On the contrary, when it is intende

On the contrary, when it is intended to cause necrosis in a central portion of a cell, like
in a cancer cell (Franziska Hirschhaeuser et al., "Multicellular tumor ลูกกลม: An
underestimated tool is catching up again", Journal of Biotechnology 148 (2010) 3-15, Fig. 1), the
equivalent diameter R is ที่ควรใช้คือ equal to or more than 400 pm and less than 2 mm. This is 15 because, as mentioned above, nutrients can be transferred to a central portion of a spheroid with
a size of 300 pm, so that necrosis does not occur. Accordingly, in order to obtain a spheroid
having a diameter of 300 pm or more, it is necessary that the equivalent diameter be equal to or
more than 400 pm.
In addition, the depth D from the bottom of the ส่วนล่าง to the end of each of the 20 โพรง is set in a range from 0.6 or more times to 3 or less times the equivalent diameter R.
The depth D is ที่ควรใช้คือ in a range from 0.7 or more times to 1.2 or less times the equivalent
diameter R, and ที่ควรใช้กว่าคือ, in a range from 0.8 to 1 times the equivalent diameter R.
[0020]
In each ตู้เพาะเลี้ยง 1, the area between two adjacent โพรง 10 is ที่ควรใช้คือ flat. 25 For example, the distance between two โพรง 10 is ที่ควรใช้คือ in a range from 5 pm to 50 ,um.
This is because it is preferable to increase the number of ลูกกลม per unit area and culture the
ลูกกลม at a high density so that a large number of ลูกกลม can be efficiently obtained. To
achieve this, the area of the upper surface of the wall on which no spheroid is formed is
ที่ควรใช้คือ small as much as possible. In this case, however, when the taper angle is small and 30 the wall is thin, cracking may easily occur due to a vibration during cell seeding or การแทนที่
of a อาหารเลี้ยง. Accordingly, the distance between two โพรง is ที่ควรใช้คือ 5 pm or more. In
view of this, the distance between two โพรง is ที่ควรใช้คือ in a range from 5 to 20 pm.
On the other hand, the two adjacent โพรง 10 may come into contact with each other. For example, a part of an end of one of the two โพรง 10 and a part of an end of the other one





10
of the two โพรง 10 may come into contact with each other, so that the inclined surfaces of the ส่วนช่องเปิดs 12, each of which forms a taper angle, may come into contact with each other to form a chevron shape.
[0021]
5 The ตู้เพาะเลี้ยง 1 having the above-described shape is ที่ควรใช้คือ produced in the
following manner.
Each ตู้เพาะเลี้ยง 1 is ที่ควรใช้คือ a resin molding formed of one or a combination of
two or more selected from the group consisting of acrylic resin, โพลีแลคติก acid, โพลีไกลโคลิก acid,
styrene resin, acrylic styrene copolymer resin, polycarbonate resin, polyester resin, polyvinyl
10 alcohol resin, ethylene vinyl alcohol copolymer resin, thermoplastic elastomer, vinyl chloride
resin, and silicon resin.
[0022]
A functional group is ที่ควรใช้คือ formed on the โพรง 10 of the ตู้เพาะเลี้ยง 1 by
a surface modification treatment method of any one of plasma treatment, glass coating, corona 15 discharge, and UV ozonation, or a combination thereof and the treatment is ที่ควรใช้คือ performed
so that the water contact angle becomes 45 degrees or less.
In addition, a hydrophilic polymer chain that inhibits cell adhesion is ที่ควรใช้คือ
immobilized in the โพรง 10. ที่ควรใช้กว่าคือ, the hydrophilic polymer chain is immobilized in the โพรง 10 that are treated so that the above-mentioned water contact angle becomes 45
20 degrees or less.
Furthei nore, a phospholipid or a phospholipid-polymer complex is ที่ควรใช้คือ
immobilized in the โพรง 10. ที่ควรใช้กว่าคือ, this immobilization treatment is performed on
each recess 10 that is treated so that the above-mentioned water contact angle becomes 45
degrees or less, each recess 10 in which a hydrophilic polymer chain is immobilized, or a
25 combination of these โพรง 10.
[0023]
Moreover, each of the โพรง 10 ที่ควรใช้คือ has a cell non-adhesive surface on which
at least one polymer of a hydrophilic polymer chain that inhibits cell adhesion, and a
phospholipid, or a phospholipid-polymer complex is immobilized after a functional group is 30 formed in the โพรง by a surface modification treatment method of any one of plasma
treatment, glass coating, corona discharge, and UV ozonation, or a combination thereof and the
treatment is performed so that the water contact angle becomes 45 degrees or less. More
ที่ควรใช้คือ, this treatment is carried out together with one or a combination of the above-
mentioned treatments.





11
The above-mentioned hydrophilic polymer chain is ที่ควรใช้คือ poly(ไฮดรอกซีเอธิล เมธาคริเลต). ที่ควรใช้กว่าคือ, the average molecular weight of poly(ไฮดรอกซีเอธิล
เมธาคริเลต) is 100,000 or more.
[0024]
5
Next, a method of culturing cells using the ตู้เพาะเลี้ยงs 1 shown in Figs. 1 to 3 will be described.
