2. Materials and methods2.1. Prepar

2. Materials and methods

2.1. Preparation of Spirulina maxima extracts (SME)

Spirulina maxima (strain synonyms: UTEX LB2342), recently reclassified as Arthrospira maxima, was obtained from the culture collection of Texas University (Austin, TX). A single trichome was obtained by micropipetting and grown in sterile SOT medium for a clonal culture (Ogawa & Terui, 1970). Growth was under aeration of filtered ambient air (0.1 l/min) in an illuminated chamber at
32 C with a 12:12 light:dark. The light consisted of a photosyn- thetically active radiation irradiance of 3000 lux from cool-white fluorescent lights. The SME was prepared by water extraction of lyophilised Spirulina maxima pellets at 40 C for 8 h, and centrifu- gation at 3500 rpm for 5 min. The precipitate was discarded, and the supernatant lyophilised and used as SME in this study.

2.2. Animal model for type 1 diabetes

Male Wistar rats (6 weeks old) were purchased from Central Lab, Animal Inc. (Seoul, Korea). Rats were maintained under stan- dard conditions of temperature (23 ± 2 C) and humidity (50 ± 10%) with an alternating 12 h light/dark cycle. All rats were kept under specific pathogen-free conditions with free access to a standard commercial diet and were used for experiments at 6–
10 weeks of age. All experimental procedures were approved by the Eulji University Institutional Animal Care and Use Committee (permission number EUIACUC 10-02). Experimental animals were made diabetic with an intraperitoneal injection of STZ (Sigma, St. Louis, MO) dissolved in citrate buffer (0.1 M, pH 4.5), at a dose of
50 mg/kg body weight (bw). STZ-injected animals exhibited mas- sive glycosuria and hyperglycaemia within a few days. Diabetes was confirmed in 8 h-fasted rats by measuring blood glucose con- centration (Roche Diagnostics, Mannheim, Germany) at 72 h after STZ injection. Rats with blood glucose above 240 mg/dl were con- sidered to be diabetic and used for this study.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเตรียมสารสกัดสาหร่ายเกลียวทองแมก (SME)สาหร่ายเกลียวทองแมก (สายพันธุ์คำเหมือน: UTEX LB2342), เพิ่ง reclassified เป็นแมก Arthrospira ได้รับจากการรวบรวมวัฒนธรรมของมหาวิทยาลัยเท็กซัส (Austin, TX) Trichome เดียวได้รับ โดย micropipetting และเติบโตในกอซแม่สอดปานกลางวัฒนธรรม clonal (โอะงะวะและ Terui, 1970) เจริญเติบโตอยู่ใต้ aeration filtered สภาวะอากาศ (0.1 l/min) ในห้องที่สว่างที่C 32 กับ 12:12: มืดแสง แสงประกอบด้วยการ photosyn - thetically งานรังสี irradiance ของ 3000 ลักซ์จากไฟเย็นสีขาว fluorescent SME ถูกจัดเตรียม โดยน้ำสกัดอัดเม็ดสาหร่ายเกลียวทองแมก lyophilised ที่ 40 C สำหรับ 8 h และ gation centrifu ที่ 3500 rpm สำหรับ 5 นาที Precipitate ถูกละทิ้ง และ supernatant ที่ lyophilised และใช้ในการศึกษานี้เป็น SME2.2. รูปที่สัตว์สำหรับเบาหวานชนิด 1หนู Wistar เพศชาย (6 สัปดาห์) ถูกซื้อจากเซ็นทรัลแล็บ Inc. สัตว์ (โซล เกาหลี) หนูถูกเก็บรักษาภายใต้เงื่อนไขอุณหภูมิ (23 ± 2 C) และความชื้น (50 ± 10%) กับเป็นวงจรไฟ/มืด 12 h สลับสแตน dard หนูทั้งหมดก็ยังคงอยู่ภายใต้เงื่อนไขการศึกษาฟรี specific ฟรีอาหารพาณิชย์มาตรฐาน และใช้สำหรับการทดลองที่ 6 –อายุ 10 สัปดาห์ ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดได้รับการอนุมัติ โดย Eulji มหาวิทยาลัยสถาบันสัตว์ดูแลและใช้กรรมการ (สิทธิ์หมายเลข EUIACUC 10-02) สัตว์ทดลองเกิดโรคเบาหวานกับฉีด intraperitoneal ของ STZ (ซิก St. Louis, MO) ละลายในซิเตรตบัฟเฟอร์ (0.1 M, pH 4.5), ที่ปริมาณของ50 มิลลิกรัม/กิโลกรัมน้ำหนักตัว (bw) ฉีด STZ สัตว์จัดแสดง glycosuria sive มาสและ hyperglycaemia ภายในกี่วัน โรคเบาหวานถูก confirmed ในหนูอด h 8 โดยการวัดเลือดน้ำตาลในคอน-centration (วินิจฉัยโร มา เยอรมนี) ที่ 72 h หลังฉีด STZ หนู มีน้ำตาลในเลือดสูงกว่า 240 mg/dl มีคอน sidered โรคเบาหวาน และใช้ในการศึกษานี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเตรียมสารสกัดจากสาหร่ายเกลียวทองสูงสุด (SME) สูงสุดสาหร่ายเกลียวทอง (คำพ้องสายพันธุ์: UTEX LB2342) เมื่อเร็ว ๆ นี้สาย reclassi เอ็ดเป็น arthrospira สูงสุด, ได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมของมหาวิทยาลัยเท็กซัส (ออสติน, เท็กซัส) trichome เดียวที่ได้รับจาก micropipetting และเติบโตในระดับปานกลาง SOT ผ่านการฆ่าเชื้อสำหรับวัฒนธรรม clonal (โอกาวาและ Terui, 1970) การเจริญเติบโตอยู่ภายใต้การเติมอากาศของสาย ltered อากาศโดยรอบ (0.1 ลิตร / นาที) ในห้องสว่างในเวลา32 C กับ 0:12 แสง: ที่มืด แสงประกอบด้วย photosyn- รังสีรังสีที่ใช้งาน thetically 3000 ลักซ์จากไฟ uorescent ชั้นเย็นสีขาว ในกลุ่ม SME ได้รับการจัดทำขึ้นโดยการสกัดน้ำของ lyophilised เม็ดสาหร่ายเกลียวทองสูงสุดที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 ชั่วโมงและ gation centrifu- ที่ 3500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที ตะกอนที่ถูกทิ้งและใส lyophilised และใช้เป็น SME ในการศึกษานี้. 2.2 รูปแบบสัตว์สำหรับผู้ป่วยโรคเบาหวานชนิดที่ 1 หนูชายวิสตาร์ (6 สัปดาห์) ที่ซื้อมาจากเซ็นทรัลแล็บ, สัตว์อิงค์ (กรุงโซลประเทศเกาหลี) หนูได้รับการดูแลภายใต้เงื่อนไขดาดลี้อุณหภูมิ (23 ± 2 C) และความชื้น (50 ± 10%) ที่มีการสลับแสง 12 ชั่วโมง / รอบที่มืด หนูทั้งหมดถูกเก็บไว้ภายใต้สายคสภาพปลอดเชื้อ speci มีอิสระที่จะเข้าถึงอาหารในเชิงพาณิชย์ได้มาตรฐานและถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองที่ 6 10 สัปดาห์ของอายุ ทุกขั้นตอนการทดลองได้รับการอนุมัติจากมหาวิทยาลัย Eulji สถาบันดูแลสัตว์และการใช้คณะกรรมการ (ได้รับอนุญาตจำนวน EUIACUC 10-02) สัตว์ทดลองที่ถูกสร้างขึ้นเป็นโรคเบาหวานด้วยการฉีดเข้าช่องท้องของ STZ (Sigma, เซนต์หลุยส์) ละลายในบัฟเฟอร์ซิเตรต (0.1 M ค่า pH 4.5) ขนาดของ50 มิลลิกรัม / กิโลกรัมน้ำหนักตัว (bw) สัตว์ STZ-ฉีดแสดง glycosuria sive mas- hyperglycaemia และภายในไม่กี่วัน ผู้ป่วยโรคเบาหวานที่ถูกไฟนักโทษ rmed 8 ชั่วโมงหนู-Fasted โดยการวัด centration อย่างต่อระดับน้ำตาลในเลือด (วินิจฉัยโรชไฮม์, เยอรมนี) ที่ 72 ชั่วโมงหลังจากการฉีด STZ หนูกับเหนือระดับน้ำตาลในเลือด 240 มิลลิกรัม / เดซิลิตรถูกจึงดูเสมือนว่าจะเป็นโรคเบาหวานและใช้สำหรับการศึกษาครั้งนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . การเตรียมสารสกัดจากสาหร่าย Spirulina Maxima ( SME )

