 องศาเซลเซียส 1 นาที
สารที่ถูกระบุโดยครั้งของพวกเขาและการเก็บรักษา
โครมาเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่แท้จริง
ปริมาณก็ขึ้นอยู่กับวิธีการมาตรฐานภายใน
โดยใช้ L-norleucine และเส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกสร้างขึ้นมาเพื่อ
กรดอะมิโน 18 สำหรับ asparagine (Asn) และกรด aspartic
(งูเห่า) เช่นเดียวกับการ glutamine (Gln) และกรดกลูตามิก
(Glu) วิธีการที่ไม่อนุญาตให้มีความแตกต่าง
ระหว่างเอไมด์และฟังก์ชั่นกรดคาร์บอกซิ เป็นเช่นนี้
กรดอะมิโนเหล่านั้นถูกวัดกันเป็น ASX และ Glx,
ตามลำดับ นอกจากนี้วิธีการที่ใช้ไม่อนุญาตให้
การตรวจสอบของเขา ขีด จำกัด ของปริมาณของการวิเคราะห์
กรดอะมิโนที่มุ่งมั่นจะเป็นสิบครั้งค่าของ
ยอดสัญญาณที่เหลือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรดอะมิโนวิเคราะห์วิธีการย่อยกรดของวัสดุโปรตีนดัดแปลงมาจาก Zumwalt et al หลอดทดสอบที่มี [22]ฝาเกลียวที่มีการเคลือบไฟเบอร์ได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างจริงจัง10 มิลลิกรัมของวัสดุที่แห้งตัวอย่างแต่ละ 2 มิลลิลิตรกรดไฮโดรคลอริก (HCl) 6 M ถูกบันทึก เนื้อหาของหลอดถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวอพยพในช่วง 1 นาทีกับปั๊มสุญญากาศและเติมด้วยไนโตรเจนหลังจากละลายระงับถูก sonicated เป็นเวลา 5 นาทีในอาบน้ำอัลตราซาวนด์ที่อุณหภูมิห้องขั้นตอนของการแช่แข็งสูญญากาศ sonication ซ้ำเป็นครั้งที่สองการย่อยสลายเกิดขึ้นในช่วง 24 องศาเซลเซียสโดยใช้ความร้อนชั่วโมงที่ 110นั้น ๆ จะหลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง 500 กลุ่มมะเดื่อ Bartolomeu 1 ลูกแพร์เอสลูกแพร์สดและแห้งโดยลูกแพร์เทคโนโลยีที่แตกต่างกันขดั้งเดิมค GH1, D GH2และอีหาดใหญ่Eur อาหารทรัพยากรเทคโนโลยี (2011) 233:637-646 639123สารละลายมาตรฐานภายใน (มิลลิใน norleucine 5.0 HClถูกบันทึกและเนื้อหาหลอดถูกระเหยไป 0.1 M)ความแห้งกร้านภายใต้สุญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงวัตถุอันเป็นผลถูกละลายใน 1 มิลลิลิตร 0.1 M HCl และสำหรับการวิเคราะห์ของอะมิโนอิสระไมครอนกรองกรอง 0.45กรด 10 มิลลิกรัมของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกระงับใน 2 มิลลิลิตรLL และถูกแทงด้วยของ 500 การแก้ปัญหาของ HCl 0.1 Mภายในสารละลายมาตรฐานระงับถูกทิ้งกวนเป็นเวลาหลายชั่วโมงแล้วถูกกรองด้วยตัวกรอง 0.45 ไมครอนการแก้ปัญหาที่มีการปล่อยตัวเป็นกรดอะมิโนแห้งภายใต้สูญญากาศใช้เครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงอนุพันธ์ของกรดอะมิโนสำหรับการวิเคราะห์ GC เป็นดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายโดยแม็คเคนซี่ สารตกค้างที่เป็นของแข็งเป็นผล et al [23]ละลายใน 200 LL ของการแก้ปัญหาของ 3 M HCl ใน isobutanolLL acetyl การแก้ปัญหานี้ถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 270 นั้น ๆคลอไรด์ต่อมิลลิลิตร isobutanol แห้ง isobutanol แห้งไฮไดรด์ที่มีแคลเซียมกลั่นและเก็บไว้กับโมเลกุลsieves 4 °ส่วนผสมที่ถูกความร้อนถึง 120 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและหลังจากที่เขย่าในน้ำวน ถูกความร้อนต่อการหลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิโดยรอบส่วนที่เกินจาก 30 นาทีสารระเหยได้รับภายใต้สูญญากาศใช้แรงเหวี่ยงของการแก้ปัญหาจะจากนั้น 200 สิ่งที่ทำให้ระเหิด 0.2 มิลลิกรัมมิลลิลิตร-1บาทจัดทำขึ้นเอทิลอะซิเตถูกบันทึกและตัวทำละลายจะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงหลังจากนั้น 100 LL ของสารประกอบ heptafluorobutyric เป็นเพิ่มและส่วนผสมที่ถูกความร้อนในช่วง 10 องศาเซลเซียสนาทีที่ 150หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องเกินของตัวทำละลายจะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศและวัสดุที่ได้รับคือของน้ำนมและวิเคราะห์ได้ทันทีจะละลายใน 50องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์หรือแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20แยกกรดอะมิโนได้สำเร็จโดยโคก๊าซการดำเนินการใน PerkinElmer Clarus 400ติดตั้งเครื่องดนตรี (PerkinElmer แมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา)กับเครื่องตรวจจับเปลวไฟ Ionisation (FID) หัวฉีดเป็นเก็บไว้ที่ 250 องศาเซลเซียสและเครื่องตรวจจับที่ 260 องศาเซลเซียสไฮโดรเจนเป็นใช้เป็นก๊าซ DB-1 (30 ม 0.25 มมประชาชนและ0.15 ความหนา LM) คอลัมน์ฝอยผสมซิลิกา (J และ Wถูกนำมาใช้กับโปรแกรมอุณหภูมิต่อไปนี้วิทยาศาสตร์):170 องศาเซลเซียสเพิ่มขึ้นถึงนาทีไว้ที่ 70 1 องศาเซลเซียส 2.0 C /นาทีแล้วถึง 250 ซี (5 นาทีถือ) 16 องศาเซลเซียส 1 นาทีสารที่ถูกระบุโดยครั้งของพวกเขาและการเก็บรักษาโครมาเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่แท้จริงปริมาณก็ขึ้นอยู่กับวิธีการมาตรฐานภายในโดยใช้ L norleucine และเส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกสร้างขึ้นมาเพื่อAspartic และกรดกรดอะมิโน 18 สำหรับ asparagine (Asn)และกรดกลูตามิก glutamine (Gln) เช่นเดียวกับการ (งูเห่า)(Glu) วิธีการที่ไม่อนุญาตให้มีความแตกต่างระหว่างเอไมด์และฟังก์ชั่นกรดคาร์บอกซิเป็นเช่นนี้กรดอะมิโนเหล่านั้นถูกวัดกันเป็น ASX และ Glxตามลำดับนอกจากนี้วิธีการที่ใช้ไม่อนุญาตให้การตรวจสอบของเขาขีดจำกัดของปริมาณของการวิเคราะห์กรดอะมิโนที่มุ่งมั่นจะเป็นสิบครั้งค่าของยอดสัญญาณที่เหลือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Zumwalt et al, [22] PTFE ได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างจริงจัง10 มิลลิกรัมของวัสดุที่แห้งตัวอย่างแต่ละ 2 มิลลิลิตรกรดไฮโดรคลอริก (HCl) 6 M ถูกบันทึก; 1 หลังจากถูกระงับละลาย sonicated เป็นเวลา 5 ขั้นตอนของการแช่แข็งสูญญากาศ sonication 24 ชั่วโมงที่ 110 องศาเซลเซียสโดยใช้ความร้อนกลุ่ม 500 LL ของมะเดื่อ 1 ลูกแพร์เอส GH1, D GH2 และอีหมวกEur อาหาร Res เทคโนโลยี (2011) 233: 637-646 639 123 สารละลายมาตรฐานภายใน (norleucine 5.0 มิลลิใน HCl 0.1 M) 1 มิลลิลิตร 0.1 M HCl และกรอง 0.45 ไมครอนกรอง 10 2 มิลลิลิตรการแก้ปฐมวัยของ HCl 0.1 M และถูกแทงด้วยของ 500 LL ภายในสารละลายมาตรฐาน 0.45 GC et al, [23] 200 LL ของการแก้ปัญหาของ 3 M HCl ใน 270 LL ของ acetyl คลอไรด์ต่อมิลลิลิตร isobutanol แห้ง; isobutanol 4 °ส่วนผสมที่ถูกความร้อนถึง 120 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและหลังจากที่เขย่าในน้ำวน, ถูกความร้อนต่อการ30 นาที จากนั้น 200 LL ของการแก้ปัญหา 0.2 100 LL ของสารประกอบ heptafluorobutyric 10 นาทีที่ 150 50 LL -20 PerkinElmer Clarus 400 เครื่องดนตรี (PerkinElmer, Massachusetts, สหรัฐอเมริกา) ติดตั้งกับเครื่องตรวจจับเปลวไฟ Ionisation (FID) หัวฉีดเป็นเก็บไว้ที่ 250 องศาเซลเซียสและเครื่องตรวจจับที่ 260 องศาเซลเซียสเป็นไฮโดรเจนเป็นก๊าซใช้ DB-1 (30 ม., 0.25 มมรหัสและความหนา 0.15 LM) คอลัมน์ฝอยผสมซิลิกา (J & W วิทยาศาสตร์) นาทีไว้ที่ 70 องศาเซลเซียสเพิ่มขึ้นถึง 170? C ที่ 2.0 องศาเซลเซียส / นาทีแล้วถึง 250? C (5 นาทีถือ) ที่ 16 องศาเซลเซียส 1 L-norleucine 18 สำหรับ asparagine (Asn) และกรด aspartic (งูเห่า) เช่นเดียวกับการ glutamine (Gln) และกรดกลูตามิก(Glu) ASX และ Glx, ตามลำดับ ขีด จำกัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการย่อยกรดของวัสดุโปรตีนกรดอะมิโนวิเคราะห์

