Assays for cellulolytic enzymesCell

Assays for cellulolytic enzymes
Cellulase assay for the selected EDB was performed on modified
nitrogen free agar (Döbereiner et al. 1972) supplemented
with 0.25% (w/v) carboxymethyl cellulose instead of glucose
and 0.5 % (w/v) tryptone (Verma et al. 2001). The bacteria
were spotted on the agar plate and incubated at 30 °C for 48 h,
then soaked with Congo red solution for 1 min and then rinsed
with 1 M NaCl solution (Reinhold-Hurek et al. 1993). The
screening for pectinase production was tested by spotting
bacteria on the same nitrogen free agar that was supplemented
with 0.5 % (w/v) tryptone and 0.5 % (w/v) citrus pectin
instead of glucose. The culture plates were incubated at
30 °C for 48, then soaked with 2 % (w/v) hexadecyltrimethyl
ammonium bromide (CTAB) solution for 30 min, and rinsed
with 1 M NaCl solution to visualize the halo zone around the
bacterial colonies (Mateos et al. 1992). Chitinase assay was
carried out by spotting test of the bacteria onto chitin agar (Hsu
and Lockwood 1975), while colloidal chitin component was
Ann Microbiol (2015) 65:253–266 255
prepared following the protocol described by Chaiharn and
Lumyong (2009). The culture plates were incubated at 30 °C
for 72 h, and the presence of clear zone around inoculated
colonies indicated positive chitinase activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Assays สำหรับเอนไซม์ cellulolyticวิเคราะห์ cellulase สำหรับ EDB เลือกทำตามแก้ไขไนโตรเจนฟรี agar (Döbereiner et al. 1972) เสริมกับเซลลูโลส carboxymethyl 0.25% (w/v) แทนน้ำตาลกลูโคสและ 0.5% (w/v) tryptone (Verma et al. 2001) แบคทีเรียด่างบนแผ่น agar และ incubated ที่ 30 ° C สำหรับ 48 hงแล้ว ด้วยโซลูชันคองโกแดงใน 1 นาทีแล้ว rinsedกับ 1 M NaCl โซลูชัน (ไรน์โฮลด์ Hurek et al. 1993) ที่ตรวจคัดกรองสำหรับ pectinase ผลิตถูกทดสอบ ด้วยการจำแบคทีเรียในเดียวกันไนโตรเจนฟรี agar ที่มีเสริมtryptone 0.5% (w/v) และเพกทินส้ม 0.5% (w/v)แทนน้ำตาลกลูโคส แผ่นวัฒนธรรมถูก incubated ที่30 ° C สำหรับ 48 งแล้ว ด้วย hexadecyltrimethyl 2% (w/v)แก้โบรไมด์ (CTAB) แอมโมเนีย 30 นาที และ rinsedด้วยโซลูชั่นของ NaCl 1 เมตรเห็นภาพโซน halo สถานแบคทีเรียอาณานิคม (Mateos et al. 1992) ถูกทดสอบ Chitinaseดำเนินการ โดยการทดสอบของแบคทีเรียบน chitin agar (ซูจำและโรงแรมแอมเบอคอร์ต 1975), ขณะที่อยู่ในคอมโพเนนต์ colloidal chitinแอน Microbiol (2015) 65:253-266 255เตรียมดังต่อไปนี้กล่าวถึงโพรโทคอลตามมา และLumyong (2009) แผ่นวัฒนธรรมถูก incubated ที่ 30 ° Cสำหรับ 72 h และสถานะของโซนชัดเจนประมาณ inoculatedอาณานิคมระบุกิจกรรม chitinase บวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการตรวจเซลลูโลส
