2.7. Desorption studiesVarious orga

2.7. Desorption studies
Various organic solvents such as acetone, methanol, chloroform
and butanol were screened initially for the dye desorption. The
solvent finally used for dye desorption studies was 50% methanol.
The use ofmethanol for dye desorption studies is reported previously
(Robinson et al., 2002). A solvent volume of 20 ml was added to the
2 g of dried cell mass (flask studies) as well as 2 g of immobilized
beads (column studies) obtained after decolorization assay. Beads
from the control (abiotic) column were also used for desorption
studies to analyze whether supportive material has any role in the
dye sorption. After addition of the solvents contents were shaken
vigorously and left for 12 h, followed by filtration and then evaporation
at 50
C for 1 h. The remaining dye solution (in water) after
evaporation was adjusted to 5 ml with distilled water and concentration
of dye desorbed was analyzed spectrophotometrically.
2.8. Preparation of cell free extract
The cell free extracts were prepared as reported earlier (Jadhav
and Govindwar, 2006). Briefly YB and SC were homogenized with
fine sand in 1 ml 50 mM phosphate buffer (pH 7.4) using a mortar
and pestle, centrifuged and the supernatant was used for testing
lignin peroxidase and azo reductase activity in both, the control and
the cells obtained after decolorization. Whereas 500 mg cells of
both YB and SC were suspended in 5 ml, 50 mM phosphate buffer
chilled properly and sonicated keeping sonifier output at 60 A,
giving three strokes each of 30 s, at 2 min intervals, at 4
C. The cell
suspension was used for the assay of NADHeDCIP (Dichlorophenol
indophenol) reductase.
2.9. Enzymatic assays
Lignin peroxidase activity was measured by the procedure
reported earlier (Jadhav and Govindwar, 2006). NADHeDCIP
reductase activity was determined by using the procedure reported
earlier (Salokhe and Govindwar, 1999). The assay mixture contained
50 mM DCIP, 28.57 mM NADH in 50 mM potassium phosphate
buffer (pH 7.4) and 0.1 ml of enzyme solution (sonicated cells
suspension) in a total volume of 5.0 ml. The DCIP reduction was
calculated using the extinction coefficient of 19 mM1 cm1.
Azo reductase assay was performed in a reaction mixture (2 ml)
containing 4.45 mM methyl red, 100 mM NADH in 50 mM potassium
phosphate buffer at (pH 7.4). Enzyme activity was calculated by
using molar extinction coefficient of Methyl red (23,360 M1 cm1)
(Dhanve et al., 2009).
2.10. Analytical studies
The metabolites produced after decolorization of effluent were
extracted with an equal volume of ethyl acetate. The extract was
dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness in
a rotary evaporator. The residue obtained was dissolved in small
volumes of HPLC grademethanol, and the same samplewas used for
TLC, FTIR and HPLC analysis. TLC analysiswas performed by using the
solvent system methanol: n-propanol: ethyl acetate: water: acetic
acid (1:3:2:0.2:1). FTIR analysis of the control effluent and its
biodegradation product was carried out using Shimadzu 8400S
spectrophotometer in the mid-infrared region of 400e4000 cm1
with 16-scan speed. HPLC analysis was performed in an isocratic
Waters 2690 system equipped with dual absorbance detector, using
C18 column (4.6  250 mm) and HPLC grade methanol as mobile
phase with flow rate 1 ml min1. A flame atomic absorption spectrometer
(PerkineElmer model 300), with a deuterium lamp for
background correction was used for measurements of metal
concentration in the effluent. For atomization, an aireacetylene
flamewas used throughout, operated in a single slot having titanium
burner with a removable head. The wavelengths and spectral band
pass were, for Cu: 324.8 nm (0.5 nm), Ni: 232.0 nm (0.1 nm), Pb:
217.0nm(0.5nm), and Zn: 213.9nm(0.5nm). The nebulizer flow rate
was 5.0 ml min1. Scanning electron microscopic analysis was performed
with JEOL JSM-6360 (Japan). The use of experimental techniques
like TLC, HPLC, FTIR for monitoring the biodegradation
process has been well documented (Jadhav and Govindwar, 2006;
Jadhav et al., 2007; Dhanve et al., 2009).
