The aim of this study was to purify

The aim of this study was to purify and characterize the lipase produced by Burkholderia sp. EQ3, a bacterium isolated from the wastewater pond of a canned fish factory. The lipase was purified to homogeneity with a 70-fold increase in its activity by chilled acetone precipitation, Q-Sepharose Fast Flow and Sephadex G-50 column chromatography, respectively. The molecular mass of the purified lipase was 30.7 kDa. The purified lipase showed optimal activity at pH 7.0–7.5 and 30 °C. The enzyme was stable over the pH range of 5.0–8.0 and temperatures between 30 and 55 °C for 1 h. Its half-life was 2 h at 55 °C. The lipase activity was enhanced in the presence of Ca2+, Mg2+ and K+ while it was inactivated by Cu2+, Fe2+ and Zn2+. It hydrolyzed the natural triglycerides with its highest activity on coconut oil (120%), olive oil (101%) and palm olein (100%). Gum arabic (1%) significantly increased the lipase activity whereas 1.0 mM phenyl methyl sulphonyl fluoride strongly reduced the activity. The purified lipase EQ3 retained 80% activity in iso-propanol, but was inactivated by ethanol and iso-octane as well as other hydrophobic solvents. The lipase EQ3 was immobilized by adsorption with Accurel MP-100 and used for wax esters synthesis and compared with five commercial immobilized lipases (Lipozyme RM IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435, Lipase PS and Lipase AK). The transesterification reaction was carried out between coconut oil, palm olein and jatropha oil with oleyl alcohol by using 1 U of enzyme, a substrate molar ratio of oil and oleyl alcohol of 1:3 in hexane at 37 °C and 150 rpm for 72 h. The immobilized lipase EQ3 was most efficient in the synthesis of wax esters with 60.3, 49.6 and 50.1% wax esters from coconut oil, palm olein and jatropha oil, respectively. For the five commercial immobilized lipases, Lipozyme RM IM exhibited the highest wax esters synthesis with 49.2, 41.4 and 48.1% wax esters, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้ได้บริสุทธิ์ และลักษณะของเอนไซม์ไลเปสที่ผลิต โดย Burkholderia sp. EQ3 แบคทีเรียที่แยกต่างหากจากบ่อบำบัดน้ำเสียของโรงงานปลากระป๋อง เอนไซม์ไลเปสมีบริสุทธิ์เพื่อ homogeneity กับเพิ่ม 70-fold ในกิจกรรมของฝนเย็นอะซิโตน Q Sepharose ไหลเร็ว และ Sephadex G-50 คอลัมน์ chromatography ตามลำดับ มวลโมเลกุลของเอนไซม์ไลเปสที่บริสุทธิ์ถูก 30.7 kDa เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์พบว่ากิจกรรมที่เหมาะสมที่สุดที่ pH 7.0 – 7.5 และ 30 องศาเซลเซียส เอนไซม์นี้มีเสถียรภาพช่วง pH 5.0-8.0 และอุณหภูมิระหว่าง 30 และ 55 ° C สำหรับ 1 