Cells (5×106) were treated with ars

Cells (5×106) were treated with arsenite according
to two exposure protocols, subsequently washed twice
with PBS and then supplied with the fresh serum-free
medium for re-incubation, which was the same as the
previously described DNA fragmentation assay except
its duration longer. The cells were harvested nine
times at 4-h intervals for total 32 h after the treatment
beginning, and the progression through cell cycle
was monitored with a DNA flow cytometer. In
brief, trypsinized cells were washed twice with PBS,
fixed with 40% ethanol in PBS at 4 ◦C for 24 h, and
then stained with 5
g/ml propidium iodide (PI) in
PBS containing 50
g/ml RNase A for 30 min. The
DNA content of 10,000 individual cells was analyzed by the 2-h treatment with 80
M arsenite (Fig. 2C).
TO-2 cells, similarly exposed, exhibited severe aggregation
of the microtubules and most lost their network
morphology (Fig. 2D). However, the treatment
of 5
M arsenite for 24 h caused pronounced loss of
the microtubules throughout the cytoplasm except the
organizing center at the perinuclear area in both of JF
and TO-2 cells

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ (5 × 106) ได้รับการรักษา ด้วย arsenite ตามการโพรโทคอแสงสอง มาล้างสองครั้งด้วย PBS แล้ว ให้กับสดฟรีเซรั่มขนาดกลางสำหรับบ่มอีก ซึ่งเป็นวิเคราะห์การกระจายตัวของดีเอ็นเอยกเว้นที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ระยะเวลานาน เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวเก้าครั้งที่ช่วง 4 h h 32 รวมหลังจากการรักษาเริ่มต้น และความก้าวหน้าผ่านรอบเซลล์ได้ตรวจสอบกับ cytometer เป็นลำดับดีเอ็นเอ ในโดยย่อ trypsinized เซลล์ถูกล้าง ด้วย PBS สองคง ด้วยเอทานอล 40% ใน PBS ที่ ◦C 4 ใน 24 ชม และแล้ว สีกับ 5 g/ml propidium ไอโอไดด์ (PI) ในPBS ประกอบด้วย 50 g/ml RNase A ใน 30 นาทีเนื้อหาดีเอ็นเอของเซลล์แต่ละ 10000 ถูกวิเคราะห์ โดยรักษา 2 h กับ arsenite 80 เมตร (Fig. 2C)รุนแรงรวมจัดแสดงเป็น 2 เซลล์ สัมผัส ในทำนองเดียวกันmicrotubules นี้และส่วนใหญ่หายไปเครือข่ายสัณฐานวิทยา (Fig. 2D) อย่างไรก็ตาม การรักษาม. 5 arsenite ใน 24 h เกิดสูญหายออกเสียงmicrotubules ทั่วไซโทพลาซึมยกเว้นการศูนย์จัดตั้ง perinuclear ทั้งของ JFเป็น 2 เซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ (5 × 106) ได้รับการรักษาด้วย arsenite ตามสองโปรโตคอลการสัมผัสล้างต่อมาครั้งที่สองกับพีบีเอสและจัดจำหน่ายแล้วด้วยซีรั่มฟรีสดขนาดกลางสำหรับการบ่มซึ่งเป็นเช่นเดียวกับการทดสอบการกระจายตัวของดีเอ็นเออธิบายไว้ก่อนหน้ายกเว้นระยะเวลาของมันอีกต่อไป เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวเก้าครั้งในช่วงเวลา 4 ชั่วโมงรวม 32 ชั่วโมงหลังการรักษาจุดเริ่มต้นและความก้าวหน้าผ่านวงจรมือถือได้รับการตรวจสอบที่มีการไหลของดีเอ็นเอcytometer ในช่วงสั้น ๆ เซลล์ trypsinized ถูกล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสคงมีเอทานอล 40% พีบีเอสที่ 4 ◦Cเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและการย้อมสีแล้วกับ5? g / ml propidium ไอโอไดด์ (PI) ในพีบีเอสที่มี50? g / ml RNase เป็นเวลา 30 นาที ปริมาณดีเอ็นเอ 10,000 แต่ละเซลล์ได้รับการวิเคราะห์โดยการรักษา 2 ชั่วโมงกับ 80? M arsenite (รูป. 2C). TO-2 เซลล์สัมผัสกันแสดงรวมอย่างรุนแรงของmicrotubules และสูญเสียมากที่สุดเครือข่ายของพวกเขาสัณฐาน(รูป. 2D ) อย่างไรก็ตามการรักษา5? M arsenite 24 ชั่วโมงก่อให้เกิดการสูญเสียที่เด่นชัดของmicrotubules ตลอดพลาสซึมยกเว้นศูนย์จัดที่บริเวณperinuclear ทั้งใน JF และ TO-2 เซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์ ( 5 × 106 ) ได้รับการรักษาด้วย arsenite ตาม
2 เปิดรับโปรโตคอลและล้างสองครั้ง
กับ PBS และจากนั้นมาพร้อมกับสื่อ serum-free
สดจะบ่มเพาะ ซึ่งก็เหมือนกับที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ DNA fragmentation ) ยกเว้น

ระยะเวลาของอีกต่อไป เซลล์เก็บเก้า
ครั้งในช่วงเวลาส่วนใหญ่สำหรับทั้งหมด 32 ชั่วโมงหลังจากการรักษา
เริ่มต้นและความก้าวหน้าผ่านวงจรเซลล์
ถูกตรวจสอบด้วยดีเอ็นเอการใช้โมโน . ใน
สั้น trypsinized เซลล์ถูกล้างสองครั้งกับพีบีเอส
แก้ไขด้วยเอทานอล 40 % ในช่องที่ 4 ◦ เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แล้วย้อมด้วย
และ
5 g / ml propidium ไอโอไดด์ ( PI )
PBS ที่มี 50
g / ml เป็นเวลา 30 นาที เลส
เนื้อหา 10 , 000 เซลล์ดีเอ็นเอ บุคคล โดยใช้การรักษา 2-h 80
M อาซีไนท์ ( รูป
2C )to-2 เซลล์ โดยเปิดเผย และรุนแรงรวม
ของไมโครทิวบูลและส่วนใหญ่ของพวกเขาหายเครือข่าย
สัณฐาน ( รูปที่ 2 ) อย่างไรก็ตามการรักษา
5 M
arsenite 24 H ทำให้ออกเสียงการสูญเสีย

ท่อไมโครทูบูลตลอด ยกเว้นการจัดศูนย์ที่บริเวณเยื่อในทั้งสองของ JF
to-2 เซลล์และ