The cell culture is performed by the following steps:
a) adding a อาหารเลี้ยง in which cells are dispersed to the ตู้เพาะเลี้ยงs 1;
10 b) culturing the cells;
c) การแทนที่ the อาหารเลี้ยง;
d) allowing ลูกกลม to grow;
e) suspending the ลูกกลม in the อาหารเลี้ยง; and
f) recovering the cells.
15 The above-mentioned steps can be classified into two steps, i.e., the step of culturing
cells (cell culture step) and the step of recovering cells (cell harvesting step). The cell culture step includes the steps a) to d), and the cell harvesting step includes the steps e) and f).
The term "spheroid" used herein refers to a three-dimensional cell cluster including a number of aggregated cells.
20 [0025]
Each of the steps will be described below.
a) Step of adding a อาหารเลี้ยง in which cells are dispersed to the ตู้เพาะเลี้ยงs 1
This step is a step of preparing for culture of cells. In this step, the total number of cells as described below are dispersed in a อาหารเลี้ยง and are added to each ตู้เพาะเลี้ยง 1.
25 A lower limit of the total number of cells is equal to or greater than the number (n) of
โพรง 10 present in the ตู้เพาะเลี้ยง 1.
An upper limit of the total number of cells is equal to or less than a number obtained by
multiplying the number (n) of โพรง by a value obtained by dividing the volume (V) of each of
the โพรง 10 of the ตู้เพาะเลี้ยง 1 by the volume (v) of cells to be seeded. The upper limit 30 of the total number of cells can be represented by the following formula using symbols: V/vxn.
This is based on the premise that the volumes (V) of the จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of โพรง 10 are the same. If
the volumes (V) of the จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of โพรง 10 are different, an average value is used.
The อาหารเลี้ยง is adjusted depending on the cells to be cultured.
[0026]





12
b) Step of culturing cells
The cells are cultured for 12 hours or more in each ตู้เพาะเลี้ยง 1 to thereby allow the cells to form a spheroid. When the อาหารเลี้ยง is added to each ตู้เพาะเลี้ยง 1, the cells dispersed in the อาหารเลี้ยง are loaded into the โพรง 10 and the cells are cultured in the
5 respective โพรง 10. It is preferable to load one cell into each recess 10, and it is preferable to
form one spheroid in the ที่ว่าง formed by the ส่วนล่าง 11. In each recess 10, a cell
proliferates at the ส่วนล่าง 11 of the recess 10. If at least one cell is not present in each
recess during culture and seeding, no spheroid is formed in the recess 10, because any cell does
not move from the adjacent recess 10 to the said recess 10 during culture. In order to culture 10 ลูกกลม at a high density, it is preferable to form a spheroid in each recess 10. Accordingly, it
is preferable to form at least one cell in each recess 10. In terms of the production efficiency, it
is preferable to reduce the initial number of cells as much as possible and to recover as many
ลูกกลม as possible, and therefore it is preferable that the number of cells present in each recess
10 be small as much as possible. For this reason, it is preferable that one cell be present in each
15 recess 10.
c) Step of การแทนที่ the อาหารเลี้ยง
During การแทนที่ of the อาหารเลี้ยง, 20% or more of the อาหารเลี้ยง in each culture
chamber 1 is sucked, and then the same amount of fresh อาหารเลี้ยง is injected into the culture
chamber. It is preferable to replace the อาหารเลี้ยง at least once during cell culture.
20 d) Step of allowing ลูกกลม to grow
The above-described steps a) to c) are performed a จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of times to thereby allow
ลูกกลม to grow. In the case of differentiating and inducing ลูกกลม, it is preferable that each
spheroid be allowed to grow to a size limited by the ที่ว่าง formed by the ส่วนล่าง 11 of
each recess 10 and then the อาหารเลี้ยง be replaced with differentiation induction อาหารเลี้ยง to
25 thereby differentiate each spheroid. In addition, it is more preferable that 60% or more of the
total number of ลูกกลม formed in the ตู้เพาะเลี้ยงs 1 have a diameter in a range of ±5% of
an average spheroid diameter.
