8.4
3.10.3 Genetic indicators
There are a number of molecular techniques that can be used to follow the effect of pollutants in the environment and these include the introduction of genetically engineered indicator organisms, and antibiotic- and heavy¬metal-resistance genes.
One of the most rapid and sensitive methods of screening for gene expres¬sion is to fuse the relevant promoter sequences to those for a product that is easily detected. The detection can be by antibiotic and heavy metal resistance but the best is one where light is produced. A number of examples of these are given in Table 3.11.
The gusA gene product will cleave the colourless substrate X-gal (5-bromo¬4-chloro-3-indolyl P-D-galactoside) to give a blue colour and this gene can be fused to a promoter that responds to the pollutant. Another example is the insertion into an E. coli strain of a plasmid containing the lacZ gene, which codes for the enzyme 0-galactosidase, which has been linked to the arsR gene that codes for the regulatory protein of the ars operon (Scott et al., 1997). The ars operon is involved in the removal of antimony and arsenic from the cell.
8.5 There is another group of genes where the product does not require sub¬strate addition, as these genes code for light-producing proteins; the luciferase enzyme luxAB from prokaryotes and the luc gene from eukaryotes,
and more recently a green fluorescent protein coded by the gfp gene from a jellyfish, Aequorea victoria (Misteli and Spector, 1997; Kendall and Badminton, 1998). These types of marker gene have been placed under the control of the promoters of genes associated with a response to toxic compounds. Thus if the engineered bacteria are exposed to a toxic compound it
8.4 ตัวชี้วัด 3.10.3
ทางพันธุกรรมมีจำนวนของเทคนิคระดับโมเลกุลที่สามารถใช้ในการปฏิบัติตามผลกระทบจากมลพิษในสภาพแวดล้อมและเหล่านี้รวมถึงการเปิดตัวของสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรมตัวบ่งชี้และฌยีนยาปฏิชีวนะและโลหะหนักต้านทาน
หนึ่งในวิธีการที่รวดเร็วที่สุดและมีความสำคัญของการตรวจคัดกรองการแสดงออกของยีนฌไซออนคือการหลอมรวมลำดับผู้ก่อการที่เกี่ยวข้องกับผู้ที่สำหรับผลิตภัณฑ์ที่ตรวจพบได้ง่าย การตรวจสอบโดยสามารถต้านทานยาปฏิชีวนะและโลหะหนัก แต่ที่ดีที่สุดเป็นหนึ่งในที่มีแสงที่ผลิต จำนวนตัวอย่างของเหล่านี้จะได้รับในตาราง 3.11.
ผลิตภัณฑ์ยีน gusa จะแยกสีพื้นผิว x-แกลลอน (5 โบรโม¬ 4 คลอโร-3-indolyl pd-galactoside) เพื่อให้สีฟ้าและยีนนี้สามารถหลอมรวมกับผู้ก่อการที่ตอบสนองต่อสารมลพิษ อีกตัวอย่างหนึ่งคือการแทรกลงในอีเมล สายพันธุ์ของเชื้อพลาสมิดที่มียีน lacZ ซึ่งรหัสสำหรับเอนไซม์ 0-galactosidase,ซึ่งได้รับการเชื่อมโยงกับยีน arsr ที่รหัสสำหรับโปรตีนของ operon ARS (สก็อตและอัล., 1997) operon ARS มีส่วนร่วมในการกำจัดของพลวงและสารหนูจากเซลล์
8.5 มีกลุ่มของยีนที่ผลิตภัณฑ์ที่ไม่จำเป็นต้องย่อย¬นอกจากนี้กลยุทธ์อื่นเป็นรหัสยีนเหล่านี้สำหรับโปรตีนแสงที่ผลิต.luxab luciferase เอนไซม์จากโปรคาริโอและยีนลัคจากยูคาริโอ,
และเมื่อเร็ว ๆ นี้โปรตีนเรืองแสงสีเขียวเขียนโดยยีน GFP จากแมงกะพรุน, victoria aequorea (misteli และ spector, 1997; เคนดอลและแบดมินตัน, 1998) ประเภทนี้ของยีนได้ถูกวางไว้ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อสารพิษดังนั้นหากแบคทีเรียวิศวกรรมมีการสัมผัสกับสารพิษมัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
