multicellular spheres in vitro 19.

multicellular spheres in vitro 19. These neurospheres have self-renewal ability, can be
cultured over 10 passages, and can be easily maintained and expanded without losing
the expression of neural progenitor markers 18,20
.
Neurospheres have the potential to generate sub-type or region-specific neurons (22).
However, their tendency to clump in culture makes them very difficult to study and to
identify the types of neurons that can be derived after neurosphere transplantation 18,20
.
It is also difficult to precisely monitor the morphology of single neurons from
neurosphere-derived neuronal aggregates. Moreover, generating sub-type-specific or
region-specific functional neurons from h/iPSCs takes more than 6-8 weeks with the
traditional neuronal generation protocols 11,21,22
. Here, we present novel culture
conditions and methods to rapidly and efficiently generate functional human sub-type or
region-specific neurons from neurospheres. This method involves a combination of
supplemented knockout serum replacement medium (SKSRM) with 10% CO2 and a
mechanical procedure termed “AdSTEP,” which involves breaking the neurospheres
into smaller fragments to increase the efficiency of neuronal production. Furthermore,
we injected the fragmented neurospheres into the severe combined immunodeficiency
(SCID) mouse brains to investigate the effect of AdSTEP on neurogenesis in vivo,
which might have significant impacts on neuronal transplantation and regenerative
medicine.
Materials and Methods
Maintenance of the H9 lines and generation of the human induced pluripotent
stem cell (iPSC) line HFS-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สิ่งทรงกลมใน 19 Neurospheres เหล่านี้มีความสามารถในการต่ออายุตนเอง สามารถอ่างทางเดินกว่า 10 และสามารถจะเก็บรักษา และขยายโดยไม่แพ้นิพจน์ของ progenitor ประสาทเครื่องหมาย 18,20.Neurospheres มีศักยภาพในการสร้างชนิดย่อยหรือเฉพาะภูมิภาค neurons (22)อย่างไรก็ตาม แนวโน้มการ clump ในวัฒนธรรมทำให้พวกเขายากที่จะศึกษาและระบุชนิดของ neurons ที่สามารถได้รับมาหลังจากปลูก neurosphere 18,20.ก็ยังยากที่จะตรวจสอบสัณฐานวิทยาของ neurons เดียวจากแม่นยำneurosphere มาเพิ่ม neuronal นอกจากนี้ สร้าง sub-type เฉพาะ หรือเฉพาะภูมิภาค neurons ทำจาก h/iPSCs ใช้เวลามากกว่า 6-8 สัปดาห์กับการรุ่นดั้งเดิม neuronal โพรโทคอล 11,21,22. ที่นี่ ที่เรานำเสนอวัฒนธรรมนวนิยายเงื่อนไขและวิธีการอย่างรวดเร็ว และมีประสิทธิภาพสร้างชนิดย่อยบุคคลที่ทำงาน หรือneurons เฉพาะภูมิภาคจาก neurospheres วิธีการนี้เกี่ยวข้องกับการรวมกันของเสริมกลางแทนซีรั่มน่าพิศวง (SKSRM) 10% CO2 และขั้นตอนเครื่องจักรกลที่เรียกว่า "AdSTEP ซึ่งเกี่ยวข้องกับการทำลาย neurospheresเป็นชิ้น ๆ เล็กเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการผลิต neuronal นอกจากนี้เราฉีด neurospheres อยู่อย่างกระจัดกระจายเป็นเอชไอวี combined รุนแรงสมองเมาส์ (วทคร) เพื่อตรวจผลของ AdSTEP neurogenesis ในสัตว์ทดลองซึ่งอาจมีผลกระทบสำคัญปลูก neuronal และสำหรับยาวัสดุและวิธีการบำรุงรักษาบรรทัด H9 และรุ่น pluripotent เหนี่ยวนำให้มนุษย์เซลล์ต้นกำเนิด (iPSC) บรรทัด HFS-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทรงกลมเซลล์ในหลอดทดลอง 19. neurospheres
เหล่านี้มีความสามารถในการฟื้นฟูตัวเองสามารถเพาะเลี้ยงกว่า10
ทางเดินและสามารถรักษาได้อย่างง่ายดายและขยายโดยไม่สูญเสียการแสดงออกของตัวบ่งชี้รากเหง้าประสาท
18,20.
Neurospheres มีศักยภาพในการสร้างชนิดย่อยหรือ เซลล์ประสาทเฉพาะของภูมิภาค (22).
อย่างไรก็ตามแนวโน้มของการกอในวัฒนธรรมที่ทำให้พวกเขายากมากที่จะศึกษาและระบุชนิดของเซลล์ประสาทที่จะได้รับหลังการปลูก neurosphere 18,20. นอกจากนี้ยังเป็นเรื่องยากที่จะตรวจสอบได้อย่างแม่นยำสัณฐานวิทยาของ เซลล์เดียวจากneurosphere ที่ได้มาจากการรวมตัวของเซลล์ประสาท นอกจากนี้การสร้างชนิดย่อยที่เฉพาะเจาะจงหรือเซลล์เฉพาะของภูมิภาคการทำงานจากเอช / iPSCs ใช้เวลากว่า 6-8 สัปดาห์กับโปรโตคอลรุ่น11,21,22 เส้นประสาทแบบดั้งเดิม นี่เรานำเสนอวัฒนธรรมนวนิยายเงื่อนไขและวิธีการได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพสร้างชนิดย่อยของมนุษย์ทำงานหรือเซลล์เฉพาะของภูมิภาคจากneurospheres วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการรวมกันของกลางซีรั่มที่น่าพิศวงเสริมทดแทน (SKSRM) กับ CO2 10% และขั้นตอนกลเรียกว่า"AdSTEP" ซึ่งเกี่ยวข้องกับการทำลาย neurospheres เป็นเศษเล็กลงเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการผลิตเส้นประสาท นอกจากนี้เราฉีด neurospheres แยกส่วนเข้าไปในโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องรวมกันอย่างรุนแรง (SCID) สมองเมาส์เพื่อตรวจสอบผลกระทบของ AdSTEP ใน neurogenesis ในร่างกายซึ่งอาจมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการปลูกถ่ายเซลล์ประสาทและการปฏิรูปการแพทย์. วัสดุและวิธีการบำรุงรักษาของสาย H9 และการสร้าง มนุษย์ชักนำ pluripotent เซลล์ต้นกำเนิด (IPSC) สาย HFS-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มีทรงกลมในหลอดทดลอง 19 neurospheres เหล่านี้มีความสามารถตนเองต่ออายุสามารถ
เลี้ยงกว่า 10 หัวข้อ และสามารถรักษาได้อย่างง่ายดายและขยายโดยไม่สูญเสีย
การแสดงออกของประสาทให้เป็นเครื่องหมาย 18,20
.
neurospheres มีศักยภาพในการสร้างประเภทย่อย หรือภูมิภาคโดยเฉพาะเซลล์ประสาท ( 22 ) .
แต่แนวโน้มของกอในวัฒนธรรมที่ทำให้พวกเขามากยากที่จะการศึกษาและ

