2.4.7. Differential scanning calorimetry (DSC)
The detection of changes in cellular components induced by the use of CFS, chitosan and SL were evaluated by DSC. For that purpose, L. innocua and S. putrefaciens were grown for 18 h at 30 °C in Mueller Hinton and Tryptone Soy broth (Biokar Diagnostics, Beauvais, France), respectively. After incubation populations were higher than 109 CFU/ml. Aliquots of 25 ml of bacterial suspensions were centrifuged (8000 g, for 15 min at 4 °C) in order to separate the growth medium. Microorganisms were washed twice and resuspended in 25 ml of Ringer's solution (Biokar Diagnostics, Beauvais, France) at pH 5.50. The CFS was concentrate by lyophilization by means of a freeze dryer (MartinChrist, Alpha 1–4 LD, Denmark). The lyophilized CFS was added, alone or combined with chitosan and SL. The concentrations of each antimicrobial used were equivalent to twice the minimal inhibitory concentration previously determinated ( Schelegueda et al., 2012): 200 μg/ml chitosan; 36,000 μg/ml SL. Systems were incubated at 30 °C for 24 h under agitation. After that, cells were pelleted (8000 g for 15 min at 4 °C), washed twice with sterile distilled water and centrifuged again. They were weighed (5–15 mg) and transferred into stainless steel DSC crucibles. Pellets water contents were determined drying the samples to constant weight at 105 °C as 80–85% on wet basis. An empty crucible was used as reference. Samples and the reference were heated in the calorimeter (Q100, TA Instruments Waters, USA.) at 3 °C min−1 from 5 to 150 °C.
2.4.7 การสแกนที่แตกต่างกัน (DSC)
การตรวจสอบของการเปลี่ยนแปลงในส่วนโทรศัพท์มือถือที่เกิดจากการใช้งานของ CFS, ไคโตซานและ SL ถูกประเมินโดย DSC เพื่อที่ลิตร innocua และ S. putrefaciens ปลูกเป็นเวลา 18 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสในมูลเลอร์ฮินตันและ Tryptone ถั่วเหลืองน้ำซุป (วินิจฉัย Biokar, Beauvais, ฝรั่งเศส) ตามลำดับ หลังจากบ่มประชากรสูงกว่า 109 CFU / ml aliquots 25 มลสารแขวนลอยแบคทีเรียถูกหมุนเหวี่ยง (8000 กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C) เพื่อแยกกลางการเจริญเติบโต จุลินทรีย์ถูกล้างสองครั้งและ resuspended ใน 25 มล. ของการแก้ปัญหาริงเกอร์ (Biokar วินิจฉัย Beauvais ฝรั่งเศส) ที่ pH 5.50 CFS เป็นสมาธิโดยแห้งแบบเยือกแข็งโดยวิธีการของเครื่องเป่าแช่แข็ง (MartinChrist อัลฟา 1-4 LD, เดนมาร์ก) CFS แห้งเสริมคนเดียวหรือรวมกับไคโตซานและ SL ความเข้มข้นของแต่ละยาต้านจุลชีพที่ใช้คือเทียบเท่ากับสองครั้งที่ขัดขวางความเข้มข้นน้อยที่สุด determinated ก่อนหน้านี้ (Schelegueda et al, 2012.) 200 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรไคโตซาน; 36,000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร SL ระบบถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงภายใต้การกวน หลังจากนั้นเซลล์เม็ด (8000 กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C) ล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและปั่นอีกครั้ง พวกเขาได้รับการชั่งน้ำหนัก (5-15 มก.) และโอนเข้ามาในสแตนเลสทดลอง DSC เม็ดเนื้อหาน้ำได้รับการพิจารณาการอบแห้งตัวอย่างให้น้ำหนักคงที่ที่ 105 ° C เป็น 80-85% บนพื้นฐานเปียก เบ้าหลอมที่ว่างเปล่าถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิง ตัวอย่างและการอ้างอิงถูกความร้อนในเครื่องวัดความร้อน (Q100, TA เครื่องดนตรี Waters, USA.) ที่ 3 ° C-1 นาที 5-150 ° C
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4.7 . ดิฟเฟอเรนเชียลสแกนนิง ( DSC )การตรวจหาการเปลี่ยนแปลงในเซลล์ ส่วนประกอบและการใช้โฆษณา ไคโตซานและ SL จำนวน DSC สำหรับวัตถุประสงค์ที่ ล. innocua และ S . putrefaciens ปลูก 18 H 30 ° C ใน มูลเลอร์ ฮินตัน ถั่วเหลือง และน้ำซุป ( ทริพโทน biokar การวินิจฉัย , Beauvais , ฝรั่งเศส ) , ตามลำดับ หลังจากบ่มเพาะประชากรสูงกว่า 109 CFU / มล. เฉยๆ 25 มิลลิลิตรแบคทีเรียช่วงล่างเป็นระดับ ( 8000 กรัม สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C ) เพื่อแยกกลางการเจริญเติบโต มีค่าซักสองครั้ง และ resuspended 25 มิลลิลิตร ( biokar เป็นโซลูชั่นการวินิจฉัย , Beauvais , ฝรั่งเศส ) ที่ pH 5.50 . โฆษณาที่เป็นสมาธิโดยเอนไซม์โดยวิธีแช่แข็งแห้ง ( martinchrist อัลฟ่า 1 – 4 LD , เดนมาร์ก ) โปรตีนที่โฆษณาเป็นคนเดียวหรือรวมกับไคโตซานและ SL ความเข้มข้นของแต่ละสารต้านใช้เทียบเท่ากับสองความเข้มข้นน้อยที่สุดพบว่าก่อนหน้านี้ determinated ( schelegueda et al . , 2012 ) : 200 μ g / ml , ไคโตซาน ; μ g / ml ระบบมาก อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ในการกวน หลังจากนั้นเซลล์มีเม็ด ( 8000 กรัม สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C ) , ล้างด้วยน้ำกลั่นสองครั้งเป็นหมันไฟฟ้าอีกครั้ง มันหนัก ( 5 – 15 มิลลิกรัม ) และโอนเข้ามาใช้เบ้าหลอมเหล็กสแตนเลส . ปริมาณน้ำเป็นเม็ดแห้งตัวอย่างน้ำหนักคงที่ที่ 105 ° C เป็น 80 - 85 % บนพื้นฐานที่เปียก การเบ้าเปล่าถูกใช้เป็นข้อมูลอ้างอิง ตัวอย่างและการอ้างอิงที่ถูกให้ความร้อนในแคลอรีมิเตอร์ ( ต่อเครื่องมือทาน้ำ , USA ) ที่ 3 ° C มิน− 1 จาก 5 ถึง 150 องศา
การแปล กรุณารอสักครู่..