The spleens were aseptically remove

The spleens were aseptically removed and transferred to culture dishes containing 2 ml of cold HBSS. Forceps and carbasus were used to finely triturate the spleens, then the cell suspensions were transferred to tubes and washed twice in HBSS and centrifuged for 10 min at 1000 rpm at 4°C. Splenocytes were resuspended in 3 ml of appropriate culture medium (Roswell Park Memorial Institute, RPMI, 1640 medium with phenol red supplemented) (Gibco, Grand Island, NY, USA). Cell numbers were determined for each splenocyte suspension by counting in a hemocytometer and cell viabilities were verified by trypan blue exclusion method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Spleens ถูกเอาออก aseptically และโอนย้ายไปยังอาหารวัฒนธรรมประกอบด้วย 2 ml ของ HBSS เย็น คีมและ carbasus ก็จะประณีต triturate spleens แล้วเซลล์บริการถูกโอนย้ายไปยังท่อล้างสองครั้งใน HBSS และ centrifuged สำหรับ 10 นาทีที่ 1000 รอบต่อนาทีที่ 4 องศาเซลเซียส Splenocytes ได้ resuspended ใน 3 ml ของสื่อวัฒนธรรมที่เหมาะสม (สถาบัน Roswell Park เมโมเรียล RPMI, 1640 กลางกับแดงวางเสริม (Gibco เกาะแกรนด์ NY สหรัฐอเมริกา) เซลล์หมายเลขถูกกำหนดสำหรับระงับ splenocyte แต่ละ โดยการนับในการ hemocytometer และ viabilities เซลล์ที่ถูกตรวจสอบ โดยวิธีแยก trypan blue

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ม้ามถูกถอดออกปลอดเชื้อและโอนไปยังอาหารที่มีวัฒนธรรม 2 มิลลิลิตร HBSS เย็น คีมและ carbasus ถูกนำมาใช้อย่างประณีต triturate ม้ามแล้วแขวนลอยเซลล์ถูกโอนไปยังหลอดและล้างครั้งที่สองใน HBSS และปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 1000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C Splenocytes ถูก resuspended ใน 3 มล. ของกลางวัฒนธรรมที่เหมาะสม (รอสเวลปาร์คอนุสรณ์สถาบัน RPMI, 1640 ขนาดกลางที่มีสีแดงเสริมฟีนอล) (Gibco, เกาะแกรนด์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) จำนวนเซลล์ได้รับการพิจารณาสำหรับแต่ละระงับ splenocyte โดยการนับใน viabilities hemocytometer เซลล์ได้รับการตรวจสอบโดยวิธีการยกเว้น Trypan สีฟ้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่ถูกลบออก aseptically ม้ามและโอนไปยังวัฒนธรรมอาหารที่ประกอบด้วย 2 ml ของเย็น hbss . คีม และ carbasus นำมาบดละเอียด ประณีต และม้าม แล้วเซลล์แขวนลอยถูกย้ายท่อ และล้างสองครั้งใน hbss ไฟฟ้า 10 นาทีที่ 1 , 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศา มีการเติบโตทางเศรษฐกิจ resuspended 3 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสม ( สถาบัน , RPMI อนุสรณ์ รอสเวลล์ ปาร์ค1640 ขนาดกลางด้วยฟีนอลแดงเสริม ) ( gibco Grand Island , NY , USA ) เบอร์มือถือได้รับการพิจารณาสำหรับแต่ละ splenocyte ระงับโดยการนับใน hemocytometer และเซลล์ viabilities ถูกตรวจสอบโดยวิธียกเว้นไตรแพนสีฟ้า