.Micro dilution assayThe minimal in

.Micro dilution assay
The minimal inhibition concentration (MIC) values were determined for the bacteria determined as sensitive to the EO in disc diffusion assay. The inocula of bacteria were prepared from 12 h broth cultures and cultures were adjusted to 0.5 McFarland Standard turbidity. The EO
concentrations were prepared between 500 μl/ml to 7.81 μl/ml and tested in 10 ml sterile test tubes containing tryptic soy broth (TSB). MIC values of

the EO against bacterial strains were determined
based on a micro-well dilution method 15, 16. The
96-well plates were prepared by dispensing into
each well 95 μl of tryptic soy broth and 5 μl of the
inoculum. Then 100 μl from EO at all the prepared concentrations were added into the wells.
Negative control was prepared as the last well
containing 195 μl tryptic soy broth without EO
and 5 μl of the bacteria. The concentrations of
Maxipime (Bristol-Myers Squibb) between 500-
7.81 μl were prepared in TSB and used as positive control. The plate was mixed on plate shaker
at 300 rpm for 20 s, and incubated at 27°C for 24
h. Bacterial growth was determined by absorbance at 600 nm using the EL×800 universal
microplate reader. The EO was tested against all
the bacteria for three times. The MIC was defined as the lowest concentration of the compounds to inhibit the growth of microorganisms 12,17

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. ทดสอบไมโครเจือจางค่าความเข้มข้น (MIC) การยับยั้งที่น้อยที่สุดถูกกำหนดสำหรับกำหนดเป็น EO ในดิสก์แพร่ทดสอบความไวต่อเชื้อแบคทีเรีย Inocula ของแบคทีเรียถูกเตรียมจาก 12 ชม.ซุปวัฒนธรรม และวัฒนธรรมถูกปรับ 0.5 McFarland มาตรฐานความขุ่น ของ EO ความเข้มข้นเตรียมไว้ระหว่าง 500 μl/ml ถึง 7.81 μl/ml และทดสอบในหลอดทดลองเป็นหมัน 10 มล.ที่ประกอบด้วยน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ค่า MIC ของEO กับแบคทีเรียสายพันธุ์กำหนดคะแนนเฉลียจากวิธีเจือจางเช่นไมโคร 15, 16 การแผ่น 96 หลุมณที่จ่ายในμl ละ 95 ดีน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic และ 5 μl ของการinoculum แล้ว μl 100 จาก EO ที่ความเข้มข้นที่เตรียมไว้ลงหลุมเพิ่มควบคุมค่าลบถูกเตรียมความพร้อมเป็นครั้งล่าสุดที่ประกอบด้วยน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic μl 195 โดย EOและ 5 μl ของเชื้อแบคทีเรีย ความเข้มข้นของMaxipime (บริสตอลไมเยอร์ Squibb) ระหว่าง 500-7.81 μl ใน TSB และใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวก แผ่นถูกผสมในจานปั่นที่ 300 rpm สำหรับ 20 s และรับการกกที่ 27° C 24h. แบคทีเรียถูกกำหนด โดยค่าที่ 600 nm ใช้ EL × 800 สากลอ่าน microplate EO ที่ทดสอบกับทุกแบคทีเรียสำหรับสามครั้ง ไมโครโฟนถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสารยับยั้งการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ 12,17

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบการเจือจาง .Micro
ความเข้มข้นค่า (MIC) ยับยั้งน้อยที่สุดได้รับการพิจารณาสำหรับแบคทีเรียที่กำหนดเป็นความไวต่อ EO ในแผ่นดิสก์แพร่ทดสอบ inocula ของเชื้อแบคทีเรียที่เตรียมจาก 12 ชั่วโมงน้ำซุปวัฒนธรรมและวัฒนธรรมมีการปรับ 0.5 McFarland มาตรฐานความขุ่น EO
ความเข้มข้นได้จัดทำขึ้นระหว่าง 500 ไมโครลิตร / ml เพื่อ 7.81 ไมโครลิตร / ml และทดสอบใน 10 มล. หลอดทดสอบผ่านการฆ่าเชื้อที่มีน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ค่า MIC ของ