[0027]
e) Step of suspending the ลูกกลม in the อาหารเลี้ยง
30

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดอก เมื่อมีวัตถุประสงค์เพื่อทำให้เกิดการตายเฉพาะส่วนในส่วนกลางของเซลล์ ชอบ ในเซลล์มะเร็ง (Franziska Hirschhaeuser et al., "เนื้องอกในสิ่งลูกกลม: การ underestimated มือจะจับขึ้นอีกครั้ง" Fig. สมุดเทคโนโลยีชีวภาพ 148 (2010) 3-15, 1), การ เส้นผ่าศูนย์กลางเท่ากับ R จะเท่ากับที่ควรใช้คือหรือมากกว่า 400 น. และน้อยกว่า 2 มม. คือ 15 ดังกล่าวข้างต้น สารอาหารสามารถโอนย้ายไปส่วนกลางของทรงคล้ายทรงกลมด้วย ขนาด 300 น. ดังนั้นเกิดการตายเฉพาะส่วนที่ไม่ ตามลำดับ เพื่อให้ได้เป็นทรงคล้ายทรงกลม มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 300 น. หรือเพิ่มเติม จำเป็นที่จะมีเส้นผ่าศูนย์กลางเท่ากับเท่ากับ หรือ มากกว่า 400 pmนอกจากนี้ เป็นตั้งความลึก D จากด้านล่างของส่วนล่างสิ้นสุดของแต่ละ 20 โพรงในช่วง จาก 0.6 หรือครั้ง 3 หรือน้อยเวลาขนาดเทียบเท่าอาร์ ความลึก D เป็นที่ควรใช้คือในช่วง จาก 0.7 หรือครั้ง 1.2 หรือน้อยเวลาเทียบเท่า เส้นผ่าศูนย์กลาง R และที่ควรใช้กว่าคือ ในช่วงจาก 0.8 1 ครั้งจะเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลางอาร์ [0020]ในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1 พื้นที่ระหว่างสองอยู่ติดกับโพรง 10 จะแบนที่ควรใช้คือ 25 ตัว ระยะห่างระหว่างสองโพรง 10 ได้ที่ควรใช้คือในช่วงตั้งแต่เวลา 5 โมง 50 อึม ทั้งนี้เนื่องจากมันใช้การเพิ่มหมายเลขลูกกลมต่อหน่วยพื้นที่และวัฒนธรรม ลูกกลมที่ความหนาแน่นสูงเพื่อให้ลูกกลมเป็นจำนวนมากได้อย่างมีประสิทธิภาพได้นั้น ถึง บรรลุนี้ เป็นพื้นที่ของพื้นผิวด้านบนของผนังซึ่งรูปทรงคล้ายทรงกลมไม่ ที่ควรใช้คือขนาดเล็กมากที่สุด ในกรณีนี้ อย่างไรก็ตาม เมื่อมุมเรียวเล็ก และ 30 ผนังคือบาง ถอดรหัสอาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากแรงสั่นสะเทือนระหว่างการปลูกเซลล์หรือการแทนที่ ของอาหารเลี้ยง ตาม ระยะห่างระหว่างสองโพรงเป็นที่ควรใช้คือ 17.00 น. หรือมากกว่านั้น ใน มุมมองนี้ ระยะห่างระหว่างสองโพรงเป็นที่ควรใช้คือในช่วงตั้งแต่ 5 ถึง 20 pmบนมืออื่น ๆ โพรงติดสอง 10 อาจมาไปยังฝั่งกัน ตัวอย่าง เป็นส่วนหนึ่งของการสิ้นสุดของโพรงสอง 10 อย่างใดอย่างหนึ่งและเป็นส่วนหนึ่งของการสิ้นสุดของอีกเครื่องหนึ่ง 10ของโพรงสอง 10 อาจมาพร้อมกัน ไปยังฝั่งเพื่อให้พื้นผิวกินของ ส่วนช่องเปิดs 12 แต่ละรูปแบบเป็นมุมเรียว อาจมาไปยังฝั่งเพื่อรูปร่างเชฟรอน[0021]5 ตู้เพาะเลี้ยง 1 ที่มีรูปร่างที่อธิบายข้างต้นเป็นที่ควรใช้คือที่ผลิตในการลักษณะต่อไปนี้แต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1 เป็นที่ควรใช้คือรูปปั้นเรซิ่นของหนึ่งหรือหลาย น้อยสองเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยเรซิ่นอะครีลิค กรดโพลีแลคติก กรดโพลีไกลโคลิก ยางสไตรีนอ สไตรีนอคริลิโคพอลิเมอร์เรซิน โพลีคาร์บอเนตเรซิน เร ซิ่นโพลีเอสเตอร์ โพลีไวนิล 10 แอลกอฮอล์เรซิน เอทิลีนไวนิลแอลกอฮอล์โคพอลิเมอร์เรซิ่น จักรยานยนต์เทอร์โมพลาสติก ไวนิลคลอไรด์ เรซิน และยางซิลิคอน[0022]กลุ่ม functional คือ เกิดขึ้นในโพรง 10 ของตู้เพาะเลี้ยง 1 โดยที่ควรใช้คือ วิธีรักษาแก้ไขพื้นผิวของหนึ่งรักษาจอพลาสม่า เคลือบแก้ว 15 ปรากฏการณ์ UV กัมมันต์ หรือชุดดังกล่าว และการรักษาจะทำที่ควรใช้คือ เพื่อ ให้น้ำติดต่อมุมเป็น 45 องศา หรือน้อยกว่านั้นนอกจากนี้ โซ่พอลิเมอร์ hydrophilic ที่ยับยั้งเซลล์ยึดเกาะคือ ที่ควรใช้คือตรึงในโพรง 10 ที่ควรใช้กว่าคือ โซ่พอลิเมอร์ hydrophilic คือเอนไซม์ในโพรง 10 ถือว่าเพื่อให้มุมติดต่อน้ำดังกล่าวกลายเป็น 4520 องศา หรือน้อยกว่านั้นFurthei nore ฟอสโฟลิพิดเป็น หรือซับซ้อนพอลิเมอร์ฟอสโฟลิพิดเป็นที่ควรใช้คือตรึงในโพรง 10 ที่ควรใช้กว่าคือ รักษาตรึงโปนี้ดำเนินการใน แต่ละย่อมุม 10 ที่ถือว่าให้น้ำดังกล่าวติดต่อมุม เป็น 45 องศา หรือน้อยกว่า แต่ละย่อมุมซึ่งห่วงโซ่พอลิเมอร์ hydrophilic ถูกตรึง 10 หรือ โพรงเหล่านี้ 10 รวม 25[0023]นอกจากนี้ ที่ควรใช้คือโพรง 10 มีพื้นผิวไม่ใช่กาวเซลล์ที่ พอลิเมอร์น้อยของโซ่พอลิเมอร์ hydrophilic ที่ยับยั้งเซลล์ยึดเกาะ และ ฟอสโฟลิพิด หรือซับซ้อนพอลิเมอร์ฟอสโฟลิพิดจะหาหลังจากกลุ่ม functional 30 เกิดขึ้นในโพรงที่ โดยวิธีรักษาแก้ไขพื้นผิวของหนึ่งของพลาสม่า รักษา เคลือบแก้ว ปรากฏการณ์ และ UV กัมมันต์ หรือชุดดังกล่าวและ ทำการรักษาเพื่อ ให้น้ำติดต่อมุมเป็น 45 องศา หรือน้อยกว่า เพิ่มเติม ที่ควรใช้คือ รักษานี้จะดำเนินการกับหนึ่งหรือชุดของการข้างต้น- กล่าวถึงการรักษา 11โซ่พอลิเมอร์ hydrophilic ดังกล่าวคือ ที่ควรใช้คือ poly(ไฮดรอกซีเอธิล เมธาคริเลต) ที่ควรใช้กว่าคือ น้ำหนักโมเลกุลเฉลี่ยของโพลี (ไฮดรอกซีเอธิล เมธาคริเลต) เป็น 100000 ขึ้นไป[0024]5 <วิธีเพาะเลี้ยง >วิธีการ culturing เซลล์โดยใช้ ตู้เพาะเลี้ยงs 1 แสดงใน Figs. 1 ถึง 3 จะกล่าวเพาะเลี้ยงเซลล์จะดำเนินการตามขั้นตอนต่อไปนี้:ก) เพิ่มอาหารเลี้ยงที่ซึ่งเซลล์ที่ออกไป ตู้เพาะเลี้ยงs 110 b) culturing เซลล์c) การแทนที่อาหารเลี้ยงd) ลูกกลมให้เติบโตอี) ระงับการลูกกลมในอาหารเลี้ยง และf) ฟื้นตัวเซลล์15 ตอนการดังกล่าวอาจแบ่งได้เป็นสองขั้นตอน เช่น ขั้นตอนการ culturingขั้นตอนการกู้คืนเซลล์ (เซลล์ขั้นตอนการเก็บเกี่ยว) และเซลล์ (เซลล์วัฒนธรรมขั้นตอน) ขั้นวัฒนธรรมเซลล์ประกอบด้วยขั้นตอน) กับ d), และขั้นตอนการเก็บเกี่ยวเซลล์ประกอบด้วยขั้นตอนอี) และ f) คำว่า "ทรงคล้ายทรงกลม" ใช้นี้อ้างอิงถึงคลัสเตอร์เซลล์สามมิติรวมถึงจำนวนของเซลล์ที่รวม20 [0025]แต่ละขั้นตอนจะสามารถอธิบายได้ดังนี้ก) ขั้นตอนการเพิ่มอาหารเลี้ยงที่ซึ่งเซลล์ที่ออกไป ตู้เพาะเลี้ยงs 1ขั้นตอนนี้เป็นขั้นตอนของการเตรียมการสำหรับวัฒนธรรมของเซลล์ ในขั้นตอนนี้ จำนวนเซลล์ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างกระจายในการอาหารเลี้ยง และมีเพิ่มแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 125 A lower limit of the total number of cells is equal to or greater than the number (n) ofโพรง 10 present in the ตู้เพาะเลี้ยง 1.An upper limit of the total number of cells is equal to or less than a number obtained by multiplying the number (n) of โพรง by a value obtained by dividing the volume (V) of each of the โพรง 10 of the ตู้เพาะเลี้ยง 1 by the volume (v) of cells to be seeded. The upper limit 30 of the total number of cells can be represented by the following formula using symbols: V/vxn. This is based on the premise that the volumes (V) of the จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of โพรง 10 are the same. If the volumes (V) of the จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of โพรง 10 are different, an average value is used.The อาหารเลี้ยง is adjusted depending on the cells to be cultured.[0026] 12b) Step of culturing cellsThe cells are cultured for 12 hours or more in each ตู้เพาะเลี้ยง 1 to thereby allow the cells to form a spheroid. When the อาหารเลี้ยง is added to each ตู้เพาะเลี้ยง 1, the cells dispersed in the อาหารเลี้ยง are loaded into the โพรง 10 and the cells are cultured in the5 respective โพรง 10. It is preferable to load one cell into each recess 10, and it is preferable toform one spheroid in the ที่ว่าง formed by the ส่วนล่าง 11. In each recess 10, a cellproliferates at the ส่วนล่าง 11 of the recess 10. If at least one cell is not present in