■ EXPERIMENTAL PROCEDURES
Students work in pairs. Experiment 1 is done in one 3-h lab period and Experiment 2 is done in two 3-h lab periods. Detailed procedures are in the Supporting Information. Experiment 1: Extraction and Characterization18,26,27 Students grind freeze-dried berries to a powder in a mortar and pestle. A solid−liquid extraction is performed on the berry powder with acidic methanol solution. An aliquot of the extract is set aside for analysis and the remaining solution is hydrolyzed with an equal volume of HCl (2 M) at reflux for 45 min. During reflux, students perform paper chromatography on the anthocyanin extract by spotting blueberry, blackberry, and raspberry extracts. Students characterize their sample with paper chromatography before and after hydrolysis.16,26,28 The colors of anthocyanins and anthocyanidins are used for visualization of spots. Students acquire a UV−vis spectrum of the hydrolyzed extract. Experiment 2: Investigation of Antioxidant Potential29,30 Students perform an antioxidant assay with ABTS+• on unhydrolyzed acidic berry extract from Experiment 1. A constant volume (12 mL) of ABTS+• solution (see the Instructor Notes in Supporting Information) is pipetted into each assay tube, followed by variable volumes of diluted (1/ 100) berry extract (0 (control), 0.5, 1.0, or 1.5 mL), and sufficient acidified methanol to keep the total assay volume constant in each assay tube (15 mL). Details of solution preparation for the assay are provided in Supporting Information Table S-1 and accompanying text in the Instructor Notes. The concentration of ABTS+• is monitored in each assay sample by UV−vis spectroscopy 10 min after sample preparation. Plots of ABTS+• concentration as a function of berry extract volume are prepared and analyzed.
■ขั้นตอนการทดลองนักเรียนทำงานคู่ ทดลอง 1 จะทำในห้องปฏิบัติการ 3 ชั่วโมงหนึ่ง และ 2 การทดลองจะทำในห้องปฏิบัติการ 3-h สองรอบระยะเวลา ขั้นตอนโดยละเอียดอยู่ในข้อมูลสนับสนุน ทดลองที่ 1: การสกัดและ Characterization18, 26, 27 นักบดเบอร์รี่แห้งผงในครกและสาก จะทำการดูด solid−liquid ในผงเบอร์รี่ด้วยเมทานอลเป็นกรด ส่วนลงตัวของสารสกัดได้จัดไว้สำหรับการวิเคราะห์ และการแก้ปัญหาที่เหลือคือ hydrolyzed ด้วยปริมาณเท่ากับ HCl (2 เมตร) ที่ไหลย้อนสำหรับ 45 นาที ระหว่างกรดไหลย้อน นักทำกระดาษ chromatography ในสารสกัดนั้น โดยจำบลูเบอรี่ แบล็คเบอร์รี่ และสารสกัดจากราสเบอร์รี่ นักเรียนลักษณะของพวกเขาอย่างกับ chromatography กระดาษก่อน และ หลังใช้สำหรับแสดงจุดสีของ anthocyanins และ anthocyanidins hydrolysis.16,26,28 นักเรียนที่ได้รับสารสกัดจาก hydrolyzed ในสเปกตรัม UV−vis ทดลองที่ 2: การตรวจสอบสารต้านอนุมูลอิสระ Potential29, 30 นักเรียนทำการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระ ด้วยรเรียน + •บนเบอร์รี่เปรี้ยว unhydrolyzed แยกจาก 1 การทดลอง ปริมาตรคง (12 มล.) รเรียน +•วิธีการแก้ไขปัญหา (ดูหมายเหตุผู้สอนสนับสนุนข้อมูล) เป็น pipetted ลงในหลอดทดสอบ ตาม ด้วยตัวแปรปริมาณเจือจาง (1 / 100) สารสกัด berry (0 (ควบคุม), 0.5, 1.0 หรือ 1.5 mL), และพอกรดเมทานอลการทดสอบรวมเสียงที่คงที่ในแต่ละหลอดทดสอบ (15 mL) รายละเอียดของการเตรียมการแก้ไขปัญหาสำหรับการวิเคราะห์ไว้ในตารางข้อมูลสนับสนุน S-1 และกับข้อความในบันทึกย่อของผู้สอน ความเข้มข้นของรเรียน + •จะตรวจสอบในแต่ละตัวอย่างทดสอบ โดย UV−vis มิก 10 นาทีหลังจากเตรียมตัวอย่าง วางรเรียน +•ความเข้มข้นเป็นฟังก์ชันของปริมาณสารสกัดจากเบอร์รี่เตรียม และวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..

