Viral RNA was extracted from cloaca

Viral RNA was extracted from cloacal and tracheal
swabs using a MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Extraction
Kit with a MagNA Pure LC instrument. All samples were
first tested for influenza A presence/absence by a qRT-PCR
targeting the M gene with a OneStep Real-Time PCR Kit on
a Stratagene MX3005P RT-PCR machine using primers and
probes from Spackman et al. (2003). Influenza positive
samples were then screened for H5N1 via a second RT-PCR
test utilizing the RocheAIV H5N1 RealTime RT-PCR Kit on a
Roche LightCycler 2.0 machine. Serological responses to
H5-specific antibodies were detected via hemagglutination inhibition (HI) assays using four hemagglutinin units
following World Organisation for Animal Health protocols
(OIE, 2012). We used a 1% suspension of chicken
erythrocytes in V-bottom, 96-wellmicrotiter plates (Hassan et al., 2012). Serum samples were considered positive
for H5N1 at a HI titer of 1:80 (Wang et al., 2012).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอไวรัสถูกสกัดจาก cloacal และหลอดลม
swabs ใช้ Magna บริสุทธิ์ LC รวมกรดนิวคลีอิกสกัด
Kit กับเครื่องดนตรี Magna บริสุทธิ์ LC ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการทดสอบเป็นครั้งแรกสำหรับไข้หวัดใหญ่ A / ไม่มีโดย qRT-PCR กำหนดเป้าหมายยีน M ที่มี OneStep PCR แบบ Real-Time ชุดบนเครื่องStratagene MX3005P RT-PCR โดยใช้ไพรเมอร์และยานสำรวจจากSpackman et al, (2003) ไข้หวัดใหญ่บวกตัวอย่างที่ถูกคัดเลือกแล้ว H5N1 ผ่านสอง RT-PCR ทดสอบการใช้ RocheAIV H5N1 เรียลไทม์ RT-PCR ชุดบนRoche LightCycler 2.0 เครื่อง การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเพื่อแอนติบอดี H5 เฉพาะตรวจพบผ่านการยับยั้ง hemagglutination (ฮาวาย) โดยใช้การตรวจสี่หน่วย hemagglutinin ต่อไปนี้องค์การโปรโตคอลสุขภาพสัตว์(OIE 2012) เราใช้การระงับ 1% ของไก่เม็ดเลือดแดงในV-ด้านล่างแผ่น 96 wellmicrotiter (ฮัสซัน et al., 2012) ตัวอย่างซีรั่มได้รับการพิจารณาในเชิงบวกสำหรับสายพันธุ์ H5N1 ที่ HI titer 1: 80 (. วัง et al, 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไวรัส RNA ถูกสกัดจาก cloacal หลอดลมและ swabs ใช้
Magna บริสุทธิ์ LC ทั้งหมดการสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดกับ Magna บริสุทธิ์ LC เครื่องดนตรี ตัวอย่าง
แรกทดสอบไข้หวัดใหญ่มี / ไม่มี โดยข้าพเจ้า PCR
M ยีนเป้าหมายด้วยเวลาจริงซึ่งผลงานชุดนี้เป็น stratagene mx3005p

) และเครื่องใช้ไพรเมอร์จากสแป็กเมิ่น et al . ( 2003 )
โรคไข้หวัดใหญ่จำนวน แล้วคัดกรองไข้หวัดนกผ่านวินาทีนี้
ทดสอบใช้ rocheaiv ไข้หวัดนก Realtime RT-PCR ชุดบน
โรช lightcycler 2.0 เครื่อง การตอบสนองทาง

h5 แอนติบอดีพบ inhibition ( HI ) ผ่าน การทดสอบการเกาะกลุ่ม ของเม็ดเลือดแดง ) โดยใช้หน่วย 4
ฮีมแอกลูตินินตามองค์กรโลกสำหรับโปรแกรมสุขภาพสัตว์
( OIE , 2012 ) เราใช้ 1% ระงับไก่
เม็ดเลือดแดงใน v-bottom 96 wellmicrotiter แผ่น ( Hassan et al . , 2012 ) ตัวอย่างซีรั่ม ถือว่าเป็นบวก
สำหรับไข้หวัดนกที่ไฮระดับ  1:80 ( Wang et al . , 2012 )