h ฮาล์ฟ-ไลฟ์มี h 2 ที่ 55 องศาเซลเซียส กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสที่ถูกเพิ่มในต่อหน้าของ Ca2 + Mg2 + และ K + ในขณะที่มันถูกยกเลิก โดย Cu2 + Fe2 + และ Zn2 + มัน hydrolyzed ระดับไตรกลีเซอไรด์ธรรมชาติ มีกิจกรรมสูงสุดของน้ำมันมะพร้าว (120%), น้ำมันมะกอก (101%) และปาล์มมา (100%) หมากฝรั่งอาหรับ (1%) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญกิจกรรมเอนไซม์ไลเปสขณะ 1.0 มม. phenyl methyl sulphonyl ฟลูออไรด์ขอลดกิจกรรม เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์ EQ3 สะสม 80% กิจกรรมใน iso อย่างไร propanol แต่ถูกยกเลิก โดยเอทานอล และ iso octane เป็นหรือสารทำละลายอื่น ๆ hydrophobic เอนไซม์ไลเปส EQ3 ถูกตรึง โดยการดูดซับกับ Accurel MP 100 และใช้ขี้ผึ้งสังเคราะห์ esters และเปรียบเทียบกับห้าค้าเอนไซม์ lipases (Lipozyme RM IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435, PS เอนไซม์ไลเปส และเอนไซม์ไลเปส AK) ทำปฏิกิริยาเพิ่มออกระหว่างน้ำมันมะพร้าว ปาล์มมาและสบู่ดำน้ำมันกับแอลกอฮอล์ oleyl โดย 1 U ของเอนไซม์ อัตราการสบพื้นผิวของน้ำมันและแอลกอฮอล์ oleyl ของเฮกเซนใน 1:3 ที่ 37 ° C และ 150 rpm สำหรับ 72 h เอนไซม์ไลเปสเอนไซม์ EQ3 มีประสิทธิภาพสูงสุดในการสร้างขี้ผึ้ง esters 60.3, 49.6 และ esters 50.1% ขี้ผึ้งจากน้ำมันมะพร้าว ปาล์มน้ำมันสบู่ดำและมา ตามลำดับ สำหรับห้าค้าเอนไซม์ lipases, Lipozyme RM IM จัดแสดงสูงสุดขี้ผึ้ง esters สังเคราะห์ 49.2, 41.4 และ 48.1 สา%ขี้ผึ้ง esters ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการชำระล้างและลักษณะของเอนไซม์ไลเปสที่ผลิตโดยเอสพี Burkholderia EQ3, แบคทีเรียที่แยกได้จากบ่อบำบัดน้ำเสียของโรงงานปลากระป๋อง ไลเปสบริสุทธิ์จะเป็นเนื้อเดียวกันกับการเพิ่มขึ้น 70 เท่าในกิจกรรมโดยการตกตะกอนอะซีโตนแช่เย็น Q-Sepharose ไหลเร็วและ Sephadex G-50 คอลัมน์ตามลำดับ มวลโมเลกุลของเอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์เป็น 30.7 กิโลดาลตัน ไลเปสแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมบริสุทธิ์ที่ดีที่สุดที่พีเอช 7.0-7.5 และ 30 องศาเซลเซียส เอนไซม์ที่มีเสถียรภาพในช่วงพีเอชของ 5.0-8.0 และอุณหภูมิระหว่าง 30 และ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ครึ่งชีวิตของมันคือ 2 ชั่วโมงที่ 55 องศาเซลเซียส กิจกรรมไลเปสได้ที่เพิ่มขึ้นในการปรากฏตัวของ Ca2 +, Mg2 + และ K + ในขณะที่มันถูกยกเลิกโดย Cu2 + Fe2 + และ Zn2 + มันไฮโดรไลซ์ไตรกลีเซอไรด์ธรรมชาติที่มีกิจกรรมมากที่สุดในวันที่น้ำมันมะพร้าว (120%) น้ำมันมะกอก (101%) และโอเลอินปาล์ม (100%) หมากฝรั่งภาษาอาหรับ (1%) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญกิจกรรมเอนไซม์ไลเปสในขณะที่ 1.0 มิลลิฟลูออไร sulphonyl เมธิลฟีนิลขอลดกิจกรรม EQ3 เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์สะสมกิจกรรม 80% ใน ISO โพรพาน แต่ถูกยกเลิกโดยเอทานอลและไอโซออกเทนเช่นเดียวกับตัวทำละลายน้ำอื่น