2.1. DNA extraction from FAdV-4 and

2.1. DNA extraction from FAdV-4 and polymerase chain reaction
(PCR) of the hexon gene
FAdV-4 was adapted in chicken embryo liver (CEL) culture and
purified virus was used for DNA extraction using DNA isolation kit
(Bangalore Genie, India; Cat No. 107822) following manufacturer’s
instructions. PCR amplification of partial hexon gene of FAdV-4
was done using the primers designed for an immunodominant
coding sequence of hexon gene (737 bp) spanning 1792–2485 bp
from the total hexon gene sequence (2916 bp; Gene Bank Accession
No.AJ554049)using DNAstar software (Laser gene), restriction
endonuclease sites (Pst1 and BamH1) were incorporated for directional
cloning. The primer sequences were as follows: F: 5 AAA CCT
GGA TCCCGACGG CGCCAACATCATCTA3
;R: 5 GATAAC TGC AGG
AGT TGT TGC GAA CGG CTT CCT 3
. PCR amplification was carried
outin a thermocycler (AB System, USA) with an initial denaturation
at 94 ◦C for 5 min followed by 30 cycles of denaturation at 94 ◦C for
1 min; annealing at 57 ◦C for 1 min and extension at 72 ◦C for 2 min
with a final extension of 72 ◦C for 10 min.
2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1. สกัดดีเอ็นเอจากปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสและ FAdV-4(PCR) ของยีน hexonFAdV-4 ถูกดัดแปลงในไก่ตับอ่อน (CEL) วัฒนธรรม และไวรัสบริสุทธิ์ใช้สำหรับสกัดดีเอ็นเอโดยใช้ดีเอ็นเอแยกชุด(Genie บังกาลอร์ อินเดีย แมวเลข 107822) ต่อไปนี้ของผู้ผลิตคำแนะนำ กระบือของยีน hexon บางส่วนของ FAdV-4เสร็จสิ้นโดยใช้ไพรเมอร์ที่ออกแบบมาสำหรับการ immunodominantเขียนโปรแกรมลำดับของยีน hexon (737 bp) ทอด bp 1792 – 2485จากลำดับยีนรวม hexon (2916 bp ธนาคารยีนภาคยานุวัติซอฟต์แวร์ DNAstar No.AJ554049)using (ยีนเลเซอร์) ข้อจำกัดเว็บไซต์ endonuclease (Pst1 และ BamH1) ถูกรวมสำหรับทิศทางโคลน ลำดับรองพื้นมีดังนี้: CCT AAA 5 f:GGA TCCCGACGG CGCCAACATCATCTA3; R: 5 GATAAC สถาน AGGAGT TGT สถานไหว้ CGG CTT CCT 3. กระบือได้ดำเนินoutin thermocycler (ระบบ AB สหรัฐอเมริกา) กับแปรสภาพเป็นต้นที่ ◦C 94 5 นาทีตาม ด้วย 30 รอบของการแปรสภาพที่ 94 ◦C สำหรับ1 นาที หลอมที่ 57 ◦C สำหรับส่วนขยายที่ 72 ◦C 2 นาทีและ 1 นาทีด้วยการขยายขั้นสุดท้ายของ ◦C 72 10 นาที2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สกัดดีเอ็นเอจาก FAdV-4 และวิธี Polymerase chain reaction
(PCR) ของยีน hexon
FAdV-4 ถูกนำมาดัดแปลงในตับไก่ตัวอ่อน (CEL) วัฒนธรรมและ
ไวรัสบริสุทธิ์ที่ใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอโดยใช้ชุดดีเอ็นเอแยก
(บังกาลอร์ Genie, อินเดียแมวไม่มี . 107822) ดังต่อไปนี้ผู้ผลิต
คำแนะนำ ขยาย PCR ของยีน hexon บางส่วนของ FAdV-4
ที่ได้กระทำโดยใช้ไพรเมอร์ได้รับการออกแบบสำหรับ immunodominant
ลำดับการเข้ารหัสของยีน hexon (737 bp) ทอด 1792-2485 bp
จากลำดับรวม hexon ยีน (2916 bp; ยีนธนาคารภาคยานุวัติ
No.AJ554049) โดยใช้ซอฟต์แวร์ DNAstar (LASER ยีน) จำกัด
เว็บไซต์ endonuclease (Pst1 และ BamH1) ถูกรวมสำหรับทิศทาง
การโคลน ลำดับไพรเมอร์มีดังนี้: F: 5 AAA CCT
GGA TCCCGACGG CGCCAACATCATCTA3
; R: 5 GATAAC TGC AGG
AGT TGT TGC GAA CGG CTT CCT 3
ขยาย PCR ได้ดำเนินการ.
Outin thermocycler (AB ระบบ, สหรัฐอเมริกา) กับ denaturation เริ่มต้น
ที่ 94 ◦Cเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 30 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94 ◦Cสำหรับ
1 นาที; หลอมที่ 57 ◦Cเป็นเวลา 1 นาทีและการขยายที่ 72 ◦Cเป็นเวลา 2 นาที
ที่มีนามสกุลสุดท้ายของ 72 ◦Cเป็นเวลา 10 นาที.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . การสกัดดีเอ็นเอจาก fadv-4 และการปฏิกิริยาลูกโซ่( PCR ) ของ Hexon ยีนfadv-4 ถูกดัดแปลงในตับตัวอ่อนไก่ ( เซล ) วัฒนธรรมเชื้อไวรัสบริสุทธิ์ใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอโดยใช้ชุดแยกดีเอ็นเอ( บังกาลอร์จีนี่ อินเดีย แมวไม่ 107822 ) ต่อไปนี้ของผู้ผลิตคําแนะนํา เทคนิคเพิ่มปริมาณยีน Hexon บางส่วนของ fadv-4โดยใช้ไพรเมอร์ที่ออกแบบมาสำหรับ immunodominantลำดับของยีน Hexon นะครับ ( 737 BP ) สแป 1792 –พ.ศ. 2485 BPจากทั้งหมด Hexon ยีน ลำดับ ( 2916 BP ; ธนาคารยีนสูno.aj554049 ) โดยใช้ซอฟต์แวร์ dnastar ( ยีนเลเซอร์ ) , ข้อ จำกัดเว็บไซต์ ( pst1 เอนโดนิวคลีเอส และ bamh1 ) ถูกจัดตั้งขึ้นสำหรับทิศทางการโคลน . ไพรเมอร์ ลำดับได้ดังนี้ f : 5 ซีซี AAAtcccgacgg cgccaacatcatcta3 ก๊ะ; R : 5 agg TGC gataacagt TGT TGC GAA CGG ซีทีทีซีซี 3. ( การ )เป็นแบบเทอร์โมไซเคล ์ ( ระบบอเมริกา ( AB ) กับการเริ่มต้นที่◦ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 30 รอบ ( ที่ 94 ◦ C สำหรับ1 นาที ; การอบอ่อนที่ 57 ◦ C เป็นเวลา 1 นาทีและส่วนขยายที่ 72 ◦ C เป็นเวลา 2 นาทีกับงานสุดท้ายของ 72 ◦ C นาน 10 นาที2 .