■ขั้นตอนการทดลอง
การจับคู่ทำงาน การทดลองที่ 1 จะทำในช่วงเวลาหนึ่งในห้องปฏิบัติการ 3-H และการทดลองที่ 2 จะทำในห้องปฏิบัติการสองช่วงเวลา 3 ชั่วโมง ขั้นตอนอย่างละเอียดอยู่ในข้อมูลประกอบ การทดลองที่ 1: การสกัดและ Characterization18,26,27 นักเรียนบดเบอร์รี่แห้งเป็นผงในครกและสาก การสกัดของแข็งของเหลวจะดำเนินการในผงผลไม้เล็ก ๆ กับการแก้ปัญหาเมทานอลที่เป็นกรด หารของสารสกัดที่มีการตั้งสำรองสำหรับการวิเคราะห์และการแก้ปัญหาที่เหลือจะไฮโดรไลซ์ด้วยปริมาตรที่เท่ากันของ HCl (2 เมตร) ที่กรดไหลย้อนเป็นเวลา 45 นาที ในระหว่างการไหลย้อนนักเรียนดำเนินการโครมาโตกระดาษในสารสกัด anthocyanin ด้วยการหาบลูเบอร์รี่, สารสกัดจากผลไม้ชนิดหนึ่งและราสเบอร์รี่ นักเรียนตัวอย่างลักษณะของพวกเขาด้วยโครมาโตกระดาษก่อนและหลังการ hydrolysis.16,26,28 สีของ anthocyanins และ anthocyanidins จะใช้สำหรับการสร้างภาพของจุด นักเรียนที่ได้รับคลื่นความถี่ UV-Vis ของสารสกัดจากไฮโดรไลซ์ การทดลองที่ 2: การสืบสวนของสารต้านอนุมูลอิสระ Potential29,30 นักเรียนดำเนินการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระที่มี ABTS + •ในสารสกัดจากแบล็กเบอร์ unhydrolyzed เป็นกรดจากการทดลอง 1. ปริมาณคงที่ (12 มิลลิลิตร) ABTS + •การแก้ปัญหา (ดูหมายเหตุอาจารย์ในการสนับสนุนข้อมูล) ปิเปตในแต่ละ หลอดทดสอบตามปริมาณตัวแปรเจือจาง (1/100) สารสกัดจากผลไม้เล็ก ๆ (0 (Control), 0.5, 1.0 หรือ 1.5 มิลลิลิตร) และเมทานอลกรดเพียงพอที่จะให้คงปริมาณการทดสอบรวมในแต่ละหลอดทดสอบ (15 มิลลิลิตร) . รายละเอียดของการเตรียมวิธีแก้ปัญหาสำหรับการทดสอบที่มีการระบุไว้ในตารางที่สนับสนุนข้อมูล S-1 และข้อความประกอบในการสอนหมายเหตุ ความเข้มข้นของ ABTS + •มีการตรวจสอบในการทดสอบตัวอย่างแต่ละ UV-Vis สเปกโทรสโก 10 นาทีหลังจากการเตรียมสารตัวอย่าง แปลง ABTS + •ความเข้มข้นเป็นหน้าที่ของปริมาณสารสกัดจากผลไม้เล็กมีการจัดทำและวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..
