1. Introduction. MicroorganismsE. c

1. Introduction
. Microorganisms
E. coli K12 strain (SSI, Copenhagen, Denmark) and S. Typhimurium P6 ( Klingberg et al., 2005) were used in the study. Stock cultures were stored at −80 °C with nutrient broth (Oxoid, Hampshire, UK) and 20% (v/v) glycerol. For the experiments, bacteria were maintained on nutrient agar (Oxoid, Hampshire, UK) plates incubated overnight at 30 °C, stored at 4 °C and used within a week. In preparation for attachment assays, 20 ml of LB broth in 50 ml conical flasks with metal capping were inoculated with single colonies of the microorganisms and incubated 24 ± 2 h at 30 °C in a water bath with shaking at 120 rpm (GFL 1083, GFL GmbH, Burgwedel, Germany) to reach stationary phase. Following incubation, cells were harvested at 3900 × g for 10 min (Hettich universal 30RF, Hettich Zentrifugen, Tuttlingen, Germany) and were washed twice, by re-suspension in PBS [phosphate buffered saline; 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.44 g Na2HPO4, and 0.27 g KH2PO4 per litre (all from Merck, Darmstadt, Germany); adjusted to pH 7.2 with HCl/NaOH], vortexing (IKA® M2, IKA, Germany) for 30 s and then centrifuging at 3900 × g for 10 min. Cells were re-suspended to an optical density of approximately 2.0 at 600 nm (Shimadzu UV-1800, Shimadzu, Japan) in PBS. Colony forming units were determined for both E. coli K12 and S. Typhimurium P6 by serial dilution and spread plate counts to be 7.53 ± 1.31 × 109 CFU/ml for E. coli K12 and 2.3 ± 0.47 × 109 CFU/ml for S. Typhimurium respectively (combined average with standard deviation for all trials).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. แนะนำ
จุลินทรีย์
ต้องใช้ E. coli K12 (SSI โคเปนเฮเกน เดนมาร์ก) และ S. Typhimurium P6 (Klingberg et al., 2005) ที่ใช้ในการศึกษา วัฒนธรรมหุ้นถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C กับธาตุอาหารซุป (Oxoid แฮมเชียร์ UK) และกลีเซอร 20% (v/v) สำหรับการทดลอง แบคทีเรียที่อยู่ในแผ่นธาตุอาหาร agar (Oxoid แฮมเชียร์ UK) incubated ค้างคืนที่ 30 ° C เก็บที่ 4 ° C และใช้ภายในสัปดาห์ เตรียมพร้อมสำหรับการแนบ assays, 20 ml ของปอนด์ซุปในน้ำทรงกรวย 50 ml ด้วยโลหะ capping ได้ inoculated กับอาณานิคมเดียวที่จุลินทรีย์ และ incubated ± 24 h 2 ที่ 30 ° C ในอ่างน้ำ ด้วยการสั่นที่ 120 rpm (1083 GFL, GFL GmbH, Burgwedel เยอรมนี) ถึงระยะเครื่องเขียน ต่อไปนี้คณะทันตแพทยศาสตร์ เซลล์เก็บเกี่ยวที่ g ซื้อ 3900 สำหรับ 10 นาที (Hettich สากล 30RF, Hettich Zentrifugen, Tuttlingen เยอรมนี) และถูกล้างสองครั้ง โดยระบบกันสะเทือนใหม่ใน PBS [น้ำเกลือฟอสเฟต buffered; 8 g NaCl, 0.2 กรัม KCl, Na2HPO4 1.44 กรัม และ g 0.27 KH2PO4 ต่อลิตร (ทั้งหมดจากเมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี), ปรับค่า pH 7.2 ด้วย HCl/NaOH], vortexing (IKA ® M2, IKA เยอรมนี) s 30 และ centrifuging แล้วที่ 3900 ซื้อ g สำหรับ 10 นาที เซลล์ถูกเลื่อนออกไปอีกจะมีความหนาแน่นออปติคัลของ 2.0 ประมาณที่ 600 nm (Shimadzu UV-1800, Shimadzu ญี่ปุ่น) ใน PBS หน่วยโคโลนีขึ้นรูปถูกกำหนดสำหรับ E. coli K12 และ S. Typhimurium P6 โดยเจือจางประจำ และเผยแพร่แผ่นนับเป็น 7.53 ± 1.31 × 109 CFU/ml สำหรับ E. coli K12 และ 2.3 ± 0.47 × 109 CFU/ml สำหรับ s Typhimurium ตามลำดับ (รวมค่าเฉลี่ยกับส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานในการทดลองทั้งหมด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1 บทนำ
. จุลินทรีย์