ดัดแปลงมาจากซัมเวิลต์ et al , [ 22 ] หลอดทดสอบที่มี
ฝาเกลียวที่มีการเคลือบ PTFE ได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างจริงจังมิลลิกรัมของวัสดุที่แห้งตัวอย่างแต่ละ 2 มิลลิลิตร

10กรดไฮโดรคลอริก ( HCl ) 6 M ถูกบันทึก ; เนื้อหาของ
หลอดถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวอพยพในช่วง 1 นาที

กับปั๊มสุญญากาศและเติมด้วยไนโตรเจนหลังจากละลายระงับถูก sonicated เป็นเวลานาทีใน
5อาบน้ำอัลตราซาวนด์ที่อุณหภูมิห้องขั้นตอนของการ
แช่แข็งสูญญากาศ sonication ซ้ำเป็นครั้งที่สอง 24 ชั่วโมงที่ 110 องศาเซลเซียสโดยใช้ความร้อน

การย่อยสลายเกิดขึ้นในช่วงกลุ่มหลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง 500 จะของ
มะเดื่อ 1 ลูกแพร์เอส bartolomeu


ลูกแพร์สดและแห้งโดยลูกแพร์เทคโนโลยีที่แตกต่างกันขดั้งเดิมค gh1 , D gh2
e
และหมวก EUR อาหาร RES เทคโนโลยี ( 2011 ) 1 : 637-646 639 123

สารละลายมาตรฐานภายใน ( นอร์ลิวซีน 5.0 มิลลิใน HCl
0.1 M )

ถูกบันทึกและเนื้อหาหลอดถูกระเหยไปความแห้งกร้านภายใต้สุญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงวัตถุอันเป็นผลถูกละลายใน 1 มิลลิลิตร 0.1 M HCl และ
กรอง 045 ไมครอนกรองสำหรับการวิเคราะห์ของอะมิโนอิสระ
กรด 10 มิลลิกรัมของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกระงับใน 2 มิลลิลิตร
การแก้ปัญหาของ 0.1 M HCl และถูกแทงด้วยของ 500 จะระงับถูกทิ้งกวน

ภายในสารละลายมาตรฐานเป็นเวลาหลายชั่วโมงแล้วถูกกรองด้วยตัวกรอง 0.45 ไมครอนการแก้ปัญหาที่มีการปล่อยตัวเป็นกรดอะมิโน