each recess during culture and seeding, no spheroid is formed in the recess 10, because any cell does not move from the adjacent recess 10 to the said recess 10 during culture. In order to culture 10 ลูกกลม at a high density, it is preferable to form a spheroid in each recess 10. Accordingly, it is preferable to form at least one cell in each recess 10. In terms of the production efficiency, it is preferable to reduce the initial number of cells as much as possible and to recover as many ลูกกลม as possible, and therefore it is preferable that the number of cells present in each recess10 be small as much as possible. For this reason, it is preferable that one cell be present in each15 recess 10.c) Step of การแทนที่ the อาหารเลี้ยงDuring การแทนที่ of the อาหารเลี้ยง, 20% or more of the อาหารเลี้ยง in each culturechamber 1 is sucked, and then the same amount of fresh อาหารเลี้ยง is injected into the culture chamber. It is preferable to replace the อาหารเลี้ยง at least once during cell culture. 20 d) Step of allowing ลูกกลม to growThe above-described steps a) to c) are performed a จำนวนที่มากกว่าหนึ่ง of times to thereby allowลูกกลม to grow. In the case of differentiating and inducing ลูกกลม, it is preferable that each spheroid be allowed to grow to a size limited by the ที่ว่าง formed by the ส่วนล่าง 11 of each recess 10 and then the อาหารเลี้ยง be replaced with differentiation induction อาหารเลี้ยง to 25 thereby differentiate each spheroid. In addition, it is more preferable that 60% or more of the total number of ลูกกลม formed in the ตู้เพาะเลี้ยงs 1 have a diameter in a range of ±5% of an average spheroid diameter.[0027]e) Step of suspending the ลูกกลม in the อาหารเลี้ยง30

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในทางตรงกันข้ามเมื่อมันมีจุดมุ่งหมายที่จะทำให้เกิดเนื้อร้ายในส่วนภาคกลางของเซลล์เช่นในเซลล์มะเร็ง (กาชาน Hirschhaeuser et al, "เนื้องอกในเซลล์ลูกกลม: การ. เครื่องมือประเมินจะจับขึ้นมาอีกครั้ง" วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ 148 (2010) 3-15, รูป. 1) ที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางR เทียบเท่าเป็นที่ควรใช้คือเท่ากับหรือมากกว่า 400 เมตรและน้อยกว่า 2 มิลลิเมตร นี่คือ 15 เพราะเป็นที่กล่าวถึงข้างต้นสารอาหารที่สามารถถ่ายโอนไปเป็นส่วนหนึ่งของลูกกลมกลางที่มีขนาด300 เมตรเพื่อให้เนื้อร้ายที่ไม่ได้เกิดขึ้น ดังนั้นเพื่อที่จะได้รับลูกกลมมีเส้นผ่าศูนย์กลาง 300 เมตรหรือมากกว่านั้นก็เป็นสิ่งจำเป็นที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าเท่ากับหรือมากกว่า400 น. นอกจากนี้ D ลึกจากด้านล่างของส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของ แต่ละโพรง 20 ตั้งอยู่ในช่วงตั้งแต่ 0.6 ครั้งหรือมากกว่าถึง 3 ครั้งหรือน้อยกว่าขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าอาร์D ลึกเป็นที่ควรใช้คือในช่วงจาก 0.7 ครั้งหรือมากกว่า 1.2 หรือน้อยกว่าครั้งเทียบเท่าเส้นผ่าศูนย์กลางR และที่ควรใช้กว่าคือในช่วง 0.8-1 เท่าของเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าอาร์[0020] โดยในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1, พื้นที่ระหว่างสองติดโพรง 10 ที่ควรใช้คือแบน 25 ตัวอย่างเช่นระยะห่างระหว่างสองโพรง 10 ที่ควรใช้คืออยู่ในช่วงจาก 05:00 ถึง 50 เอ่อ. นี้เป็นเพราะมันเป็นที่นิยมในการเพิ่มจำนวนของลูกกลมต่อหน่วยพื้นที่และวัฒนธรรมลูกกลมที่สูงเพื่อให้ความหนาแน่นของจำนวนมากของลูกกลมสามารถรับได้อย่างมีประสิทธิภาพ เพื่อให้บรรลุนี้บริเวณพื้นผิวด้านบนของผนังที่ไม่มีลูกกลมจะเกิดขึ้นเป็นที่ควรใช้คือขนาดเล็กมากที่สุดเท่าที่เป็นไปได้ ในกรณีนี้ แต่เมื่อมุมเรียวที่มีขนาดเล็กและ 30 ผนังบางแตกง่ายอาจเกิดขึ้นเนื่องจากการสั่นสะเทือนในช่วงการเพาะเซลล์หรือการแทนที่ของอาหารเลี้ยง ดังนั้นระยะห่างระหว่างสองโพรงเป็นที่ควรใช้คือ 05:00 หรือมากกว่า ในมุมมองนี้ระยะห่างระหว่างสองเป็นโพรงที่ควรใช้คืออยู่ในช่วง 5-20 น. ที่บนมืออื่นๆ ที่สองติดโพรง 10 อาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆ ยกตัวอย่างเช่นเป็นส่วนหนึ่งของการสิ้นสุดของหนึ่งในสองโพรง 10 และเป็นส่วนหนึ่งของการสิ้นสุดของอีกหนึ่งหนึ่ง10 ของทั้งสองโพรง 10 อาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆ เพื่อให้พื้นผิวที่มีความโน้มเอียงของส่วนช่องเปิดของ 12 ซึ่งแต่ละรูปแบบมุมเรียวอาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆ ในรูปแบบรูปตัววี. [0021] 5 ตู้เพาะเลี้ยง 1 มีรูปร่างดังอธิบายเป็นที่ควรใช้คือการผลิตในลักษณะดังต่อไป. แต่ละคน ตู้เพาะเลี้ยง 1 มีที่ควรใช้คือปั้นเรซินที่เกิดขึ้นอย่างใดอย่างหนึ่งหรือรวมกันของสองคนหรือมากกว่าเลือกจากกลุ่มประกอบด้วยเรซินอะคริลิโพลีแลคติกกรดโพลีไกลโคลิกรดก, ยางสไตรีนคริลิค เรซินพอลิสไตรีนเรซินโพลีคาร์บอเนตโพลีเอสเตอร์เรซิ่น, โพลีไวนิล10 เม็ดเครื่องดื่มแอลกอฮอล์, เอทิลีนเรซินพอลิไวนิลแอลกอฮอล์, ยางเทอร์โมคลอไรด์ไวนิลเรซินและเรซินซิลิกอน. [0022] กลุ่มการทำงานเป็นที่ควรใช้คือเกิดขึ้นในโพรง 10 ของ ตู้เพาะเลี้ยง 1 โดยการปรับเปลี่ยนพื้นผิววิธีการรักษาของคนใดคนหนึ่งของการรักษาพลาสม่าเคลือบแก้วโคโรนา15 ปลดประจำการและโอโซนรังสียูวีหรือการรวมกันดังกล่าวและการรักษาเป็นที่ควรใช้คือการดำเนินการเพื่อให้มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น45 องศา หรือน้อยกว่า. นอกจากนี้ยังมีห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ชอบน้ำที่ยับยั้งการยึดเกาะมือถือเป็นที่ควรใช้คือตรึงในโพรง 10. ที่ควรใช้กว่าคือห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ชอบน้ำจะถูกตรึงในโพรง 10 ที่ได้รับการปฏิบัติเพื่อที่ดังกล่าวข้างต้น มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น 45 20 องศาหรือน้อยกว่า. Furthei nore เป็นเรียมหรือมีความซับซ้อนพอลิเมอเรียมเป็นที่ควรใช้คือตรึงในโพรง10. ที่ควรใช้กว่าคือการรักษาตรึงนี้จะดำเนินการในแต่ละช่อง10 ที่ได้รับการรักษา เพื่อให้มุมสัมผัสน้ำดังกล่าวจะกลายเป็น 45 องศาหรือน้อยกว่าในแต่ละช่อง 10 ซึ่งเป็นห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ชอบน้ำจะตรึงหรือ25 รวมกันของทั้งโพรง 10 [0023] นอกจากนี้แต่ละโพรง 10 ที่ควรใช้คือ มีเซลล์ผิวที่ไม่ติดที่อย่างน้อยหนึ่งพอลิเมอของห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ชอบน้ำที่ยับยั้งการยึดเกาะของเซลล์และฟอสโฟหรือซับซ้อนเรียมลิเมอร์ที่ถูกตรึงหลังจากที่กลุ่มการทำงาน30 เกิดขึ้นในโพรงโดยการรักษาปรับผิว วิธีการของคนใดคนหนึ่งของพลาสม่ารักษาเคลือบกระจก, ปล่อยโคโรนาและโอโซนรังสียูวีหรือการรวมกันดังกล่าวและการรักษาที่จะดำเนินการเพื่อให้มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น 45 องศาหรือน้อยกว่า อื่น ๆที่ควรใช้คือการรักษานี้จะดำเนินการร่วมกันกับหนึ่งหรือรวมกันของข้างต้นที่กล่าวถึงการรักษา. 11 ห่วงโซ่ลิเมอร์ดังกล่าวข้างต้นเป็นน้ำที่ควรใช้คือโพลี (ไฮดรอกซีเอธิลเมธาคริเลต ) ที่ควรใช้กว่าคือน้ำหนักโมเลกุลเฉลี่ยของโพลี (ไฮดรอกซีเอธิลเมธาคริเลต) เป็น 100,000 หรือมากกว่า. [0024] 5 <วิธีเพาะเลี้ยง> ถัดไปวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์โดยใช้ตู้เพาะ เลี้ยง s 1 แสดงในมะเดื่อ . 