Using this compartmentalized networ

Using this compartmentalized network, intracellular fluxes in the wild type and 2103a-68 were calculated.

Determining the intracellular fluxes during the actual production phase for malic acid was not possible due to technical limitations.

GCMS-based flux analysis measures the labeling enrichment in the amino acids, which allows deduction of labeling patterns of the amino acid precursors from the central carbon metabolism, in order to get a precise estimate of intracellular fluxes.

As this production phase is characterized by nitrogen starvation, the de novo synthesis of amino acids is hampered; hence, the derived labeling patterns would not reflect the actual metabolic state of the cell.

Nevertheless, the fluxes presented here, which were obtained during exponential growth, prove that the overexpression of the reductive TCA branch works to improve the malic acid production rates.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้งานเครือข่าย คำนวณตัวช่วยหลอมภายในเซลล์ในชนิดป่าและ 2103a-68 การกำหนดตัวช่วยหลอมภายในเซลล์ระหว่างขั้นตอนการผลิตจริงสำหรับกรดไม่ได้เนื่องจากข้อจำกัดทางเทคนิค วิเคราะห์คะแนน GCMS ฟลักซ์วัดตกแต่งติดฉลากในกรดอะมิโน ซึ่งช่วยให้หักติดฉลากรูปแบบของสารตั้งต้นกรดอะมิโนจากการเผาผลาญคาร์บอนกลาง เพื่อให้การประเมินความแม่นยำของตัวช่วยหลอมภายในเซลล์เป็นขั้นตอนการผลิตเป็นลักษณะไนโตรเจนความอดอยาก de novo สังเคราะห์กรดอะมิโนมีอุปสรรค ด้วยเหตุนี้ รูปแบบการติดฉลากที่ได้รับจะสะท้อนการอย่างเผาผลาญของเซลล์ อย่างไรก็ตาม ตัวช่วยหลอมการนำเสนอที่นี่ ที่ได้รับระหว่างเรขา พิสูจน์ว่า การแสดงออกของ TCA สาขากล้าหาญทำงานเพื่อปรับปรุงอัตราการผลิตกรด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โดยใช้เครือข่าย compartmentalized นี้ฟลักซ์เซลล์ในการชนิดป่าและ 2103a-68 จะถูกคำนวณ.

กำหนดฟลักซ์เซลล์ในระหว่างขั้นตอนการผลิตที่เกิดขึ้นจริงสำหรับกรดมาลิกเป็นไปไม่ได้เนื่องจากข้อ จำกัด ทางเทคนิค.

GCMS ตามมาตรการการวิเคราะห์การไหลเพิ่มปริมาณการติดฉลากในอะมิโน . กรดซึ่งจะช่วยให้การหักของรูปแบบการติดฉลากของสารตั้งต้นกรดอะมิโนจากการเผาผลาญคาร์บอนกลางในการสั่งซื้อที่จะได้รับการประมาณการที่แม่นยำของฟลักซ์เซลล์

ในฐานะที่เป็นขั้นตอนการผลิตนี้มีเอกลักษณ์เฉพาะด้วยการอดอาหารไนโตรเจนสังเคราะห์เดอโนโวของกรดอะมิโนที่เป็นอุปสรรค; ดังนั้นรูปแบบการติดฉลากที่ได้มาจะไม่สะท้อนถึงการเผาผลาญของรัฐที่เกิดขึ้นจริงของเซลล์.

อย่างไรก็ตามฟลักซ์ที่นำเสนอนี้ซึ่งได้รับในระหว่างการเจริญเติบโตชี้แจงพิสูจน์ว่าแสดงออกของสาขา TCA ลดลงทำงานเพื่อปรับปรุงอัตราการผลิตมาลิกกรด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้ compartmentalized เครือข่ายภายในทั้งในประเภทป่าและ 2103a-68 ได้การต่อเซลล์ในระหว่างขั้นตอนการผลิตที่เกิดขึ้นจริงสำหรับกรดมาลิกไม่ได้เนื่องจากข้อ จำกัด ทางเทคนิคGCMS ใช้มาตรการติดฉลากเพื่อวิเคราะห์การไหลในกรดอะมิโน ซึ่งช่วยให้ลดการติดฉลากรูปแบบของกรดอะมิโนจากการเผาผลาญสารคาร์บอนกลาง เพื่อที่จะได้รับการประมาณการที่แม่นยำของการปลดปล่อย .ขั้นตอนการผลิตนี้เป็นลักษณะโดยการอดอาหารไนโตรเจน , เดอโนโวสังเคราะห์กรดอะมิโนจะถูกขัดขวาง ดังนั้น นำฉลากรูปแบบจะไม่สะท้อนถึงสถานะที่แท้จริงของการสลายเซลล์อย่างไรก็ตาม ทั้งนำเสนอที่นี่ซึ่งได้รับในระหว่างการเจริญเติบโต พิสูจน์ว่า overexpression ของสาขา TCA ซึ่งทำงานในการปรับปรุงอัตราการผลิตกรดมาลิก .