2.11. Toxicity study
2.11.1. Cytotoxicity and genotoxicity analysis
Cytotoxicity and genotoxicity studies were performed by the
method reported earlier (Jadhav et al., 2010). Locally obtained
onion bulbs of Allium cepa (diameter, 15e20 mm; weight, 5e10 g)
were properly washed in the running tap water. Before use, the
loose outer scales were removed and the dry bases were scraped to
expose the root primordial at different concentrations (25, 50, 75
and 100%) obtained by diluting the raw effluent and YB treated
effluent with distilled water.
2.11.2. Comet assay (single cell gel electrophoresis)
The method used for Comet assay was carried out as described
earlier (Achary et al., 2008). For each slide, 25 randomly chosen
nuclei were analyzed using inverted microscope. A computerized
image analysis system (Comet version 1.5) was employed to
measure % DNA damage (% T) and tail length (TL).
2.11.3. Phytotoxicity
The phytotoxicity studies were carried out at room temperature
using Phaseolus mungo and Triticum aestivum seeds (10 seeds each)
followed by watering separately with 5 ml sample of effluent and
5 ml of its degradation metabolites per day. The degradation
metabolites were collected using previously quoted protocol (Patil
et al., 2008). Control sets were also kept by usingwater. The present
study investigates the toxic effect of dye effluent and its metabolites
on the growth and percentage germination of P. mungo and
T. aestivum seeds.
2.12. Statistical analysis
Data were analyzed by one-way analysis of variance (ANOVA)
with the TukeyeKramer multiple comparisons test.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การ desorption ศึกษาต่าง ๆ หรือสารทำละลายอินทรีย์เช่นคลอโรฟอร์ม เมทานอล อะซิโตนและบิวทานอถูกฉายครั้งแรกสำหรับการ desorption ย้อม ที่สุดท้าย ใช้ย้อม desorption ศึกษาตัวทำละลายเมทานอล 50% ได้Ofmethanol ใช้สำหรับย้อม desorption ศึกษารายงานก่อนหน้านี้(โรบินสันและ al., 2002) มีเพิ่มปริมาตรตัวทำละลายของมล. 202 กรัมของมวลเซลล์แห้ง (หนาวศึกษา) เป็น g 2 ของหาลูกปัด (คอลัมน์ศึกษา) ได้รับหลังจากวิเคราะห์บำบัด ลูกปัดจากคอลัมน์ (abiotic) ควบคุมยังใช้สำหรับการ desorptionศึกษาวิเคราะห์ว่าวัสดุสนับสนุนมีบทบาทใด ๆ ในการดูดสีย้อม หลังจากเพิ่มหรือสารทำละลายเนื้อหาถูกเขย่าโยคะ และซ้ายสำหรับ 12 h ตาม ด้วยน้ำ แล้วระเหยที่ 50 C สำหรับ 1 h แก้ปัญหาย้อมที่เหลือ (ในน้ำ) หลังจากระเหยปรับปรุง 5 ml ด้วยน้ำกลั่นและเข้มข้นของสีย้อม desorbed ถูกวิเคราะห์ spectrophotometrically2.8 การสารสกัดจากเตรียมเซลล์ฟรีเซลล์สารสกัดจากฟรีได้จัดทำเป็นรายงานก่อนหน้า (Jadhavและ Govindwar, 2006) สั้น ๆ YB และ SC มี homogenized เป็นกลุ่มด้วยปรับทรายใน 1 ml 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.4) ใช้ครกและ pestle, centrifuged supernatant ถูกใช้สำหรับการทดสอบlignin peroxidase และ azo reductase กิจกรรมทั้ง ตัวควบคุม และเซลล์ที่ได้รับหลังจากการบำบัด ในขณะที่เซลล์ 500 มิลลิกรัมYB และ SC ถูกหยุดชั่วคราวใน 5 ml บัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มม.chilled properly and sonicated keeping sonifier output at 60 A,giving three strokes each of 30 s, at 2 min intervals, at 4
C. The cellsuspension was used for the assay of NADHeDCIP (Dichlorophenolindophenol) reductase.2.9. Enzymatic assaysLignin peroxidase activity was measured by the procedurereported earlier (Jadhav and Govindwar, 2006). NADHeDCIPreductase activity was determined by using the procedure reportedearlier (Salokhe and Govindwar, 1999). The assay mixture contained50 mM DCIP, 28.57 mM NADH in 50 mM potassium phosphatebuffer (pH 7.4) and 0.1 ml of enzyme solution (sonicated cellssuspension) in a total volume of 5.0 ml. The DCIP reduction wascalculated using the extinction coefficient of 19 mM1 cm1.Azo reductase assay was performed in a reaction mixture (2 ml)containing 4.45 mM methyl red, 100 mM NADH in 50 mM potassiumphosphate buffer at (pH 7.4). Enzyme activity was calculated byusing molar extinction coefficient of Methyl red (23,360 M1 cm1)(Dhanve et al., 2009).2.10. Analytical studiesThe metabolites produced after decolorization of effluent wereextracted with an equal volume of ethyl acetate. The extract wasdried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness ina rotary evaporator. The residue obtained was dissolved in smallvolumes of HPLC grademethanol, and the same samplewas used forTLC, FTIR and HPLC analysis. TLC analysiswas performed by using theระบบตัวทำละลายเมทานอล: n อย่างไร propanol: เอทิล acetate: น้ำ: อะซิติกกรด (1:3:2:0.2:1) วิเคราะห์ FTIR ของน้ำการควบคุมและผลิตภัณฑ์ biodegradation ทำออกใช้ Shimadzu 8400Sเครื่องทดสอบกรดด่างในแคว้นอินฟราเรดกลาง 400e4000 ซม. 1ความเร็วการสแกน 16 ทำการวิเคราะห์ HPLC ใน isocratic คิดเป็นระบบน้ำ 2690 พร้อมจับคู่ absorbance ใช้คอลัมน์ C18 (4.6 250 mm) และ HPLC เกรดเมทานอลเป็นมือถือขั้นตอนการไหลอัตรา 1 ml นาที 1 สเปกโตรมิเตอร์ในการดูดกลืนโดยอะตอมเปลวไฟ(PerkineElmer รุ่น 300), มีหลอดดิวเทอเรียมในการแก้ไขพื้นหลังถูกใช้สำหรับการประเมินของโลหะความเข้มข้นในน้ำ สำหรับแยกเป็นอะตอม aireacetylene การflamewas ที่ใช้ตลอด ดำเนินการในช่องเดียวมีไทเทเนียมเตาหัวถอด ความยาวคลื่นและสเปกตรัมวงผ่านได้ สำหรับ Cu: 324.8 nm (0.5 nm), Ni: 232.0 nm (0.1 nm), Pb:217.0nm(0.5nm) และ Zn: 213.9nm(0.5nm) อัตราการไหลของฝอยละอองต่ำสุด 5.0 ml 1 ได้ การสแกนการวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนได้ดำเนินการมี JEOL JSM-6360 (ญี่ปุ่น) การใช้เทคนิคการทดลองเช่น