ทดสอบเซลลูเลสสำหรับกีฬาที่เลือกได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับการแก้ไข
ไนโตรเจนฟรีวุ้น (Döbereiner et al. 1972) ตบท้าย
ด้วย 0.25% (w / v) เซลลูโลสคาร์บอกซีแทนของน้ำตาลกลูโคส
และ 0.5% (w / v) tryptone (Verma et al. 2001) เชื้อแบคทีเรียที่
เป็นด่างบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง,
แช่แล้วกับการแก้ปัญหาคองโกสีแดงเป็นเวลา 1 นาทีและล้างแล้ว
1 แก้ปัญหา M โซเดียมคลอไรด์ (โฮลด์-Hurek et al. 1993)
การตรวจคัดกรองสำหรับการผลิตเพคติเนสได้รับการทดสอบด้วยการหา
แบคทีเรียในไนโตรเจนเดียวกันวุ้นฟรีที่ได้รับการเสริม
ด้วย 0.5% (w / v) tryptone และ 0.5% (w / v) เพคตินส้ม
แทนของกลูโคส แผ่นวัฒนธรรมได้รับการบ่มที่
อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 แช่แล้วกับ 2% (w / v) hexadecyltrimethyl
แอมโมเนียมโบรไมด์ (CTAB) สำหรับ 30 นาทีและล้าง
ด้วยแก้ปัญหา M 1 โซเดียมคลอไรด์ที่จะเห็นภาพโซนรัศมีรอบ
แบคทีเรีย ( Mateos et al. 1992) การทดสอบไคติเนสได้รับการ
ดำเนินการโดยการจำการทดสอบของแบคทีเรียบนอาหารเลี้ยงเชื้อไคติน (Hsu
และล็อควู้ด 1975) ในขณะที่องค์ประกอบคอลลอยด์ไคตินเป็น
แอน Microbiol (2015) 65: 253-266 255
ต่อไปนี้เตรียมโปรโตคอลอธิบายโดย Chaiharn และ
Lumyong (2009) แผ่นวัฒนธรรมได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส
เป็นเวลา 72 ชั่วโมงและการปรากฏตัวของวงใสรอบเชื้อ
อาณานิคมระบุกิจกรรมไคติเนสในเชิงบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้สำหรับทดลองใช้เอนไซม์เซลลูเลส
สำหรับกีฬาที่มีการดัดแปลง
ไนโตรเจนวุ้นฟรี ( D ö bereiner et al . 1972 ) เสริม
0.25 % ( w / v ) คาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสแทนกลูโคส
และ 0.5% ( w / v ) ทริพโทน ( verma et al . 2001 ) แบคทีเรีย
ถูกพบบนแผ่นวุ้น และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง แล้วแช่ด้วยสารละลายคองโกแดง

1 นาทีแล้วล้างด้วยสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 1 M ( Reinhold hurek et al . 1993 )
คัดกรองสำหรับการผลิตเอนไซม์เพคติเนสถูกทดสอบโดยเฉพาะ
แบคทีเรียบนเดียวกันที่เติมไนโตรเจนฟรีวุ้น
0.5 % ( w / v ) ทริพโทนและ 0.5% ( w / v ) ส้มส้ม
แทนกลูโคส วัฒนธรรมแผ่นอุณหภูมิ 30 องศา C
48 แล้วแช่ด้วย 2% ( w / v ) hexadecyltrimethyl
แอมโมเนียมโบรไมด์ ( ctab ) โซลูชั่นสำหรับ 30 นาทีและล้างด้วยสารละลายโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้น 1 M
จะเห็นรัศมีโซนรอบ
โคโลนีแบคทีเรีย ( mateos et al . 1992 ) ( ( ถูก
ดำเนินการโดยเฉพาะการทดสอบของแบคทีเรียบนไคทิน ( และซู
ล็อควู้ด 1975 ) ในขณะที่คอลลอยด์ดัลไคตินเป็นองค์ประกอบ
แอน ธนิดา เหรียญทอง B Sc ( 2015 ) 65:253 – 266 255
เตรียมดังต่อไปนี้โปรโตคอลและอธิบายโดย chaiharn
ลำยอง ( 2009 )วัฒนธรรมแผ่นอุณหภูมิ 30 องศา C
นาน 72 ชั่วโมง และการปรากฏตัวของบริเวณใสรอบโคโลนีพบกิจกรรมของเอนไซม์ไคติเนสจาก
บวก