ๆ EQ3 เอนไซม์ไลเปสที่ถูกตรึงโดยการดูดซับด้วย Accurel MP-100 และใช้สำหรับการสังเคราะห์เอสเทอขี้ผึ้งและเมื่อเทียบกับห้าไลเปสตรึงในเชิงพาณิชย์ (RM Lipozyme IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435 PS เอนไซม์ไลเปสและเอนไซม์ไลเปส AK) ปฏิกิริยา transesterification ได้ดำเนินการระหว่างน้ำมันมะพร้าวโอเลอินปาล์มและน้ำมันสบู่ดำกับเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ oleyl โดยใช้ 1 U เอนไซม์เป็นอัตราส่วนโดยโมลตั้งต้นของน้ำมันและแอลกอฮอล์ oleyl 1: 3 ในเฮกเซนที่ 37 ° C และ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง . EQ3 เอนไซม์ไลเปสตรึงเป็นมีประสิทธิภาพมากที่สุดในการสังเคราะห์ของเอสเทอขี้ผึ้งกับ 60.3, 49.6 และ 50.1% เอสเทอขี้ผึ้งจากน้ำมันมะพร้าวโอเลอินปาล์มและน้ำมันสบู่ดำตามลำดับ สำหรับห้าไลเปสตรึงเชิงพาณิชย์ Lipozyme RM IM จัดแสดงการสังเคราะห์เอสเทอขี้ผึ้งสูงสุด 49.2, 41.4 และ 48.1% เอสเทอขี้ผึ้งตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ การฟอก และลักษณะของเอนไซม์ที่ผลิตโดย Burkholderia sp . eq3 , แบคทีเรียที่แยกได้จากบ่อบำบัดน้ำเสียของโรงงานปลากระป๋อง เอนไซม์บริสุทธิ์ เพื่อรวมตัวกับ 70 พับเพิ่มกิจกรรมของร้านด้วยอะซิโตน รวดเร็วและ Sephadex G-50 ซึ่งไหล chromatography คอลัมน์ตามลำดับมวล โมเลกุลของโปรตีนหรือเอนไซม์เป็นกิโลดาลตัน เอนไซม์บริสุทธิ์มีกิจกรรมสูงสุดที่พีเอช 7.0 - 7.5 และ 30 ° C เอนไซม์มากกว่าระดับ pH 5.0 – 8.0 และอุณหภูมิระหว่าง 30 และ 55 องศา C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ของครึ่งชีวิต 2 H ที่ 55 องศา C ไลเปสมากขึ้นในการแสดงตนของแคลเซียม mg2 K , และในขณะที่มันซึ่งจาก fe2 CU2 zn2 , และ .มันย่อย triglycerides ธรรมชาติกับกิจกรรมสูงสุดของน้ำมันมะพร้าว ( 120% ) น้ำมันมะกอก ( 101 ) และน้ำมันปาล์ม ( 100% ) กัมอารบิก ( 1% ) เพิ่มขึ้นโดยไลเปสและฟีนิลเมทิลฟลูออไรด์ 1.0 มม. sulphonyl อย่างมากลดกิจกรรม เอนไซม์บริสุทธิ์ eq3 สะสมกิจกรรม 80% ในโพรพานอล ISO ,แต่ถูกยับยั้งโดยเอทานอลและออกเทน ISO รวมทั้งตัวทำละลาย ) อื่น ๆ เอนไซม์ eq3 ถูกตรึงโดยการดูดซับด้วย mp-100 สูงสุดและใช้ขี้ผึ้งและเอสเทอร์สังเคราะห์เมื่อเทียบกับห้าพาณิชย์ตรึงไลเปส ( lipozyme RM lipozyme TL อิม อิม novozyme 435 ไลเปส PS และไลเปส AK ) ปฏิกิริยาในกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นได้ดำเนินการระหว่างน้ำมันมะพร้าวปาล์มโอเลอินและน้ำมันสบู่ดำกับโอลีแอลกอฮอล์โดยใช้ 1 U ของเอนไซม์ การศึกษาอัตราส่วนของน้ำมันและโอลีแอลกอฮอล์ 1 : 3 ในเฮกเซนที่ 37 ° C และความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ไลเปส eq3 มีประสิทธิภาพที่สุดในการสังเคราะห์เอสเทอร์ด้วยสถิติขี้ผึ้ง , ขี้ผึ้งและ 49.6 50.1 % เอสเทอร์จากน้ำมันมะพร้าว น้ำมันปาล์มและน้ำมัน สบู่ดำ ตามลำดับ สำหรับห้าตรึงไลเปสทางการค้า ,lipozyme RM im มีขี้ผึ้งสังเคราะห์กับเอสเทอร์สูงสุด 49.2 , 41.4 และ 48.1 % ขี้ผึ้งเอสเทอร์ ตามลำดับ