TLC, HPLC, FTIR biodegradation ที่ตรวจสอบกระบวนการได้ดีเอกสาร (Jadhav และ Govindwar, 2006Jadhav et al., 2007 Dhanve et al., 2009)2.11 ศึกษา toxicity2.11.1 วิเคราะห์ cytotoxicity และ genotoxicityดำเนินการศึกษา cytotoxicity และ genotoxicity โดยวิธีรายงานก่อนหน้า (Jadhav et al., 2010) ในท้องถิ่นได้รับหลอดหอมของต้น cepa (เส้นผ่าศูนย์กลาง 15e20 มิลลิเมตร น้ำหนัก 5e10 กรัม)มีเครื่องซักผ้าในน้ำประปาทำงานอย่างถูกต้อง ก่อนการใช้ การระดับภายนอกออก และฐานแห้งถูกขูดจะหลวมแสดงราก primordial ที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน (25, 50, 75และ 100%) รับ โดย diluting น้ำดิบและจัด YBน้ำกลั่นน้ำ2.11.2. ดาวหางทดสอบ (เซลล์เดียวเจ electrophoresis)วิธีการที่ใช้สำหรับวิเคราะห์ดาวหางถูกดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Achary et al., 2008) สำหรับแต่ละภาพนิ่ง 25 แบบสุ่มเลือกแอลฟาถูกวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์หัวกลับ เป็นคอมพิวเตอร์ระบบวิเคราะห์ภาพ (ดาวหางรุ่น 1.5) ถูกจ้างไปวัด%ความเสียหาย DNA (% T) และหางยาว (TL)2.11.3 phytotoxicityศึกษา phytotoxicity ได้ดำเนินการที่อุณหภูมิห้องใช้ชาติมังโก้เขียวและเมล็ด aestivum Triticum (10 เมล็ดแต่ละ)ตาม ด้วยน้ำแยกต่างหากกับตัวอย่าง 5 ml ของน้ำ และml 5 ของ metabolites สลายตัวต่อวัน การย่อยสลายmetabolites ถูกเก็บรวบรวมโดยใช้โพรโทคอลเสนอราคาไว้ก่อนหน้านี้ (ภาร้อยเอ็ด al., 2008) นอกจากนี้ยังได้รับการเก็บชุดควบคุม โดย usingwater ปัจจุบันศึกษาตรวจสอบผลพิษของน้ำย้อมและ metabolites ของในการงอกการเจริญเติบโตและเปอร์เซ็นต์ของชาติมังโก้ P. และต. aestivum เมล็ด2.12. สถิติวิเคราะห์มีวิเคราะห์ข้อมูล โดยการวิเคราะห์แบบทางเดียวของต่าง (การวิเคราะห์ความแปรปรวน)มี TukeyeKramer เปรียบเทียบหลายทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 การศึกษาคายตัวทำละลายอินทรีย์ต่างๆเช่นอะซีโตนเมทานอลคลอโรฟอร์มและบิวทานอถูกคัดกรองครั้งแรกสำหรับการคายสีย้อม ตัวทำละลายที่ใช้สำหรับการศึกษาในที่สุดก็คายย้อมเป็นเมทานอล 50%. ofmethanol ใช้สำหรับการศึกษาคายย้อมมีรายงานก่อนหน้านี้(โรบินสัน et al., 2002) ปริมาณตัวทำละลาย 20 มล. เพิ่มขึ้น2 กรัมของมวลเซลล์แห้ง (การศึกษาขวด) เช่นเดียวกับ 2 กรัมตรึงลูกปัด(คอลัมน์การศึกษา) ได้รับหลังจากการทดสอบลดสี ลูกปัดจากควบคุม (abiotic) คอลัมน์ยังถูกนำมาใช้สำหรับการคายการศึกษาเพื่อวิเคราะห์ว่าวัสดุที่มีบทบาทในการสนับสนุนใดๆ ในการดูดซับสีย้อม หลังจากที่นอกเหนือจากเนื้อหาตัวทำละลายที่ถูกเขย่าอย่างแรงและปล่อยทิ้งให้ 12 ชั่วโมงตามด้วยการกรองแล้วระเหยที่50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาสีย้อมที่เหลือ (ในน้ำ) หลังจากระเหยปรับถึง5 มล. ด้วยน้ำกลั่นและความเข้มข้นของสีย้อมหลุดออกมาวิเคราะห์spectrophotometrically. 