3. Results and discussion
3.1. Selection of mobile phase
Prior to performing the validation assay, chromatographic
conditions for the HPLC stability-indicating method were studied
in order to achieve appropriate system suitability.
Mobile phase composition was tested with methanol/
phosphate buffer + tetrabutylammonium (30:70 and 70:30, v/v)
in C8 column (λ = 254 nm); and 0.2% metaphosphoric acid in
water solution, 0.2% metaphosphoric acid/methanol (95:5 and
90:10, v/v), 0.2% metaphosphoric acid/acetonitrile (95:5 and
90:10, v/v) and 0.2% metaphosphoric acid/methanol/acetonitrile
(90:5:5, v/v/v) inC18 column (λ = 254 nm). Those mobile phases
have not presented adequate response for ascorbic acid quantitation
since they were not able to identify the antioxidant
glutathione, as a component of the pharmaceutical/cosmetic
preparations, and provided unsuitable retention time for the
active substance (≈1 min) [28].
The working mobile phase, 0.2% metaphosphoric acid/
methanol/acetonitrile (90:8:2, v/v/v), has elevated the retention
time to ≈3.5 min, providing resolution of the ascorbic acid from
the nicotinic acid, shown in Fig. 1, and other excipients from
the topical formulations with sharp and symmetrical peaks, and
avoided interferences from the equipment noise. In addition,
this mobile phase has been reported to maintain the column life
longer. The final experiment conditions were set as described in
Sections 2.1 and 2.4.
3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1. การเลือกระยะเคลื่อนก่อนที่จะดำเนินการตรวจสอบทดสอบ chromatographicเงื่อนไขวิธีการบ่งชี้เสถียรภาพ HPLC ได้ศึกษาเพื่อให้บรรลุความเหมาะสมของระบบที่เหมาะสมองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่ทดสอบกับเมทานอล /ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ + tetrabutylammonium (30:70 และ 70:30, v/v)ในคอลัมน์ C8 (λ = 254 nm); และกรด metaphosphoric 0.2% ในน้ำโซลูชั่น 0.2% กรด metaphosphoric/เม ทานอล (95:5 และ90:10, v/v), 0.2% กรด metaphosphoric/acetonitrile (95:5 และ90:10, v/v) และ 0.2% กรด metaphosphoric/เม ทานอ ล/acetonitrileคอลัมน์ inC18 (90:5:5, v/v/v) (λ = 254 nm) ระยะเคลื่อนที่ไม่ได้แสดงการตอบสนองเพียงพอสำหรับการวิเคราะห์หาปริมาณกรดแอสคอร์บิคเนื่องจากพวกเขาไม่สามารถระบุการต้านอนุมูลอิสระกลูตาไธโอน เป็นส่วนประกอบของยา/เครื่องสำอางเตรียม และเก็บข้อมูลที่ไม่เหมาะสมให้เวลาสำหรับการของสาร (≈1 นาที) [28]ระยะทำงานมือถือ กรด metaphosphoric 0.2% /เมทานอล (90:8:2, v/v/v), acetonitrile ได้ยกระดับการเก็บรักษาเวลา ≈3.5 นาที ให้ความละเอียดของกรดแอสคอร์บิคจากกรด nicotinic แสดงใน Fig. 1 และ excipients อื่น ๆ จากสูตรเฉพาะ ด้วยคม และสมมาตรยอด และหลีกเลี่ยง interferences จากอุปกรณ์เสียง นอกจากนี้ระยะนี้มือถือมีรายงานว่า รักษาชีวิตคอลัมน์อีกต่อไป เงื่อนไขการทดลองสุดท้ายถูกตั้งค่าตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.1 และ 2.4
การแปล กรุณารอสักครู่..
3. Results and discussion
3.1. Selection of mobile phase
Prior to performing the validation assay, chromatographic
conditions for the HPLC stability-indicating method were studied
in order to achieve appropriate system suitability.
Mobile phase composition was tested with methanol/
phosphate buffer + tetrabutylammonium (30:70 and 70:30, v/v)
in C8 column (λ = 254 nm); and 0.2% metaphosphoric acid in
water solution, 0.2% metaphosphoric acid/methanol (95:5 and
90:10, v/v), 0.2% metaphosphoric acid/acetonitrile (95:5 and
90:10, v/v) and 0.2% metaphosphoric acid/methanol/acetonitrile
(90:5:5, v/v/v) inC18 column (λ = 254 nm). Those mobile phases
have not presented adequate response for ascorbic acid quantitation
since they were not able to identify the antioxidant
glutathione, as a component of the pharmaceutical/cosmetic
preparations, and provided unsuitable retention time for the
active substance (≈1 min) [28].
The working mobile phase, 0.2% metaphosphoric acid/
methanol/acetonitrile (90:8:2, v/v/v), has elevated the retention
time to ≈3.5 min, providing resolution of the ascorbic acid from
the nicotinic acid, shown in Fig. 1, and other excipients from
the topical formulations with sharp and symmetrical peaks, and
avoided interferences from the equipment noise. In addition,
this mobile phase has been reported to maintain the column life
longer. The final experiment conditions were set as described in
Sections 2.1 and 2.4.
การแปล กรุณารอสักครู่..