EO กับสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียได้รับการพิจารณา
อยู่บนพื้นฐานของไมโครดีวิธีเจือจาง 15, 16
แผ่น 96 หลุมที่ถูกจัดทำขึ้นโดยจ่ายเข้าไปใน
แต่ละดี 95 ไมโครลิตรของน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic และ 5 ไมโครลิตรของ
เชื้อ แล้ว 100 ไมโครลิตรจาก EO ที่ทุกระดับความเข้มข้นที่เตรียมไว้ถูกเพิ่มเข้าไปในหลุม.
ควบคุมเชิงลบถูกจัดทำขึ้นเป็นครั้งสุดท้ายกัน
ที่มี 195 ไมโครลิตร tryptic น้ำซุปถั่วเหลืองโดยไม่ต้อง EO
และ 5 ไมโครลิตรของเชื้อแบคทีเรีย ความเข้มข้นของ
Maxipime (Bristol-Myers Squibb) ระหว่าง 500
7.81 ไมโครลิตรได้จัดทำขึ้น TSB และใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก จานผสมบนจานเครื่องปั่น
ที่ 300 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 วินาทีและบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24
ชั่วโมง เจริญเติบโตของแบคทีเรียถูกกำหนดโดยการดูดกลืนแสงที่ 600 นาโนเมตรโดยใช้ EL 800 ×สากล
อ่าน microplate กับโรงงานอีโอได้รับการทดสอบกับทุก
แบคทีเรียสำหรับสามครั้ง ไมค์ได้รับการกำหนดให้เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสารยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อจุลินทรีย์ 12,17

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้ไมโคร .ความเข้มข้นสารน้อยที่สุด ( MIC ) ค่ากำหนดสำหรับแบคทีเรียกำหนดความสําคัญกับ EO ในการทดสอบการแพร่กระจายแผ่น . การ inocula แบคทีเรียที่เตรียมจาก 12 ชั่วโมง น้ำซุปวัฒนธรรมและวัฒนธรรมและระยะ 0.5 แมคฟาร์แลนด์มาตรฐานความขุ่น ส่วน โอเตรียมμความเข้มข้นระหว่าง 500 L / ml ถึง 7.81 μ L / ml และทดสอบในหลอดทดลอง 10 ml ปลอดเชื้อที่มีน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ) ค่า MIC ของการต่อต้านแบคทีเรียพบว่าสายพันธุ์ โอตามด้วยวิธีไมโคร ( 15 , 16 ที่96 แผ่น เตรียม จ่ายยา เป็นดีแต่ละคนก็μ 95 ลิตรซุปถั่วเหลืองอาหาร และ 5 μ l ของ3 . แล้ว 100 μ L จาก EO ที่เตรียมไว้ทั้งหมดเท่ากับเพิ่มลงในหลุมควบคุมลบ เตรียมเป็นครั้งสุดท้ายแล้วมี 195 μ l อาหารถั่วเหลืองซุปโดยไม่ต้องออและ 5 μ L ของแบคทีเรีย ความเข้มข้นของmaxipime ( บริสตอลไมเยอร์สควิ๊บ ) ระหว่าง 500 -7.81 μผมเตรียมใน TSB และใช้เป็นตัวควบคุมบวก จานจานปั่นผสมที่ 300 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 วินาที และบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศา C เป็นเวลา 24การเติบโตของแบคทีเรีย H . โดยการวัดการดูดกลืนแสงที่ 600 nm ใช้เอล× 800 สากลอ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย . โดย EO ถูกทดสอบกับทั้งหมดแบคทีเรียสำหรับสามครั้ง ไมค์ถูกกำหนดเป็นค่าความเข้มข้นของสารประกอบที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ 12,17