2.8 การเตรียมสารสกัดจากเซลล์ฟรีสารสกัดมือถือฟรีได้จัดทำรายงานก่อนหน้านี้ (Jadhav และ Govindwar 2006) สั้น ๆ YB และ SC ถูกปั่นด้วยทรายละเอียด1 มล. 50 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.4) โดยใช้ครกและสากปั่นและสารละลายที่ใช้สำหรับการทดสอบเปอร์ออกซิลิกนินและกิจกรรมreductase azo ทั้งในการควบคุมและเซลล์ที่ได้รับหลังจากที่ลดสี ในขณะที่เซลล์ 500 mg ของทั้งYB และ SC ถูกระงับใน 5 มล., 50 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์แช่เย็นอย่างถูกต้องและการเก็บรักษาผลผลิตsonicated sonifier ที่ 60 A, ให้สามจังหวะแต่ละ 30 วินาทีในช่วงเวลา 2 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส เซลล์ระงับใช้สำหรับการทดสอบของ NADHeDCIP (Dichlorophenol indophenol) reductase. 2.9 การตรวจเอนไซม์กิจกรรม peroxidase ลิกนินโดยวัดจากขั้นตอนการรายงานก่อนหน้านี้(Jadhav และ Govindwar 2006) NADHeDCIP กิจกรรม reductase ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการรายงานก่อนหน้านี้(Salokhe และ Govindwar, 1999) ส่วนผสมที่ทดสอบมี50 มิลลิ DCIP, 28.57 มิลลิ NADH ใน 50 มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.4) และ 0.1 มล. ของการแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์ (เซลล์ sonicated Suspension) ในปริมาณรวม 5.0 มล. การลด DCIP ถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ19 มิลลิ 1 ซม.? 1. ทดสอบ reductase Azo ได้ดำเนินการในผสมปฏิกิริยา (2 มล.) มี 4.45 มิลลิเมธิลสีแดง 100 มิลลิ NADH ใน 50 มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่(pH 7.4 ) กิจกรรมของเอนไซม์ที่คำนวณได้จากการใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกรามของสีแดง Methyl (23,360 M? 1 ซม? 1) (Dhanve et al., 2009). 2.10 การศึกษาวิเคราะห์สารที่ผลิตหลังจากลดสีของน้ำทิ้งถูกสกัดด้วยปริมาณที่เท่ากันของเอทิลอะซีเต สารสกัดถูกแห้งมากกว่าโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ำและระเหยแห้งในเครื่องระเหยแบบหมุน ที่เหลือได้ถูกละลายในขนาดเล็กปริมาณ HPLC grademethanol และ samplewas เดียวกันที่ใช้สำหรับการเอาใจใส่FTIR และการวิเคราะห์ HPLC TLC analysiswas ดำเนินการโดยใช้เมทานอลระบบตัวทำละลาย: n โพรพาน: เอทิลอะซิเต: น้ำอะซิติกกรด(1: 3: 2: 0.2: 1) การวิเคราะห์ FTIR ของน้ำเสียและการควบคุมของผลิตภัณฑ์ย่อยสลายทางชีวภาพได้รับการดำเนินการโดยใช้Shimadzu 8400S spectrophotometer ในภูมิภาคกลางอินฟราเรด 400e4000 ซม. 1 ด้วยความเร็ว 16 สแกน การวิเคราะห์ HPLC ได้ดำเนินการใน isocratic น้ำ 2690 ระบบการติดตั้งเครื่องตรวจจับการดูดกลืนแสงคู่โดยใช้คอลัมน์C18 (4.6? 250 มิลลิเมตร) และเมทานอลเกรด HPLC มือถือเป็นขั้นตอนที่มีอัตราการไหล1 มิลลิลิตรนาที 1 สเปกโตรมิเตอร์ไฟดูดซึมอะตอม(PerkineElmer รุ่น 300) กับโคมไฟไฮโดรเจนสำหรับการแก้ไขพื้นหลังถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจวัดของโลหะเข้มข้นในน้ำทิ้ง สำหรับละอองเป็น aireacetylene flamewas ใช้ตลอดทั้งดำเนินการในช่องเดียวที่มีไทเทเนียมเตาที่มีหัวที่ถอดออกได้ และวงความยาวคลื่นสเปกตรัมผ่านได้สำหรับ Cu: 324.8 นาโนเมตร (0.5 นาโนเมตร), Ni: 232.0 นาโนเมตร (0.1 นาโนเมตร) Pb: 217.0nm (0.5nm) และ Zn: 213.9nm (0.5nm) อัตราการไหล nebulizer เป็น 5.0 มลนาที 1 อิเล็กตรอนแบบส่องกราดวิเคราะห์กล้องจุลทรรศน์ได้ดำเนินการกับ JEOL JSM-6360 (ญี่ปุ่น) การใช้เทคนิคการทดลองเช่น TLC, HPLC, FTIR สำหรับการตรวจสอบย่อยสลายทางชีวภาพกระบวนการได้รับเอกสารอย่างดี(Jadhav และ Govindwar 2006; Jadhav et al, 2007;. Dhanve et al, 2009).. 