1-3 จะอธิบายการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีการดำเนินการโดยขั้นตอนต่อไปนี้: ก) การเพิ่มอาหารเลี้ยงที่เซลล์มีการกระจายไปยังตู้เพาะเลี้ยง s 1; 10 ข) การเพาะเลี้ยงเซลล์; c) การแทนที่อาหารเลี้ยง ; D) ที่ช่วยให้ลูกกลมที่จะเติบโต; e) การระงับลูกกลมในอาหารเลี้ยงนั้น และฉ) การฟื้นตัวของเซลล์. 15 ขั้นตอนดังกล่าวข้างต้นสามารถแบ่งได้เป็นสองขั้นตอนคือขั้นตอนของการเพาะเลี้ยงเซลล์(ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์) และขั้นตอนในการกู้คืนเซลล์ (ขั้นตอนการเก็บเกี่ยวเซลล์) ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์รวมถึงขั้นตอน) เพื่อ d) และขั้นตอนการเก็บเกี่ยวเซลล์รวมถึงจขั้นตอน) และฉ). คำว่า "ลูกกลม" ที่ใช้ในที่นี้หมายถึงกลุ่มเซลล์สามมิติรวมทั้งจำนวนของเซลล์รวม. 20 [0025] แต่ละขั้นตอนมีรายละเอียดดังนี้. ก) ขั้นตอนของการเพิ่มอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีการกระจายไปยังตู้เพาะเลี้ยง s 1 ขั้นตอนนี้เป็นขั้นตอนของการเตรียมความพร้อมสำหรับวัฒนธรรมของเซลล์ ในขั้นตอนนี้จำนวนของเซลล์ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างจะแยกย้ายกันไปในอาหารเลี้ยงและมีการเพิ่มในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1. 25 วงเงินที่ต่ำกว่าของจำนวนเสียงทั้งหมดของเซลล์ที่มีค่าเท่ากับหรือมากกว่าจำนวน (n) ของโพรง 10 อยู่ในตู้เพาะเลี้ยง 1. ขีด จำกัด บนของจำนวนเสียงทั้งหมดของเซลล์เท่ากับหรือน้อยกว่าจำนวนที่ได้รับโดยการคูณจำนวน(n) ของโพรงโดยค่าที่ได้รับโดยการหารปริมาณ (V) ของแต่ละ ของโพรง10 ของตู้เพาะเลี้ยง 1 โดยระดับเสียง (V) ของเซลล์ที่จะได้รับเมล็ด ขีด จำกัด บน 30 ของจำนวนเสียงทั้งหมดของเซลล์สามารถแสดงโดยสูตรต่อไปนี้โดยใช้สัญลักษณ์:. V / vxn นี้ขึ้นอยู่กับสมมติฐานที่ว่าปริมาณ (V) ของจำนวนที่มากกว่าหนึ่งของโพรง 10 เหมือนกัน หากปริมาณ (V) ของจำนวนที่มากกว่าหนึ่งของโพรง 10 ที่แตกต่างกันมีค่าเฉลี่ยจะใช้. อาหารเลี้ยงจะมีการปรับขึ้นอยู่กับเซลล์ที่จะเพาะเลี้ยง. [0026] 12 ข) ขั้นตอนของเซลล์เพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 12 ชั่วโมงหรือมากกว่านั้นในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1 ถึงจึงช่วยให้เซลล์ในรูปแบบลูกกลม เมื่ออาหารเลี้ยงจะถูกเพิ่มในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1 เซลล์แยกย้ายกันไปในอาหารเลี้ยงจะถูกโหลดเข้าไปในโพรง 10 และเซลล์ที่มีการเพาะเลี้ยงใน5 นั้นโพรง 10 มันเป็นที่นิยมในการโหลดเซลล์หนึ่งในแต่ละช่อง 10 และมันก็เป็นที่นิยมในรูปแบบหนึ่งลูกกลมในที่ว่างที่เกิดขึ้นจากส่วนล่าง11 ในแต่ละช่อง 10, เซลล์proliferates ที่ส่วนล่างของช่อง 11 10 ถ้าอย่างน้อยหนึ่งเซลล์ไม่อยู่ในแต่ละช่องระหว่างวัฒนธรรมและการเพาะลูกกลมไม่มีจะเกิดขึ้นในช่อง 10 เพราะเซลล์ใด ๆ ไม่ได้ย้ายจากช่องที่อยู่ติดกัน10 ไปพักผ่อนกล่าวว่าในช่วง 10 วัฒนธรรม เพื่อวัฒนธรรม 10 ลูกกลมที่มีความหนาแน่นสูงเป็นที่นิยมในรูปแบบลูกกลมในแต่ละช่อง 10 ดังนั้นมันจะดีกว่าที่จะสร้างอย่างน้อยหนึ่งเซลล์ในแต่ละช่อง10 ในแง่ของประสิทธิภาพการผลิตก็เป็นที่นิยมเพื่อลดจำนวนการเริ่มต้นของเซลล์ที่มากที่สุดเท่าที่เป็นไปได้และการกู้คืนเป็นจำนวนมากลูกกลมที่เป็นไปได้และดังนั้นจึงเป็นที่นิยมว่าจำนวนของเซลล์ที่มีอยู่ในแต่ละช่อง10 จะมีขนาดเล็กเท่าที่จะทำได้ ด้วยเหตุนี้มันเป็นที่นิยมที่หนึ่งเซลล์จะอยู่ในแต่ละ15 ช่อง 10 ค) ขั้นตอนของการแทนที่อาหารเลี้ยงในระหว่างการแทนที่ของอาหารเลี้ยง20% หรือมากกว่าของอาหารเลี้ยงในแต่ละวัฒนธรรมห้อง1 ถูกดูด แล้วจำนวนเดียวกันของอาหารสดเลี้ยงถูกฉีดเข้าไปในวัฒนธรรมห้อง เป็นที่นิยมที่จะเปลี่ยนอาหารเลี้ยงอย่างน้อยหนึ่งครั้งในช่วงการเพาะเลี้ยงเซลล์. 