3.2. PCR amplificationFor molecular

3.2. PCR amplification
For molecular analysis, the so called barcoding region of the
mitochondrial genome encoding Cytochrome C Oxidase subunit I
was amplified using the ‘‘universal primers’’ LCO1490 and HCO
2198, as described by Folmer et al. [32]. The PCR system was set up
in a reaction volume of 25 ml including 160 mM dNTPs (GE
Healthcare), 10 pmol of each primer (Biospring, Frankfurt), 0.3 mg/
ml BSA (Sigma Aldrich), 1.5 U Taq DNA Polymerase (Sigma Aldrich)
and buffer provided by the manufacturer which included MgCl2
and 1 ml DNA.
For PCR amplification, a T3000 thermal cycler (Biometra) was
used. The parameters for amplification were applied according to
Boehme et al. [34].
The success of each amplification was confirmed by gelelectrophoresis
in a 3% agarose gel, stained with GelRed (Biotium,
Darmstadt) and visualized under UV light.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2 การขยาย PCRสำหรับการวิเคราะห์ระดับโมเลกุล สิ่งที่เรียกว่าซอฟต์แวร์ภูมิภาคของการรหัสย่อย Cytochrome C Oxidase จีโนม mitochondrial ฉันถูกขยายโดยใช้ ''ไพรเมอร์สากล '' LCO1490 และ HCO2198 ตามที่อธิบายไว้โดย Folmer et al. [32] ตั้งระบบ PCRปริมาณปฏิกิริยาของ 25 ml รวม 160 มม. dNTPs (GEการดูแลสุขภาพ), 10 pmol แต่ละพื้น (Biospring แฟรงค์เฟิร์ต), 0.3 มิลลิกรัม /ml บีเอสเอ (ซิก Aldrich), 1.5 U Taq DNA พอลิเมอเรส (Aldrich ซิก)และบัฟเฟอร์ของผู้ผลิตซึ่งรวม MgCl2และ 1 ml ดีเอ็นเอสำหรับขยาย PCR ถูกที่ T3000 ร้อน cycler (Biometra)ใช้ ใช้พารามิเตอร์สำหรับขยายตามBoehme et al. [34]ความสำเร็จของการขยายแต่ละได้รับการยืนยัน โดย gelelectrophoresisในเจ 3% agarose สี ด้วย (Biotium, GelRedตัดท์) และ visualized ภายใต้แสง UV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 ขยาย PCR
สำหรับการวิเคราะห์โมเลกุลภูมิภาคที่เรียกว่าบาร์โค้ดของจีโนมการเข้ารหัส subunit ยล Cytochrome C Oxidase ฉันถูกขยายโดยใช้'' ไพรเมอร์สากล '' LCO1490 และ HCO 2198 ตามที่อธิบาย Folmer et al, [32] ระบบ PCR ได้ถูกจัดตั้งขึ้นในปริมาณการเกิดปฏิกิริยาของ25 มล. รวมถึง 160 มิลลิ dNTPs (GE ดูแลสุขภาพ), 10 pmol ของแต่ละไพรเมอร์ (Biospring แฟรงค์เฟิร์ต) 0.3 มก. / มล. บีเอสเอ (ซิกม่าดิช) 1.5 U ดีเอ็นเอ Taq โพลิเมอร์ (ซิกม่า ดิช) และกันชนให้โดยผู้ผลิตซึ่งรวมถึง MgCl2 และ 1 มิลลิลิตรดีเอ็นเอ. สำหรับการขยาย PCR เป็น T3000 Cycler ร้อน (Biometra) ถูกนำมาใช้ พารามิเตอร์สำหรับการขยายถูกนำไปใช้ตามBoehme et al, [34]. ความสำเร็จของการขยายในแต่ละที่ได้รับการยืนยันจาก gelelectrophoresis ในเจล agarose 3% ย้อมด้วยสี GelRed (Biotium, Darmstadt) และมองเห็นภายใต้แสงยูวี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . (
) การวิเคราะห์โมเลกุลที่เรียกว่า barcoding ภูมิภาคของ
ยลจีโนมการเข้ารหัสอุปกรณ์ข้อมูลออกซึ่งผม
ถูกขยายการใช้ไพรเมอร์ ' ' และ ' 'universal lco1490 HCO
2198 ตามที่อธิบายไว้โดยโฟลเมอร์ et al . [ 32 ] ระบบ PCR ตั้งขึ้น
ในปฏิกิริยา ปริมาณ 25 ml รวม 160 มม. dntps ( GE
Healthcare ) , 10 pmol ของแต่ละสี ( biospring แฟรงค์เฟิร์ต ) , 03 มก. / มล. (
( ซิกม่า Aldrich ) 1.5 วูทัค DNA polymerase ( ซิกม่า Aldrich )
บัฟเฟอร์โดยผู้ผลิตซึ่งรวมถึงชุด

1 มิลลิลิตร และดีเอ็นเอ เพื่อเพิ่มขยาย , t3000 Thermal cycler ( biometra ) คือ
ใช้ . พารามิเตอร์สำหรับการขยายไปตาม
เบิม et al . [ 34 ] .
ความสำเร็จของแต่ละแบบได้รับการยืนยันโดย gelelectrophoresis
ในเจล ( 3 %ย้อมด้วย gelred ( biotium
ดาร์มชตัท , ) และภาพภายใต้แสงยูวี