Ganoderma lucidum was purchased locally, ground and refluxed with 500 mL 95% ethanol (1:20, w/v) for 3.5 h and repeated three times. The crude extract was filtered, evaporated and lyophilized for further fractionation. A flash column chromatography system (combiflash companion, Teledyne Isco, Inc., Lincoln, NE, USA) coupled with a reversed phase C18 column (43 g, 40–63 µm particle size) (RediSep Rf, Teledyne Isco, Inc., Lincoln, NE, USA) was employed for isolating triterpenoid enriched extracts. Gradient elution with a flow rate of 5 mL/min was applied to obtain four fractions. Fraction 1 was eluted with 35–61% ethanol, fraction 2 with 61–75% ethanol, fraction 3 with 75–100% ethanol and fraction 4 with 100% ethanol. Each fraction was concentrated under vacuum and lyophilized. The triterpenoid enriched fractions (fraction 2 and 3) described below were dissolved in culture media and passed through a 0.2 µm filter (Millex GP, Millipore, Billerica, MA, USA) for bioactive testing
ผสม lucidum ถูกซื้อพื้นภายใน และ refluxed ด้วยขนาด 500 มล. 95% เอทานอล (1:20, w/v) สำหรับ 3.5 h และซ้ำสามครั้ง สารสกัดหยาบกรอง ที่หายไป และ lyophilized สำหรับเพิ่มเติมแยกส่วน ระบบแฟลชคอลัมน์ chromatography (combiflash สหาย Teledyne Isco, Inc. ลินคอล์น NE สหรัฐอเมริกา) ควบคู่กับคอลัมน์ C18 กลับเฟส (43 กรัม ขนาดอนุภาค 40-63 µm) (RediSep Rf, Teledyne Isco, Inc. ลินคอล์น NE สหรัฐอเมริกา) ได้รับการว่าจ้างสำหรับแยกสารสกัด triterpenoid ที่อุดมไปด้วย Elution ไล่โทนสี ด้วยอัตราการไหลของ 5 mL/min ใช้ได้เศษ 4 เศษ 1 ได้ eluted 35-61% เอทานอล เศษ 2 กับ 61-75% เอทานอล เศษ 3 มี 75 – 100% เอทานอล และเศษ 4 กับเอทานอล 100% ทุกฝ่ายเข้มข้นภายใต้สุญญากาศ และ lyophilized ส่วนอุดมไป triterpenoid (เศษ 2 และ 3) อธิบายไว้ด้านล่างถูกละลายในวัฒนธรรมสื่อ และผ่านตัวกรอง 0.2 µm (Millex GP มาก Billerica, MA, USA) สำหรับการทดสอบกรรมการก
การแปล กรุณารอสักครู่..

เห็ดหลินจือถูกซื้อในพื้นที่พื้นดินและ refluxed 500 มิลลิลิตร 95% เอทานอล (1:20 w / v) เป็นเวลา 3.5 ชั่วโมงและทำซ้ำสามครั้ง สารสกัดถูกกรองและระเหยแห้งเพื่อแยกต่อไป ระบบแฟลชคอลัมน์ chromatography (เพื่อน combiflash, Teledyne Isco, Inc ลิงคอล์น, สหรัฐอเมริกา) ควบคู่ไปกับขั้นตอนการผันกลับคอลัมน์ C18 (43 กรัม 40-63 ไมโครเมตรขนาดอนุภาค) (RediSep Rf, Teledyne Isco, Inc ลิงคอล์น , เนบราส, สหรัฐอเมริกา) ได้รับการใช้สำหรับการแยกสารสกัดที่อุดมด้วย triterpenoid elution ไล่โทนสีที่มีอัตราการไหลจาก 5 มิลลิลิตร / นาทีถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้สี่เศษส่วน ส่วนที่ 1 ถูกชะด้วย 35-61% เอทานอลส่วนที่ 2 ที่มี 61-75% เอทานอลส่วนที่ 3 ด้วยเอทานอล 75-100% และส่วนที่ 4 100% เอทานอล แต่ละส่วนเป็นความเข้มข้นภายใต้สูญญากาศและแห้ง triterpenoid อุดมเศษส่วน (ส่วนที่ 2 และ 3) อธิบายไว้ด้านล่างถูกกลืนหายไปในสื่อวัฒนธรรมและผ่าน 0.2 ไมโครเมตรกรอง (Millex GP, ค, บริดจ์, สหรัฐอเมริกา) สำหรับการทดสอบการออกฤทธิ์ทางชีวภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..

เห็ดหลินจือกำลังซื้อในประเทศพื้นดินและ refluxed ด้วย 95% เอทานอล 500 มิลลิลิตร ( 1 : 20 W / V ) 3.5 ชั่วโมงและทำซ้ำ 3 ครั้ง สกัดถูกกรองและระเหยแห้งสำหรับการต่อไป ระบบแฟลชคอลัมน์โครมาโทกราฟี ( combiflash เพื่อน teledyne isco , อิงค์ , Lincoln , เน , USA ) คู่กับกลับเฟสคอลัมน์ C18 43 กรัม40 – 63 µ M ขนาดอนุภาค ) ( redisep RF teledyne isco , อิงค์ , Lincoln , เน , USA ) เป็นเครื่องมือในการแยกสารที่อุดมด้วยสารสกัด การไล่ระดับสี ( อัตราการไหล 5 มิลลิลิตรต่อนาทีถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้สี่เศษส่วน ส่วนที่ 1 คือตัวอย่าง 35 – 61 % เอทานอล สัดส่วน 2 กับ 61 – 75% เอทานอล สัดส่วน 3 75 –เอทานอล 100% และส่วนที่ 4 กับเอทานอล 100 %แต่ละส่วนก็เข้มข้นภายใต้สูญญากาศและแห้ง . ที่อุดมด้วยสารเศษส่วน ( ส่วน 2 และ 3 ) อธิบายไว้ด้านล่างถูกละลายในวัฒนธรรมสื่อและผ่านµ 0.2 M กรอง ( millex GP มิลลิ , โตเกียว , MA , USA )
ทดสอบสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..