2.11 การศึกษาความเป็นพิษ2.11.1 เป็นพิษและการวิเคราะห์พันธุกรรมเป็นพิษและการศึกษาพันธุกรรมได้ดำเนินการโดยวิธีการรายงานก่อนหน้านี้(Jadhav et al., 2010) หาได้ในท้องถิ่นหลอดหอมของ Allium cepa (เส้นผ่าศูนย์กลาง 15e20 มมน้ำหนัก 5e10 ช) ถูกล้างอย่างถูกต้องในการทำงานน้ำประปา ก่อนที่จะใช้งานเครื่องชั่งนอกหลวมถูกถอดออกและฐานแห้งถูกคัดลอกไปสัมผัสแรกรากที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน(25, 50, 75 และ 100%) ที่ได้จากการเจือจางน้ำเสียดิบและ YB รับการรักษาน้ำทิ้งด้วยน้ำกลั่น. 2.11.2 . ทดสอบดาวหาง (เซลล์ข่าวคราวเดี่ยว) วิธีการที่ใช้ในการทดสอบดาวหางได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Achary et al., 2008) สำหรับแต่ละภาพนิ่ง 25 สุ่มเลือกนิวเคลียสถูกวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์คว่ำ คอมพิวเตอร์ระบบการวิเคราะห์ภาพ (ดาวหางรุ่น 1.5) ถูกจ้างมาเพื่อวัดความเสียหายของดีเอ็นเอ% (% T) และระยะเวลาในหาง (TL). 2.11.3 พิษการศึกษาพิษได้ดำเนินการที่อุณหภูมิห้องโดยใช้Mungo Phaseolus และ Triticum aestivum เมล็ด (10 เมล็ดแต่ละคน) ตามด้วยการรดน้ำแยก 5 มล. ตัวอย่างน้ำทิ้งและ5 มล. การย่อยสลายของสารต่อวัน การย่อยสลายสารที่ถูกเก็บรวบรวมโดยใช้โปรโตคอลที่ยกมาก่อนหน้านี้ (Patil et al., 2008) ชุดควบคุมยังถูกเก็บไว้โดย usingwater ปัจจุบันการศึกษาสำรวจผลกระทบที่เป็นพิษของน้ำทิ้งสีย้อมและสารที่เกี่ยวกับการเจริญเติบโตและการงอกร้อยละของMungo พีและที เมล็ด aestivum. 2.12 การวิเคราะห์ทางสถิติวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้การวิเคราะห์ทางเดียวความแปรปรวน (ANOVA) กับ TukeyeKramer หลายการทดสอบเปรียบเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . การคายตัวทำละลายอินทรีย์ต่างๆเช่นการศึกษา
อะซิโตน เมทานอลคลอโรฟอร์ม
บิวทานอลจากและเริ่มต้น สีย้อมดูดซับ
ละลายก็ใช้สำหรับย้อมมีผลต่อการศึกษา 50% เมทานอล
ofmethanol ใช้ย้อมมีผลต่อการศึกษาก่อนหน้านี้รายงาน
( โรบินสัน et al . , 2002 ) ปริมาณ 20 ml . เติม
1 กรัมของมวลเซลล์แห้ง ( ในการศึกษา ) รวมทั้ง 2 กรัมต่อ
ลูกปัด ( ศึกษาคอลัมน์ ) หลังจากได้รับการ ตามลำดับ ลูกปัด
จากการควบคุม ( สิ่งมีชีวิต ) คอลัมน์ยังสามารถใช้ศึกษาเพื่อวิเคราะห์ว่าวัสดุสนับสนุน

มีบทบาทในการดูดซับสีย้อม . หลังจากเพิ่มของตัวทำละลายเนื้อหาสั่นสะเทือน
อย่างแข็งขัน และทิ้งไว้เป็นเวลา 12 ชั่วโมงตามด้วยกรองและระเหย

ที่ 50 องศาเซลเซียสนาน 1 ชั่วโมงเหลือสารละลายสีย้อม ( ในน้ำ ) หลังจาก
การระเหยคือปรับ 5 ml ด้วยน้ำกลั่นและความเข้มข้นของสีย้อมศึกษาวิเคราะห์นี้
.
