RNA preparation and cDNA synthesis
Plant tissue was collected by cutting off a pitcher and using only
the lower third with multicellular glands for homogenization. Total
RNA was isolated using the InviTrap Spin Plant RNA Mini Kit
(Stratec Molecular, Berlin, Germany) following the manufacturer’s
protocol. Total RNA was further cleaned-up and concentrated using
RNeasy MinElute Cleanup Kit (Quiagen, Hilden, Germany). First-
Strand cDNA was synthesized applying SuperScript III First-
Strand Synthesis SuperMix (Invitrogen, Darmstadt, Germany)
using 2 lg total RNA, according to the manufacturer’s protocol
การเตรียมอาร์เอ็นเอและการสังเคราะห์ cDNA
เนื้อเยื่อพืชที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการตัดเหยือกและใช้เพียง
ที่ต่ำกว่าที่สามที่มีต่อมเซลล์สำหรับการทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน รวม
RNA ถูกแยกออกโดยใช้ InviTrap หรือไม่ Spin พืช RNA Mini Kit
(STRATEC โมเลกุล, เบอร์ลิน, เยอรมนี) ดังต่อไปนี้ผู้ผลิต
โพรโทคอ RNA รวมได้รับการทำความสะอาดขึ้นต่อไปและเข้มข้นใช้
RNeasy MinElute Kit Cleanup (Quiagen, ฮิลเดน, เยอรมนี) ครั้งแรก
Strand ยีนสังเคราะห์ใช้ยก? III แรก
Strand สังเคราะห์ SUPERMIX (Invitrogen, Darmstadt, เยอรมนี)
โดยใช้ 2 LG RNA รวมตามโปรโตคอลของผู้ผลิต
การแปล กรุณารอสักครู่..
