coagulase-negative strains were identified at the genus level by the
Multiplex PCR method according to the protocols of Morot-Bizot
et al. (2004). DNA of the strains was isolated from single colonies.
The isolation kit applied was based on selective binding and elution
of nucleic acid on a mini column e Genomic Mini (A&A Biotechnology,
Poland), with previous stage of cell wall digestion (Lysostaphin
10 mg/ml) (A&A Biotechnology, Poland). Amplification was
carried out in a MJ Mini thermal cycler (BIO-RAD, Poland). The
research used starters synthesised in the Laboratory of DNA
Sequencing and Oligonucleotide Synthesis (Institute of Biochemistry
and Biophysics of the Polish Academy of Sciences in Warsaw,
Poland) e Table 1. Electrophoretic separation: 100 V e 5 min; 70 V
e 60 min (Cleaver Scientific, UK)was carried out on 1.5% agarose gel
(Promega, Poland) with the addition of ethidium bromide 0.5 mg/
10 ml (MP Biomedicals, Poland). Positive controls included reference
strains: S. aureus ATCC 43300, S. xylosus ATCC 29971,
S. saprophyticus ATCC 49453 and S. epidermidis ATCC 49461. Strains
identified by the PCR method only at the genus level were identified
using API STAPH (Biomerieux, France).
สายพันธุ์ลูกเมียลบถูกระบุในระดับสกุล โดยวิธี multiplex PCR
ตามระบบของ morot bizot
et al . ( 2004 ) ดีเอ็นเอของสายพันธุ์ที่แยกได้จากโคโลนีเดี่ยว แยกชุด
ใช้ ขึ้นอยู่กับการเลือกใช้
กรดนิวคลีอิกในมินิคอลัมน์ E ที่มีขนาดเล็ก ( &เป็นเทคโนโลยีชีวภาพ
โปแลนด์ )กับขั้นตอนก่อนหน้าของผนังเซลล์การย่อยอาหาร ( ไลโซ ตฟิน
10 mg / ml ) ( &เทคโนโลยีชีวภาพ , โปแลนด์ ) ( คือ
ทำใน MJ Mini Thermal cycler ( Bio-rad , โปแลนด์ )
ใช้เริ่มวิจัยสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการ ซึ่งการสังเคราะห์และการจัดลำดับดีเอ็นเอ
( สถาบันฟิสิกส์และชีวเคมี
ของโปแลนด์ Academy of Sciences ในวอร์ซอ
โปแลนด์ ) และตารางที่ 1รูปแบบการแยก : 100 V E 5 นาที 70 V
E 60 นาที ( เครื่องมือทางวิทยาศาสตร์ , UK ) ได้ดำเนินการบน 1.5 % เจล
( promega , โปแลนด์ ) ด้วยการเพิ่มคู่ bromide 0.5 mg /
10 ml ( MP biomedicals , โปแลนด์ ) การควบคุมบวกรวมสายพันธุ์อ้างอิง
: S . aureus ATCC ทาง เอส xylosus ATCC 29971
s , saprophyticus ATCC 49453 และ อาหารและ 49461 . สายพันธุ์
ระบุโดยวิธีพีซีอาร์เฉพาะในระดับสกุล พบการใช้ API 10
( biomerieux , ฝรั่งเศส )
การแปล กรุณารอสักครู่..
