Lafora disease(LD) is an autosomal

Lafora disease(LD) is an autosomal recessive, fatal progressive myoclonus epilepsy caused by the abnormal bulldup of insoluble glycogen, called Lafora bodies. Mutations in the gene encoding the protein laforin lead to LD. Laforin is a dual-specificity phosphatase with a carbohydrate-bindlng module. This enzyme is necessary for proper glycogen metabolism, but its role din the development of LD not yet fully understood. In this study, we established a purification scheme to purify recombinant laforin and analyzed laforin to determine whether the monomer or dimer species is more physiologically relevant. Our ultimate goal is t crystallize laforin to determine its three-dimensional structure and use these insights to understand the enzyme. Human laforin is difficult to purify due to its tendency to be sequestered into inclusion bodies when expressed in E. coli. Therefore, we cloned the gene for laforin from the Gallus gallus(red rooster) genome into a bacterial expression vector and purified laforin from E. coli using a two-step purification procedure. We subjected monomeric Gallus aforin gel electrophoresis, mass spectrometry, dynamic light scattering, phosphatase and starch-binding assays. We conclude that laforin is present mainly as a monomer, remains monomeric, and has phosphatase and carbohydrate-binding activity comparable to human la Therefore, Gallus gallus laforin is an appropriate model for human laforin, and any insights we gain from it can be directly applied to human la forin. With this information we can move forward in understanding the role of laforin in the body and eventually develop treatment options for LD

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Lafora disease(LD) เป็นโรคลมบ้าหมู autosomal แก่นสานต์ ร้ายแรง myoclonus ก้าวหน้าที่เกิดจาก bulldup ปกติของไกลโคเจนไม่ละลายน้ำ เรียกว่าร่างกาย Lafora การกลายพันธุ์ในยีนรหัส laforin โปรตีนที่นำไปสู่ Laforin ld ให้เป็นฟอสฟาสองความจำเพาะกับโมดู bindlng คาร์โบไฮเดรต เอนไซม์นี้จำเป็นสำหรับการเผาผลาญไกลโคเจนที่เหมาะสม แต่ดินของบทบาทการพัฒนาของ LD ยังไม่เข้าใจ ในการศึกษานี้ เราสร้างโครงร่างการทำให้บริสุทธิ์การฟอก recombinant laforin และวิเคราะห์ laforin เพื่อตรวจสอบว่า ชนิดน้ำยาหรือ dimer ขึ้นทางสรีรวิทยาที่เกี่ยวข้อง เป้าหมายสูงสุดของเราคือ t ตกผลึก laforin เพื่อกำหนดโครงสร้างสามมิติ และใช้ข้อมูลเชิงลึกเหล่านี้จะเข้าใจการทำงานของเอนไซม์ Laforin มนุษย์ได้ยากให้บริสุทธิ์เนื่องจากแนวโน้มจะ sequestered เข้าไปในร่างกายรวมเมื่อแสดงออกใน E. coli ดังนั้น เราโคลนยีนสำหรับ laforin จากจีโน gallus(red rooster) กางเกงในเวกเตอร์นิพจน์แบคทีเรีย และบริสุทธิ์ laforin จาก E. coli ใช้ฟอกด้วยสองขั้นตอน เราต้องทำอิเจ aforin กางเกง monomeric รเมท แสงแบบไดนามิก scattering ฟอสฟา และ assays แป้งผูก เราสรุปว่า laforin มีอยู่ส่วนใหญ่เป็นน้ำยา ยังคง monomeric และมีฟอสฟา และคาร์โบไฮเดรตรวมกิจกรรมเปรียบได้กับมนุษย์ลาดังนั้น กางเกง laforin กางเกงเป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับมนุษย์ laforin และข้อมูลเชิงลึกของเราได้รับจากมันสามารถใช้โดยตรงกับมนุษย์ลา forin ด้วยข้อมูลนี้ เราสามารถเลื่อนไปข้างหน้าในการเข้าใจบทบาทของ laforin ในร่างกาย และในที่สุดพัฒนาตัวเลือกการรักษาสำหรับ LD

