2.3. Determination of carnosine and

2.3. Determination of carnosine and anserine contents
Amounts of carnosine and anserine were determined according
to the modified method described by Jung et al. (2013). Each
meat sample (2.5 g) was homogenised with 0.01 N HCl (7.5 mL)
at 13,500 rpm for 1 min [T25b; Ika Works (Asia), Sdn. Bhd,
Rawang, Malaysia] and centrifuged at 17,030  g for 15 min at
4 8C (HM-150IV, Hanil Co., Ltd., Incheon, Korea). The supernatant
(250 mL) was mixed with 750 mL of acetonitrile, and after holding
at 4 8C for 20 min, it was centrifuged at 10,000  g for 10 min
(4 8C; Hanil). The resulting supernatant was injected into a highperformance
liquid chromatography (HPLC) column with a
Waters 1525 pump and a Waters 717 plus auto sampler
(Millipore Corporation, Milford, MA, USA). An Atlantis HILIC
silica column (4.6  150 mm, 3 mm, Millipore) was used. To
determine carnosine and anserine contents, a Waters 2487 diode
array detector (Millipore) was used at 214 nm. A standard curve
of each compound was used to calculate the content of the
particular compound in the samples. Carnosine (99.0%) and
anserine (99.0%) standards were obtained from Sigma Co. (St.
Louis, MO, USA).
2.4. Determination of betaine and carnitine contents
Betaine and carnitine contents in raw and cooked meat samples
were determined by the method of Li et al. (2007) with some
modifications. Each meat sample (3 g) was homogenised at
13,500 rpm for 30 s (Ika Works) with 10 mL of acetonitrile–
methanol solution (9:1, v/v) and centrifuged at 2090  g for 5 min
(4 8C; Hanil). The supernatant was filtered into a 20-mL volumetric
flask through a funnel plugged with glass wool. The remaining
filtrate was again mixed with 10 mL of acetonitrile–methanol
solution and centrifuged (Hanil) under the same conditions. The
resulting supernatant was collected in the same volumetric flask,
which was then filled with acetonitrile–methanol solution.
Subsequently, 2 mL of this sample were mixed with 810 mg of
Na2HPO4 and 90 mg of Ag2O (9:1, w/w) in a 15-mL tube by
vigorous shaking and vortexing. Sample tubes were then dried by
shaking without their caps in a shaker for 30 min and centrifuged
again (Hanil) at 2090  g for 5 min at 4 8C. A 0.5-mL aliquot of each
supernatant sample was then mixed with 0.5 mL of derivatising
reagent (1.39 g of bromoacetophenone and 0.066 g of 18-crown-6
in 100 mL of acetonitrile) in a 15-mL tube, vortexed, and heated
(80 8C) for 60 min in a water bath. After cooling under running
water, this mixture was filtered through a 0.2-mm membrane filter
and analysed by HPLC to determine betaine and carnitine contents.