( สายพันธุ์ Maxima คำพ้องความหมาย : utex lb2342 ) เมื่อเร็ว ๆ นี้ reclassi จึงเอ็ดเป็น Arseny1992 Maxima , ที่ได้รับจากวัฒนธรรมของคอลเลกชันเท็กซัสมหาวิทยาลัย ( TX Austin ) เป็นรูปร่างเดียวได้โดย micropipetting ปลูกกลางแม่สอดผ่านวัฒนธรรมรูปแบบ ( โอกา& terui , 1970 )การถ่ายทอด ltered ภายใต้อากาศของบรรยากาศ ( 0.1 ลิตร / นาที ) เป็นห้องที่สว่าง
32 C กับ 12 : 12 แสงมืด แสงที่ใช้ในงานรังสี photosyn - thetically ดังกล่าว 3 , 000 ลักซ์ จากเย็นflสีขาว uorescent ไฟ ทีเตรียมได้จากการสกัดน้ำ lyophilised Spirulina Maxima เม็ดที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 ชั่วโมง และ centrifu - gation ที่ 3500 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาทีที่ถูกทิ้ง และนำ lyophilised และใช้เป็น SME ในการศึกษา .

. . สัตว์โมเดลสำหรับเบาหวานชนิดที่ 1

หนูพันธุ์วิสตาร์เพศผู้ ( 6 สัปดาห์ ) ซื้อมาจากเซ็นทรัลแล็ป สัตว์ อิงค์ ( โซล เกาหลี ) หนูอยู่ดูแลภายใต้เงื่อนไขของอุณหภูมิ ( Stan dard 23 ± 2 C ) และความชื้น ( 50 ± 10% ) พร้อมสลับ 12 H แสง / มืดรอบหนูทุกตัวถูกเก็บไว้ภายใต้กาจึง C เชื้อโรคฟรีเงื่อนไขกับการเข้าถึงฟรีเพื่อมาตรฐานการค้าอาหาร และใช้ในการทดลองที่ 6 –
10 สัปดาห์ของอายุ ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการ eulji มหาวิทยาลัยสถาบันและดูแลสัตว์ ( ขออนุญาตใช้หมายเลข euiacuc 10-02 ) สัตว์ทดลองเป็นเบาหวานด้วยการฉีดเข้าช่องท้องของเบาหวาน ( Sigma , เซนต์Louis , MO ) ละลายใน ซิเตรทบัฟเฟอร์ ( 0.1 โมลาร์ pH 4.5 ) , ยาใน
50 มิลลิกรัมต่อน้ำหนักตัว 1 กิโลกรัม ( BW ) เบาหวานฉีดสัตว์มีแมส - sive hyperglycaemia การส่งเสียงอึกทึก และภายในไม่กี่วัน โรคเบาหวานคือคอน จึง rmed 8 h-fasted หนูโดยการวัดระดับน้ำตาลในเลือด คอน - centration ( โรชวินิจฉัย Mannheim , เยอรมัน ) ที่เวลา 72 ชั่วโมงหลังจากต่อการฉีดหนูมีกลูโคสในเลือดสูงกว่า 240 มก. / ดล. เป็น con - sidered เป็นเบาหวานและใช้สำหรับการศึกษานี้

.