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โรค Lafora (LD) เป็น autosomal ถอยร้ายแรงโรคลมชักก้าวหน้า myoclonus ที่เกิดจากการ bulldup ที่ผิดปกติของไกลโคเจนที่ไม่ละลายน้ำที่เรียกว่าร่างกาย Lafora การกลายพันธุ์ในยีนเข้ารหัสนำโปรตีน laforin ไปเหอะ Laforin เป็นแบบ dual-phosphatase ความจำเพาะกับโมดูลคาร์โบไฮเดรต bindlng เอนไซม์นี้เป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการเผาผลาญไกลโคเจนที่เหมาะสม แต่บทบาทของดินการพัฒนาของ LD ยังไม่เข้าใจอย่างเต็มที่ ในการศึกษานี้เราจัดตั้งโครงการบริสุทธิ์ในการชำระล้าง laforin recombinant และวิเคราะห์ laforin เพื่อตรวจสอบว่าโมโนเมอร์หรือ dimer เป็นเผ่าพันธุ์ที่มีความเกี่ยวข้องทางสรีรวิทยา เป้าหมายสูงสุดของเราคือ T ตกผลึก laforin เพื่อตรวจสอบโครงสร้างสามมิติและใช้ข้อมูลเชิงลึกเหล่านี้จะเข้าใจการทำงานของเอนไซม์ laforin มนุษย์เป็นเรื่องยากที่จะชำระเนื่องจากแนวโน้มที่จะได้รับทรัพย์เข้าสู่ร่างกายเมื่อรวมแสดงใน E. coli ดังนั้นเราจึงโคลนยีนสำหรับ laforin จากกางเกงกางเกง (ไก่สีแดง) จีโนมเป็นเวกเตอร์แสดงออกแบคทีเรียและ laforin บริสุทธิ์จากเชื้อ E. coli ใช้กระบวนการทำให้บริสุทธิ์แบบสองขั้นตอน เราอยู่ภายใต้กางเกง monomeric ข่าวคราว aforin มวลสารกระเจิงแสงแบบไดนามิก phosphatase และแป้งที่มีผลผูกพันการตรวจ เราสรุปได้ว่า laforin เป็นปัจจุบันส่วนใหญ่เป็นโมโนเมอร์ยังคง monomeric และมี phosphatase และกิจกรรมของคาร์โบไฮเดรตที่มีผลผูกพันเปรียบได้กับมนุษย์ La ดังนั้นกางเกงกางเกง laforin เป็นรูปแบบที่เหมาะสมสำหรับ laforin มนุษย์และข้อมูลเชิงลึกใด ๆ ที่เราได้รับจากการที่จะสามารถนำมาใช้โดยตรง มนุษย์ La Forin ด้วยข้อมูลนี้เราสามารถก้าวไปข้างหน้าในการทำความเข้าใจบทบาทของ laforin ในร่างกายและในที่สุดก็พัฒนาตัวเลือกการรักษาสำหรับ LD

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

lafora โรค ( LD ) เป็นยีนด้อยร้ายแรง ก้าวหน้าออฟฟิศอัพเดตโรคลมชักที่เกิดจากความผิดปกติของ bulldup ไกลโคเจนละลาย เรียกว่า lafora ศพ การกลายพันธุ์ในยีนโปรตีน laforin การเข้ารหัสทำให้ ID laforin เป็นใบคู่ความจำเพาะกับคาร์โบไฮเดรต bindlng โมดูล เอนไซม์นี้เป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการเผาผลาญไกลโคเจนที่เหมาะสม แต่บทบาทของดินพัฒนา LD ยังไม่เข้าใจ ในการศึกษานี้จึงได้จัดตั้งโครงการบำบัดน้ำเสียฟอกยีน laforin และวิเคราะห์ laforin เพื่อตรวจสอบว่ามอนอเมอร์ชนิดหรือเป็นเราที่เกี่ยวข้องเพิ่มเติม เป้าหมายสูงสุดของเราคือ T ตกผลึก laforin เพื่อตรวจสอบของโครงสร้างสามมิติและการใช้ข้อมูลเชิงลึกนี้เข้าใจเอนไซม์ laforin มนุษย์ยากที่จะชำระเนื่องจากแนวโน้มที่จะถูกแยกเป็น inclusion bodies ที่แสดงออกใน E . coli ดังนั้นเราจึงโคลนยีนสำหรับ laforin จาก gallus gallus ( ไก่แดง ) จีโนมในการแสดงออกของเวกเตอร์แบคทีเรียและทำให้บริสุทธิ์ laforin จาก E . coli โดยใช้กระบวนการบำบัดสองขั้นตอน เราอาจเกิด aforin gallus เจล , แมส การกระจายแสงแบบไดนามิก , และการเปลี่ยนแปลงแป้ง ) . เราสรุปได้ว่า laforin ในปัจจุบันส่วนใหญ่เป็นโมโนเมอร์ ยังคงเกิดและมีการเปลี่ยนแปลง และคาร์โบไฮเดรตรวมกิจกรรมกับมนุษย์ laforin gallus gallus ลา จึงเป็นรูปแบบที่เหมาะสมสำหรับ laforin มนุษย์ และข้อมูลเชิงลึกที่เราได้รับจากมันสามารถใช้โดยตรงกับมนุษย์ลา forin . จากข้อมูลนี้เราสามารถย้ายไปข้างหน้าในการทำความเข้าใจบทบาทของ laforin ในร่างกายและในที่สุดก็พัฒนาตัวเลือกการรักษาสำหรับแอลดี