The HPLC system used was the same as that used to determine the
dipeptide contents (Millipore), except that the partitioned fractions
were detected at 254 nm. Mobile phase A was 25 mM
ammonium acetate in which pH was adjusted to 3.0 using formic
acid, and mobile phase B was acetonitrile. The mobile phase was
supplied at 1.4 mL/min for 20 min with isocratic elution (90%
A:10% B). Betaine and carnitine contents were calculated using the
standard curve of each compound. Betaine (99.0%) and Lcarnitine
hydrochloride (98.0%) standards were obtained from
Sigma Co. (St. Louis, MO, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การกำหนด carnosine และเนื้อหา anserineจำนวน carnosine และ anserine ได้กำหนดตามวิธีแก้ไขที่อธิบายโดย Jung et al. (2013) แต่ละตัวอย่างเนื้อ (2.5 g) ที่ homogenised กับ 0.01 N HCl (7.5 mL)ที่รอบต่อนาที 13,500 ใน 1 นาที [T25b Ika งาน (เอเชีย), Sdn. หน่วยราวัง มาเลเซีย] และ centrifuged ที่ g 17,030 สำหรับ 15 นาทีที่4 8C (HM 150IV, Hanil Co., Ltd. อินชอน เกาหลี) Supernatant(250 mL) ถูกผสมกับ 750 มิลลิลิตร acetonitrile และหลัง จากถือที่ 4 8C สำหรับ 20 นาที มันถูก centrifuged ที่ g 10000 สำหรับ 10 นาที(4 8C Hanil) Supernatant ได้ถูกฉีดเข้าไปใน highperformanceคอลัมน์ของเหลว chromatography (HPLC) ด้วยการปั๊มน้ำกลึงและแซมเพลอร์ 717 น้ำบวกโดยอัตโนมัติ(มาก Corporation ลฟอร์ด MA สหรัฐอเมริกา) แอตแลนติการ HILICใช้คอลัมน์ซิลิก้า (4.6 150 มม. 3 มม. มาก) ถึงกำหนด carnosine และ anserine เนื้อหา การไดโอดน้ำ 2487ใช้เครื่องตรวจจับเรย์ (มาก) ที่ 214 nm เส้นโค้งมาตรฐานของสารประกอบแต่ละที่ใช้ในการคำนวณเนื้อหาของสารประกอบเฉพาะในตัวอย่าง Carnosine (99.0%) และanserine (99.0%) มาตรฐานที่ได้รับมาจาก บริษัทซิกมา (เซนต์Louis, MO สหรัฐอเมริกา)2.4 การกำหนดสารบัญ betaine และคาร์นิทีเนื้อหา betaine และคาร์นิทีในตัวอย่างเนื้อดิบ และสุกถูกกำหนด โดยวิธีการของ Li et al. (2007) กับปรับเปลี่ยน ตัวอย่างในแต่ละเนื้อ (3 g) ถูก homogenised ที่รอบต่อนาที 13,500 สำหรับ 30 s (ทำงาน Ika) กับ 10 มิลลิลิตร acetonitrile –เมทานอลโซลูชั่น (9:1, v/v) และ centrifuged ที่ g 2090 ใน 5 นาที(4 8C Hanil) Supernatant ที่ถูกกรองไปเป็น 20-mL volumetricหนาวผ่านปล่องเสียบกับเส้นใยแก้ว เหลือสารกรองมีผสมอีกครั้งกับ 10 mL ของ acetonitrile – เมทานอลโซลูชันและ centrifuged (Hanil) ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ที่supernatant ได้ถูกรวบรวมใน volumetric หนาวเหมือนกันแล้วซึ่งก็เต็มไป ด้วย acetonitrile – เมทานอลโซลูชั่นในเวลาต่อมา 2 มล.ของตัวอย่างนี้ถูกผสมกับมก. 810Na2HPO4 และมก. 90 Ag2O (9:1, w/w) ในหลอด 15 mL ด้วยสั่นคึกคักและ vortexing ท่อชิ้นงานตัวอย่างอบแห้งด้วยงก ๆ ไม่ มีหมวกของพวกเขาในเชคเกอร์ในนาทีที่ 30 และ centrifugedอีกครั้ง (Hanil) ที่ g 2090 ใน 5 นาทีที่ 4 8C. ส่วนลงตัว 0.5 mL ของแต่ละตัวอย่าง supernatant ถูกผสมกับ 0.5 mL ของ derivatising แล้วรีเอเจนต์ (1.39 g bromoacetophenone และ g 0.066 ของ 18-คราวน์-6ใน 100 mL ของ acetonitrile) ในหลอด 15 mL, vortexed และอุ่น(80 8C) สำหรับ 60 นาทีในการอาบน้ำ หลังจากทำความเย็นภายใต้การทำงานน้ำ ส่วนผสมนี้มีกรองผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.2 มม.