อี สายพันธุ์ coli K12 (SSI, โคเปนเฮเกน, เดนมาร์ก) และ S. Typhimurium P6 (Klingberg et al., 2005) ได้ถูกนำมาใช้ในการศึกษา วัฒนธรรมหุ้นถูกเก็บไว้ที่ -80 ° C ที่มีน้ำซุปสารอาหาร (Oxoid นิวแฮมป์เชียร์สหราชอาณาจักร) และ 20% (v / v) กลีเซอรอล สำหรับการทดลองเชื้อแบคทีเรียได้รับการเก็บรักษาไว้บนอาหารวุ้น (Oxoid นิวแฮมป์เชียร์สหราชอาณาจักร) แผ่นบ่มค้างคืนที่ 30 ° C เก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสและใช้ภายในหนึ่งสัปดาห์ ในการเตรียมการสำหรับการตรวจสิ่งที่แนบมา, 20 มิลลิลิตรของน้ำซุป LB ในขนาด 50 ml ขวดรูปกรวยโลหะ capping ถูกเชื้อที่มีโคโลนีเดี่ยวของเชื้อจุลินทรีย์และบ่ม 24 ± 2 ชั่วโมงที่ 30 ° C ในอ่างน้ำที่มีการสั่นที่ 120 รอบต่อนาที (GFL 1083, GFL GmbH, Burgwedel, เยอรมนี) ที่จะไปถึงขั้นตอนการเขียน ต่อไปนี้การบ่มเซลล์ถูกเก็บเกี่ยวที่ 3900 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที (Hettich สากล 30RF, Hettich Zentrifugen, Tuttlingen, เยอรมนี) และได้รับการล้างครั้งที่สองโดยการระงับในพีบีเอส [ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ; 8 กรัมโซเดียมคลอไรด์, 0.2 กรัมโพแทสเซียมคลอไรด์, 1.44 กรัม Na2HPO4 และ 0.27 กรัมต่อลิตร KH2PO4 (ทั้งหมดจากเมอร์, Darmstadt, เยอรมนี); ปรับค่า pH 7.2 ที่มี HCl / NaOH] vortexing (IKA® M2, IKA, เยอรมนี) เป็นเวลา 30 วินาทีจากนั้นปั่นแยกที่ 3900 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที เซลล์เป็นอีกครั้งที่จะระงับความหนาแน่นของแสงประมาณ 2.0 ที่ 600 นาโนเมตร (Shimadzu UV-1800, Shimadzu, ญี่ปุ่น) ในพีบีเอส อาณานิคมการสร้างหน่วยได้รับการพิจารณาสำหรับทั้ง E. coli K12 และ S. Typhimurium P6 โดยอนุกรมการเจือจางและการแพร่กระจายแผ่นนับเป็น 7.53 ± 1.31 × 109 CFU / ml สำหรับเชื้อ E. coli K12 และ 2.3 ± 0.47 × 109 CFU / ml สำหรับเอส typhimurium ตามลำดับ (ค่าเฉลี่ยรวมกับค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสำหรับการทดลองทั้งหมด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . แนะนำ

จุลินทรีย์
E . coli K12 สายพันธุ์ ( SSI , โคเปนเฮเกน , เดนมาร์ก ) และ S . typhimurium P6 ( klingberg et al . , 2005 ) สถิติที่ใช้ในการศึกษา หุ้นวัฒนธรรมที่อุณหภูมิ 80 องศา C −ธาตุอาหารกับน้ำซุป ( oxoid Hampshire , UK ) และ 20 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กลีเซอรอล . สำหรับการทดลอง แบคทีเรียถูกรักษา NUMB3RS ( oxoid Hampshire , UK ) แผ่นบ่มค้างคืนที่ 30 ° Cเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C และใช้ภายในสัปดาห์ ในการเตรียมการสำหรับสิ่งที่แนบมา ) 20 มิลลิลิตรของน้ำซุปใน 50 ml ขวดกรวยปอนด์ด้วยโลหะ•ปลูกเชื้อด้วยเดียวโคโลนีของจุลินทรีย์ และ บ่ม 24 ± 2 H 30 ° C ในอ่างน้ำกับสั่นที่ 120 รอบต่อนาที ( GFL 1104 GFL GmbH , burgwedel , เยอรมนี ) ถึงเฟสอยู่กับที่ ตามระยะเวลาเซลล์เก็บ 3 , 900 กรัม× 10 นาที ( Hettich สากล 30rf Hettich zentrifugen Tuttlingen , เยอรมนี , , ) และล้าง 2 ครั้ง โดยจะระงับใน PBS [ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( ; 8 g NaCl KCl 0.2 กรัม na2hpo4 1.44 กรัมและ 0.27 กรัมต่อลิตร ( kh2po4 ทั้งหมดจากเมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ; ค่า pH 7.2 กับ NaOH HCl / ] , vortexing ( Ika Ika ® M2 ,เยอรมนี ) สำหรับ 30 วินาทีและจากนั้นสาร 3 , 900 กรัม× 10 นาทีเซลล์ก็จะระงับการซิกแซ็กประมาณ 2.0 ที่ 600 nm ( Shimadzu uv-1800 Shimadzu , ญี่ปุ่น ) ใน PBS หน่วยสร้างอาณานิคมได้รับการพิจารณาทั้ง E . coli K12 และ S . typhimurium P6 โดยอุทิศถวายและการแพร่กระจายแผ่น นับเป็น 7.53 ± 1.31 × 109 CFU / ml E . coli K12 และ 2.3 ± 0.47 × 109 CFU / ml .สารตามลำดับ ( รวม ค่าเฉลี่ยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน สำหรับการทดลอง )