20 ง) ขั้นตอนในการช่วยให้ลูกกลมที่จะเติบโตขั้นตอนข้างต้นอธิบาย) เพื่อค) มีการดำเนินการจำนวนที่มากกว่าหนึ่งครั้งจะจึงช่วยให้ลูกกลมไปเติบโต ในกรณีที่มีความแตกต่างและการกระตุ้นให้เกิดลูกกลมมันจะดีกว่าว่าแต่ละลูกกลมจะได้รับอนุญาตที่จะเติบโตให้มีขนาด จำกัด โดยที่ว่างที่เกิดขึ้นจากส่วนล่าง 11 ของแต่ละช่อง10 แล้วอาหารเลี้ยงถูกแทนที่ด้วยการเหนี่ยวนำความแตกต่างของอาหารเลี้ยง ไป25 จึงแยกความแตกต่างแต่ละลูกกลม นอกจากนี้ยังเป็นที่นิยมมากขึ้นว่า 60% หรือมากกว่าของจำนวนเสียงทั้งหมดของลูกกลมก่อตัวขึ้นในตู้เพาะเลี้ยงs 1 มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางอยู่ในช่วงของ± 5% ของที่เส้นผ่าศูนย์กลางลูกกลมเฉลี่ย. [0027] จ) ขั้นตอนการ ระงับลูกกลมในอาหารเลี้ยง30

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในทางตรงกันข้าม เมื่อมีวัตถุประสงค์เพื่อให้เกิดการตายเฉพาะส่วนในส่วนกลางเซลล์ เช่น
ในเซลล์มะเร็ง ( Franziska hirschhaeuser et al . , " หลายเซลล์เนื้องอกลูกกลม :
underestimated เครื่องมือจับขึ้นอีกครั้ง " , วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ 148 ( 2553 ) ที่ 2 , ฟิค ,
1 ) เทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลาง R คือที่ควรใช้คือเท่ากับหรือมากกว่า 400 น. และน้อยกว่า 2 มิลลิเมตรนี้เป็นเพราะ ตามที่กล่าวไว้ข้างต้น สารอาหารที่สามารถโอนไปยังส่วนกลางของสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมันกับ
ขนาด 300 PM ให้ตายไม่เกิด ดังนั้นเพื่อให้ได้เป็นรูปกลมรี
ที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 300 PM หรือมากกว่า มันเป็นสิ่งจำเป็นที่เทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลางเท่ากับหรือมากกว่า 400 00
.
นอกจากนี้ความลึก D จากด้านล่างของส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละ 20 โพรงตั้งอยู่ในช่วง 0.6 ถึง 3 ครั้งหรือมากกว่าหรือน้อยกว่าครั้งเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่า R .
ความลึก D ที่ควรใช้คือในช่วงจาก 0.7 ครั้งหรือมากกว่าหรือน้อยกว่า 1 ครั้งเทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลางที่ควรใช้กว่าคือ
R และ ในช่วงตั้งแต่ 0.8 - 1 ครั้งเทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลาง .
[ ]
0020 ในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง 1 พื้นที่ระหว่างสองติดกันโพรง 10 ที่ควรใช้คือแบน 25 ตัวอย่าง ระยะห่างระหว่างสองโพรง 10 ที่ควรใช้คือในช่วงตั้งแต่ 5 โมง 50 . . .
นี่เป็นเพราะมันเป็นที่พึงประสงค์เพื่อเพิ่มจำนวนลูกกลมต่อพื้นที่และวัฒนธรรม
ลูกกลมที่ความหนาแน่นสูงเพื่อให้ตัวเลขขนาดใหญ่ของลูกกลมสามารถได้อย่างมีประสิทธิภาพได้

ให้บรรลุนี้ พื้นที่ของพื้นผิวบนของผนังที่ไม่มีรูปแบบเป็นรูปกลมรี
ที่ควรใช้คือขนาดเล็กมากที่สุดเท่าที่เป็นไปได้ แต่ในกรณีนี้เมื่อเรียวมุมเล็กๆ 30 ผนังบางแตกได้อย่างง่ายดายอาจเกิดขึ้นเนื่องจากการสั่นสะเทือนในเซลล์เพาะ หรือการแทนที่
ของอาหารเลี้ยง . ดังนั้นระยะห่างระหว่างสองโพรงเป็นที่ควรใช้คือ 5 โมง หรือมากกว่านั้น ใน
มุมมองนี้ ระยะห่างระหว่างสองโพรงเป็นที่ควรใช้คือในช่วงตั้งแต่ 5 ถึง 20 น.
บนมืออื่น ๆสองที่อยู่ติดกันโพรง 10 อาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆ ตัวอย่างเช่นเป็นส่วนหนึ่งของปลายหนึ่งสองโพรง 10 และเป็นส่วนหนึ่งของการสิ้นสุดของอีกคน






10 ของทั้งสองโพรง 10 อาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆเพื่อให้เอียงของพื้นผิวของส่วนช่องเปิด 12 ซึ่งแต่ละรูปแบบมุมเรียว ,อาจเข้ามาติดต่อกับแต่ละอื่น ๆ ในรูปแบบ บริษัท เชฟรอน รูปภาพ รูปร่าง
[ ]
5 ตู้เพาะเลี้ยง 1 มีข้างต้นอธิบายรูปร่างที่ควรใช้คือผลิตในแต่ละตู้เพาะเลี้ยง

ตามลักษณะที่ 1 คือ ที่ควรใช้คือเรซินพลาสติกที่เกิดจากหนึ่งหรือรวมกันของ
2 หรือมากกว่าเลือกจากกลุ่มประกอบด้วยอะคริลิกเรซิน ,