และ analysed โดย HPLC เพื่อกำหนดเนื้อหา betaine และคาร์นิทีระบบ HPLC ที่ใช้ไม่เหมือนกับที่ใช้ในการกำหนดเนื้อหา dipeptide (มาก), ยกเว้นที่เศษ partitionedพบที่ 254 nm โมบายเฟส A ถูก 25 มม.แอมโมเนีย acetate ซึ่งค่า pH ถูกปรับปรุงเพื่อใช้ formic 3.0กรด และโมบายระยะ B ถูก acetonitrile เฟสเคลื่อนจัดที่ 1.4 mL/min สำหรับ 20 นาทีกับ elution isocratic คิด (90%A:10% B) เนื้อหา betaine และคาร์นิทีถูกคำนวณโดยใช้การเส้นโค้งมาตรฐานของสารประกอบแต่ละ Betaine (99.0%) และ Lcarnitineมาตรฐานไฮโดรคลอไรด์ (98.0%) ได้รับมาจากบริษัทซิกมา (St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ความมุ่งมั่นของ carnosine และเนื้อหา Anserine
จํานวนเงิน carnosine Anserine และได้รับการพิจารณาตาม
วิธีการที่จะแก้ไขการอธิบายโดย Jung และคณะ (2013) แต่ละ
ตัวอย่างเนื้อ (2.5 กรัม) ถูกปั่นกับ 0.01 N HCl (7.5 มิลลิลิตร)
ที่ 13,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาที [T25b; Ika ธิการ (เอเชีย) Sdn Bhd,
Rawang มาเลเซีย] และหมุนเหวี่ยงที่ 17,030? กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่
4 8C (HM-150IV, Hanil Co. , Ltd. , อินชอนประเทศเกาหลี) ใส
(250 มิลลิลิตร) ผสมกับ 750 มิลลิลิตร acetonitrile และหลังจากการถือครอง
ที่ 4 8C 20 นาทีมันก็หมุนเหวี่ยงที่ 10,000? กรัมเป็นเวลา 10 นาที
(4 8C; Hanil) สารละลายที่เกิดถูกฉีดเข้าไปในประสิทธิภาพสูง
ของเหลว chromatography (HPLC) คอลัมน์ที่มี
น้ำ 1,525 เครื่องสูบน้ำและน้ำ 717 บวกตัวอย่างอัตโนมัติ
(คคอร์ปอเรชั่นฟอร์ด, MA, USA) แอตแลนติ HILIC
คอลัมน์ซิลิกา (4.6? 150 มม 3 มม, ค) ถูกนำมาใช้ ในการ
ตรวจสอบ carnosine และเนื้อหา Anserine, น้ำ 2487 ไดโอด
เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ (ค) ถูกนำมาใช้ที่ 214 นาโนเมตร กราฟมาตรฐาน
ของแต่ละสารประกอบที่ใช้ในการคำนวณปริมาณ
สารโดยเฉพาะอย่างยิ่งในตัวอย่าง Carnosine (? 99.0%) และ
Anserine (? 99.0%) มาตรฐานที่ได้รับจากซิกม่า จำกัด (St.
Louis, MO, USA).
2.4 การกำหนดเบทาอีนและเนื้อหา carnitine
Betaine และเนื้อหา carnitine ในตัวอย่างเนื้อดิบและสุก
ถูกกำหนดโดยวิธีการของหลี่และคณะ (2007) กับบางส่วน
ปรับเปลี่ยน ตัวอย่างเนื้อแต่ละ (3 กรัม) ถูกปั่นที่
13,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 วินาที (Ika โยธา) 10 มิลลิลิตร acetonitrile-
แก้ปัญหาเมทานอล (9: 1, v / v) และหมุนเหวี่ยงที่ 2090? กรัมเป็นเวลา 5 นาที
(4 8C; Hanil) ใสถูกกรองเป็นปริมาตร 20 มิลลิลิตร
ขวดผ่านช่องทางเสียบกับใยแก้ว ที่เหลือ
กรองผสมอีกครั้งกับ 10 มิลลิลิตร acetonitrile-เมทานอล
การแก้ปัญหาและหมุนเหวี่ยง (Hanil) ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน
ใสผลที่ถูกรวบรวมไว้ในขวดปริมาตรเดียวกัน
ซึ่งก็เต็มไปแล้วกับการแก้ปัญหา acetonitrile-เมทานอล.