2.8 . การเตรียมสารสกัดเซลล์ฟรี
มือถือฟรีสารสกัดเตรียมรายงานก่อนหน้านี้ (
govindwar Jadhav และ 2006 ) สั้น ๆและ SC เป็นโฮโมด้วย
.ทรายในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 50 mm 1 ml ( pH 7.4 ) ใช้ครกและสากไฟฟ้า
, และนำใช้เอนไซม์ลิกนิน และกิจกรรม และการทดสอบ
: ทั้งในการควบคุมและ
เซลล์ที่ได้รับหลังจากการฟอกสี . ในขณะที่ 500 มก. เซลล์ของ
ทั้ง YB และ SC หยุดชั่วคราวใน 5 มิลลิลิตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 50 mm
2 อย่างถูกต้อง และ sonicated รักษา sonifier ผลผลิตที่ 60 A ,
ให้สามครั้งละ 30 วินาที , ที่ 2 นาทีช่วงที่ 4
C เซลล์
ถูกระงับใช้ ( ของ nadhedcip ( dichlorophenol
indophenol ) เตส .
2.9 . เอนไซม์ lignin peroxidase activity )

รายงานวัดโดยขั้นตอนก่อนหน้านี้ ( และ govindwar Jadhav , 2006 ) กิจกรรมของเอนไซม์ nadhedcip
ถูกกำหนดโดยการใช้กระบวนการรายงาน
ก่อนหน้านี้ ( salokhe และ govindwar , 1999 )วิเคราะห์ส่วนผสมที่มีอยู่
dcip 50 มม. มม. 50 มม. เล็ก NADH
โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.4 ) และ 0.1 มิลลิลิตรของสารละลายเอนไซม์ ( sonicated เซลล์
ระงับ ) ในปริมาตรรวม 5.0 ml ลดได้
dcip คำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ 19 มม.  1 ซม.  1 .
อะโซรีดักเตสโดยแสดงในปฏิกิริยาผสม ( 2 มล. )
( 4.45 mm เมทิลเรด 100 มม. NADH ใน
โพแทสเซียม 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ ( pH 7.4 ) กิจกรรมของเอนไซม์ถูกคำนวณโดยการใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์
กรามของเมทิลเรด ( 23360 M  1 ซม.  1 )
( dhanve et al . , 2009 ) .