ระบุประเภทของประสาทที่ได้มาหลังจากการปลูกถ่ายนิวโรสเฟียร์ 18,20
.
มันเป็นยังยากที่จะแม่นยำตรวจสอบลักษณะเดียวเซลล์ประสาทจาก
นิวโรสเฟียร์ได้ระหว่างมวลรวม . นอกจากนี้ การสร้างประเภทย่อยที่เฉพาะเจาะจงหรือพื้นที่การทำงานเฉพาะจากเซลล์ประสาท
H / ipscs ใช้เวลามากกว่า 6-8 สัปดาห์ด้วย

11,21,22 โปรโตคอลแบบดั้งเดิมและรุ่น ที่นี่เรานำเสนอนวนิยายสภาพวัฒนธรรม
และวิธีการอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพสร้างการทำงานของมนุษย์ย่อยประเภทหรือ
เฉพาะในภูมิภาคที่เซลล์ประสาทจาก neurospheres . วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการรวมกันของสุดยอดเซรั่มเปลี่ยน
เสริมกลาง ( sksrm ) กับ CO2 10 % และ
ขั้นตอนกลเรียกว่า " adstep " ซึ่งเกี่ยวข้องกับการแบ่ง neurospheres
เป็นชิ้นส่วนขนาดเล็กเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตและ . นอกจากนี้
เราฉีด neurospheres กระจัดกระจายเข้าสู่ความรุนแรง
ภูมิคุ้มกันบกพร่องรวม ( สคิด ) เมาส์ สมอง เพื่อศึกษาผลของ adstep ใน neurogenesis โดย
, ซึ่งอาจส่งผลกระทบอย่างมากต่อการปลูกและฟื้นฟูสุขภาพ


วัสดุและวิธีการยาดูแล h9 เส้นและรุ่นของมนุษย์เกิดพลูริโพเทนท์
สเต็มเซลล์ ( IPSC ) สาย hfs-1