ต่อจากนั้น 2 มิลลิลิตรตัวอย่างนี้ได้รับการผสมกับ 810 มิลลิกรัม
Na2HPO4 และ 90 มิลลิกรัมของ Ag2O (9: 1, W / W) ใน หลอด 15 มิลลิลิตรโดย
เขย่าแข็งแรงและ vortexing หลอดตัวอย่างแห้งแล้วโดย
การสั่นสะเทือนโดยไม่ต้องหมวกของพวกเขาในการปั่นเป็นเวลา 30 นาทีและปั่น
อีกครั้ง (Hanil) ที่ 2,090? กรัมเวลา 5 นาทีที่ 4 8C aliquot 0.5 มิลลิลิตรของแต่ละ
ตัวอย่างใสได้รับการผสมกับ 0.5 มิลลิลิตร derivatising
น้ำยา (1.39 กรัม bromoacetophenone และ 0.066 กรัม 18 มงกุฎ-6
ใน 100 มิลลิลิตร acetonitrile) ในหลอด 15 มิลลิลิตรการ vortex และความร้อน
( 80 8C) เป็นเวลา 60 นาทีในอ่างน้ำ หลังจากที่ระบายความร้อนภายใต้การใช้
น้ำผสมนี้ได้รับการกรองผ่านเยื่อกรอง 0.2 มม
และวิเคราะห์โดยวิธี HPLC เพื่อตรวจสอบเนื้อหาเบทาอีนและคาร์นิที.
ระบบ HPLC ใช้เป็นเช่นเดียวกับที่ใช้ในการกำหนด
เนื้อหา dipeptide (ค) ยกเว้นว่า เศษส่วนแบ่งพาร์ติชัน
ได้รับการตรวจพบที่ 254 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่เป็น 25 มม
อะซิเตตแอมโมเนียมที่มีการปรับค่า pH 3.0 โดยใช้ฟอร์มิ
กรดและ B เฟสเคลื่อนที่เป็น acetonitrile เฟสเคลื่อนที่ถูก
ให้มาที่ 1.4 มิลลิลิตร / นาทีเป็นเวลา 20 นาทีกับการชะ Isocratic (90%
: 10% B) เบทาอีนและเนื้อหา carnitine ถูกคำนวณโดยใช้
กราฟมาตรฐานของแต่ละสารประกอบ เบทาอีน (? 99.0%) และ Lcarnitine
ไฮโดรคลอไร (? 98.0%) มาตรฐานที่ได้รับจาก
ซิกม่า จำกัด (St. Louis, MO, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การกำหนดเนื้อหาและปริมาณของคาร์โนซีนอาการถ่ายปัสสาวะบ่อย

ถูกกำหนดตามอาการถ่ายปัสสาวะบ่อยและไลโพโพลิแซกคาไรด์เพื่อแก้ไขวิธีที่อธิบายโดยจอง et al . ( 2013 )
เนื้อแต่ละตัวอย่าง ( 2.5 กรัม ) คือ homogenised กับ 0.01 N HCl ( 7.5 ml )
, 500 รอบต่อนาทีที่ 1 นาที [ t25b ; อิกะ งาน ( เอเชีย ) Sdn . Bhd ,
Rawang , มาเลเซีย ระดับที่ 17030 ] และ  G สำหรับ 15 นาทีที่
4 8C ( hm-150iv Hanil จำกัด สนามบิน อินชอน ,เกาหลี ) และน่าน
( 250 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 750 มิลลิลิตร ไน และหลังจากถือ
ที่ 4 8C นาน 20 นาที มันเป็นระดับที่ 10 , 000  กรัมต่อ 10 นาที
( 4 th 8C ; ) นำผลถูกฉีดเข้าไปใน highperformance
liquid chromatography ( HPLC ) คอลัมน์ด้วย
น้ำเดือนปั๊มน้ำอัตโนมัติ และถ้าบวกตัวอย่าง
( มิลลิ Corporation , ฟอร์ด , MA , USA ) การ hilic
แอตแลนติสคอลัมน์ซิลิกา ( 4.6  150 มม. 3 มม. มิลลิ ) คือใช้

หาอาการถ่ายปัสสาวะบ่อยและเนื้อหาไลโพโพลิแซกคาไรด์ , น้ำ 2487 ไดโอด
เรย์ตรวจจับ ( มิลลิ ) ถูกใช้ใน 214 นาโนเมตร เป็นมาตรฐานของแต่ละสารประกอบ
โค้งที่ใช้คำนวณปริมาณของ
ผสมเฉพาะในตัวอย่าง คาร์โนซีน (  99.0 % )
อาการถ่ายปัสสาวะบ่อย (  99.0 % ) มาตรฐานที่ได้รับจาก Sigma Co . ( St .