แห้งภายใต้สูญญากาศใช้เครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงอนุพันธ์ของกรดอะมิโนสำหรับการวิเคราะห์ GC เป็นดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายโดย
แม็คเคนซี่ et al [ 23 ] สารตกค้างที่เป็นของแข็งเป็นผล
ละลายใน 200 จะของการแก้ปัญหาของ 3 M HCl the ไอโซบิวทานอล
การแก้ปัญหานี้ถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 270 จะของอะ
คลอไรด์ต่อมิลลิลิตรไอโซบิวทานอลแห้ง ;ไอโซบิวทานอลแห้ง

ไฮไดรด์ที่มีแคลเซียมกลั่นและเก็บไว้กับโมเลกุล sieves 4 °ส่วนผสมที่ถูกความร้อนถึง 120 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและหลังจากที่เขย่าในน้ำวนถูกความร้อนต่อการ

,30 นาทีหลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิโดยรอบส่วนที่เกินจาก

สิ่งที่ทำให้ระเหิดสารระเหยได้รับภายใต้สูญญากาศใช้แรงเหวี่ยงจากนั้น 200 จะของการแก้ปัญหา 0.2 - 1
มิลลิกรัมมิลลิลิตรจะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศในเครื่องระเหยแบบแรงเหวี่ยงบาทจัดทำขึ้นเอทิลอะซิเตถูกบันทึกและตัวทำละลาย

หลังจากนั้น 100 จะของสารประกอบ heptafluorobutyric เป็น 10 นาทีที่ 150 องศาเซลเซียส

เพิ่มและส่วนผสมที่ถูกความร้อนในช่วงจะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศและวัสดุที่ได้รับคือหลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องเกินของตัวทำละลาย

ละลายใน 50 จะของน้ำนมและวิเคราะห์ได้ทันทีหรือแช่แข็งที่อุณหภูมิ - 20 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์

แยกกรดอะมิโนได้สำเร็จโดยโคก๊าซ
การดำเนินการใน Perkinelmer clarus 400
เครื่องดนตรี ( Perkinelmer , Massachusetts , สหรัฐอเมริกา ) ติดตั้ง
กับเครื่องตรวจจับเปลวไฟ ionisation ( FID ) หัวฉีดเป็น
เก็บไว้ที่ 250 องศาเซลเซียสและเครื่องตรวจจับที่ 260 องศาเซลเซียสไฮโดรเจนเป็น
ใช้เป็นก๊าซ db-1 ( 30 แอง , 0.25 มมไอดีและ
0.15 ความหนา LM ) คอลัมน์ฝอยผสมซิลิกา ( J &ถูกนำมาใช้กับโปรแกรมอุณหภูมิต่อไปนี้ :
W
วิทยาศาสตร์ )1 นาทีไว้ที่ 70 องศาเซลเซียสเพิ่มขึ้นถึง 170 ? C ที่ 2.0 องศาเซลเซียส /
นาทีแล้วถึง 250 ? C ( 5 นาทีถือ ) ที่ 16 องศาเซลเซียส 1 นาที


สารที่ถูกระบุโดยครั้งของพวกเขาและการเก็บรักษาโครมาเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่แท้จริงปริมาณก็ขึ้นอยู่กับวิธีการมาตรฐานภายใน
โดยใช้ l-norleucine และเส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกสร้างขึ้นมาเพื่อ
กรดอะมิโน 18 สำหรับ asparagine ( ขึ้น ) และกรด aspartic
( งูเห่า ) เช่นเดียวกับการกลูตามีน ( gln ) และกรดกลูตามิก
( GLU ) วิธีการที่ไม่อนุญาตให้มีความแตกต่าง

ระหว่างเอไมด์และฟังก์ชั่นกรดคาร์บอกซิเป็นเช่นนี้กรดอะมิโนเหล่านั้นถูกวัดกันเป็น ASX และ GLX ตามลำดับนอกจากนี้วิธีการที่ใช้ไม่อนุญาตให้

,การตรวจสอบของเขาขีดจำกัดของปริมาณของการวิเคราะห์

ยอดสัญญาณที่เหลือกรดอะมิโนที่มุ่งมั่นจะเป็นสิบครั้งค่าของ