2.10 . การศึกษาเชิงวิเคราะห์
สารผลิตหลังจากการกำจัดน้ำทิ้งมีขนาดเท่ากัน
สกัดด้วยเอทิลอะซิเทต สารสกัดถูก
แห้งอันไฮดรัสโซเดียม ซัลเฟต และระเหยแห้ง Evaporator ในการหมุนกากที่ได้ละลายในปริมาณเล็ก ๆของ grademethanol
HPLC และเดียวกัน samplewas ใช้
TLC , FTIR และการวิเคราะห์ปริมาณซูโครส TLC และดำเนินการโดยใช้ระบบตัวทำละลายน โพรพานอล
: : ethyl acetate : น้ำ : acetic acid ( 1:3:2:0.2:1
) การวิเคราะห์ FTIR ของการควบคุมน้ำและ
การย่อยสลายโดยใช้ผลิตภัณฑ์ Shimadzu 8400s
วัสดุในภูมิภาคกลางของอินฟราเรด 400e4000 ซม.  1
16 สแกนความเร็ว การวิเคราะห์ HPLC ในการปฏิบัติ 0 ระบบติดตั้งเครื่องตรวจจับค่าคู่แบบ Isocratic

น้ำโดยใช้คอลัมน์ C18 4.6  250 มม. ) และ HPLC เกรดเมทานอลเป็นโทรศัพท์มือถือ
เฟสด้วยอัตราการไหล 1 มิลลิลิตรต่อนาที  1 เปลวไฟ Atomic absorption สเปก
( perkineelmer รุ่น 300 ) กับตะเกียง
ดิวทีเรียมแก้ไขพื้นหลังที่ใช้สำหรับการวัดโลหะ
ความเข้มข้นในน้ำทิ้ง เพื่อให้เป็นการ aireacetylene
flamewas ใช้ตลอด เครื่องสล็อตเดียวมีไทเทเนียม
เตากับหัวที่ถอดออกได้ วงดนตรี
สเปกตรัม wavelengths และผ่านเป็นสำหรับทองแดง : 324.8 nm ( 0.5 nm ) , N : 232.0 nm ( 0.1 nm ) , PB :
217.0nm ( 0.5nm ) และ Zn : 213.9nm ( 0.5nm ) อัตราการไหลของ nebulizer
5 .0 มิลลิลิตรต่อนาที  1 การวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสแกนได้
กับจอล jsm-6360 ( ญี่ปุ่น ) การใช้เทคนิคการทดลอง
ชอบ TLC HPLC FTIR , เพื่อตรวจสอบกระบวนการทางชีวภาพ
ได้รับเอกสารอย่างดี ( Jadhav และ govindwar , 2006 ;
Jadhav et al . , 2007 ; dhanve et al . , 2009 ) .
2.11 . การศึกษาความเป็นพิษ
2.11.1 . ต่อ (
การวิเคราะห์และศึกษาการก่อมะเร็งโดย
วิธีรายงานก่อนหน้านี้ ( Jadhav et al . , 2010 ) ในประเทศได้
หัวหอมหลอดของหอมหัวใหญ่ ( เส้นผ่าศูนย์กลาง 15e20 มิลลิเมตร น้ำหนัก 5e10 , G )
ถูกล้างในการใช้น้ำประปา ก่อนใช้เครื่องชั่งออกนอก
หลวมและฐานแห้งถูกขูด

เปิดเผยรากประถมที่ความเข้มข้นต่างๆ ( 25 , 50 , 75
และ 100% ) ได้ โดยผสมน้ำดิบ และ YB รักษาน้ำทิ้งด้วยน้ำกลั่น
.
2.11.2 . ดาวหางวิเคราะห์ ( electrophoresis เซลล์เจลเดียว )
วิธีการดาวหางวิเคราะห์ได้ดําเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (
achary et al . , 2008 ) สำหรับแต่ละภาพนิ่ง 25 สุ่มเลือก
นิวเคลียส วิเคราะห์โดยฤๅษีกล้องจุลทรรศน์ เป็นระบบวิเคราะห์ภาพด้วยคอมพิวเตอร์
( ดาวหางเวอร์ชั่น 1.5 ) มีจำนวน
วัด % ความเสียหายของดีเอ็นเอ ( % ) และความยาวหาง ( TL )
2.11.3 . เขตการศึกษาเขต

อุณหภูมิห้องทดลองที่ใช้ phaseolus และหาดทรายข้าวสาลีเมล็ด ( 10 เมล็ดแต่ละ )
ตามด้วยการรดน้ำแยกกับ 5 ml ตัวอย่างน้ำทิ้งและ
5 ml ของการย่อยสลายสารต่อวัน การย่อยสลายสารที่ใช้ในการเก็บรวบรวมก่อนหน้านี้

ยกมาโพรโทคอล ( ปาติล et al .