หลุยส์ โม , USA ) .
2.4 .ความมุ่งมั่นของ บี บี คาร์นิทีน คาร์นิทีน
และเนื้อหาและเนื้อหาดิบและสุกเนื้อตัวอย่าง
ถูกหาโดยวิธีของ Li et al . ( 2007 ) กับบาง
การปรับเปลี่ยน เนื้อแต่ละตัวอย่าง ( 3 g )
9 , 000 รอบต่อนาที homogenised ที่ 30 ( Ika ทำงาน ) กับ 10 มิลลิลิตร สารละลายเมทานอล ( 9 : 1 ) ไน
V / V ) และระดับที่ 0  กรัมเป็นเวลา 5 นาที
( 4 th 8C ; )ส่วนนำคือกรองลงในขวดปริมาตร 20 มล. ผ่านกรวยเสียบ
ด้วยใยแก้ว หนักเหลือ
อีกครั้งผสมกับ 10 มิลลิลิตร สารละลายเมทานอล
ไน–ไฟฟ้า ( th ) ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน
ผลสูง เก็บในขวดปริมาตรเดียวกัน
ซึ่งก็เต็มไปด้วยไน–เมทานอล
โดยโซลูชั่น2 ml ของตัวอย่างนี้ผสม 810 mg ของ
na2hpo4 90 มิลลิกรัม ag2o ( 09 : 01 , w / w ) ในหลอด 15 ml โดย
เข้มแข็งสั่นและ vortexing . ตัวอย่างท่อ คือแห้งโดย
สั่นโดยไม่มีหมวกในเครื่องปั่นสำหรับ 30 นาที ไฟฟ้า
อีกครั้ง ( th ) ที่ 0  G สำหรับ 5 นาทีที่ 4 8C . 0.5-ml ส่วนลงตัวของแต่ละ
น่านตัวอย่างจากนั้นผสม 0.5 มิลลิลิตร derivatising
3 ( 139 กรัม และ bromoacetophenone 0.066 กรัม 18-crown-6
100 มิลลิลิตรของไน ) ในหลอด 15 ml vortexed และอุ่น
( 80 8C ) 60 นาทีในการอาบน้ำ หลังจากเย็นภายใต้การวิ่ง
น้ำผสมนี้ถูกกรองผ่านเยื่อกรอง 0.2-mm
และวิเคราะห์โดย HPLC เพื่อกำหนดเนื้อหาและบีคาร์นิทีน .
กรัมระบบที่ใช้เหมือนกับที่ใช้ในการตรวจสอบ
เนื้อหาของไดเปปไทด์ ( มิลลิ ) ยกเว้นการแบ่งเศษส่วน
ถูกตรวจพบ 254 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่เป็น 25 mm
แอมโมเนียมอะซิเตต ซึ่งปรับ pH 3.0 ใช้มิค
กรด และโมบายเฟส B ไน . ระยะเคลื่อนที่
จัดที่ 1.4 มิลลิลิตรต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที ( Isocratic ( 90 %
: 10 % B ) บี คาร์นิทีน เนื้อหาและคำนวณโดยใช้
เส้นโค้งมาตรฐานของแต่ละสารประกอบ บี (  99.0 % ) และแอลคาร์นิทีน
ไฮโดรคลอไรด์ (  98.0 % ) มาตรฐานได้จาก
Sigma Co . ( St . Louis , MO , USA )