The sequence and structure of the t

The sequence and structure of the target protein exert a marked effect on its soluble expression in
Escherichia coli. The effects of the mutation of an amylase isolated from Bacillus licheniformis (BLA) on its
soluble expression in E. coli were investigated. A random mutation library of BLA was constructed to
screen for mutations that resulted in enhanced soluble expression in E. coli. Two interesting mutations
(A390I and D401V) were identified, which are located at the interaction surface between the A and C
domains of BLA. The A390I mutation enhanced soluble BLA expression by 2.0-fold compared to wild
type, while D401V decreased soluble expression 160-fold. Structural analysis revealed that A390 and
D401 residues could affect the interaction between the A and C domains of BLA. Therefore, soluble
expression of the target protein in E. coli could be affected by introduction of a mutation in the protein
sequence.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลำดับและโครงสร้างของโปรตีนเป้าหมายออกแรงผลทำเครื่องหมายในการแสดงออกที่ละลายในEscherichia coli ผลกระทบของการกลายพันธุ์ของ amylase ที่แยกได้จากแบคทีเรีย licheniformis (BLA) ในการมีการตรวจสอบนิพจน์ละลายใน E. coli ไลบรารีกลายพันธุ์แบบสุ่มของ BLA ถูกสร้างขึ้นเพื่อหน้าจอสำหรับพันธุ์ที่ผลในเพิ่มนิพจน์ละลายใน E. coli สองพันธุ์ที่น่าสนใจ(A390I และ D401V) ระบุ ซึ่งมีอยู่ในพื้นผิวการโต้ตอบระหว่าง A และ Cโดเมนของ BLA ผ่า A390I เพิ่มเกล็ด BLA นิพจน์โดย 2.0-fold เมื่อเทียบกับป่าชนิด ในขณะที่ D401V ลดนิพจน์ละลาย 160-fold การวิเคราะห์โครงสร้างเปิดเผยว่า A390 และตกค้าง D401 ผลการโต้ตอบระหว่างโดเมน A และ C ของ BLA ดังนั้น ละลายแสดงออกของโปรตีนเป้าหมายใน E. coli อาจได้รับผลกระทบของการกลายพันธุ์ในโปรตีนลำดับนั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลำดับและโครงสร้างของโปรตีนเป้าหมายออกแรงผลการทำเครื่องหมายในการแสดงออกที่ละลายน้ำได้ในเชื้อ Escherichia coli
ผลกระทบจากการกลายพันธุ์ของอะไมเลสที่แยกได้จาก Bacillus licheniformis นี้ (BLA)
ในตัวของมันแสดงออกละลายในเชื้อE. coli ถูกตรวจสอบ ห้องสมุดกลายพันธุ์แบบสุ่มของ BLA
ถูกสร้างขึ้นมาเพื่อหน้าจอสำหรับการกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิดการแสดงออกที่ละลายน้ำได้เพิ่มขึ้นในเชื้อE. coli สองการกลายพันธุ์ที่น่าสนใจ
(A390I และ D401V) ถูกระบุซึ่งตั้งอยู่ที่พื้นผิวการทำงานร่วมกันระหว่าง A และ C
โดเมนของ BLA ละลายเพิ่มขึ้นกลายพันธุ์ A390I แสดงออก BLA ขึ้น 2.0
เท่าเมื่อเทียบกับป่าประเภทในขณะที่ลดลงD401V แสดงออกที่ละลายน้ำได้ 160 เท่า การวิเคราะห์โครงสร้างเปิดเผยว่า A390
และสารตกค้างD401 อาจมีผลต่อการทำงานร่วมกันระหว่าง A และ C โดเมนของ BLA ดังนั้นที่ละลายน้ำได้แสดงออกของโปรตีนเป้าหมายในเชื้อ E. coli ได้รับผลกระทบโดยการแนะนำของการกลายพันธุ์ในโปรตีนลำดับ