2.3. Reaction time course for the e

2.3. Reaction time course for the enzymatic conversion of sucrose
from selected maple syrups
Three maple syrups 15◦Bx, 30◦Bx and 66◦Bx were prepared from
the same maple sap and were used as reaction media and sucrose
source. The reaction time courses were investigated at two temperatures
of 8 ◦C and 30 ◦C. The reactions were initiated by adding
the levansucrase enzyme (72 U/mL) in 0.1M potassium phosphate
buffer (pH 6.0) to yield 2 and 6 U/mL of maple syrup. Aliquots of
enzymatic reactions were withdrawn at selected time intervals
within a 48 h time period. To stop the reaction, the aliquots were
boiled for 5min. The protein and levan polymers were precipitated
with methanol (1:1, v/v). To determine the total sucrose conversion
yield and the concentration of transfructosylation products,
sucrose, glucose and fructose were determined by HPAEC system
equipped with pulsed amperometric detector (PAD) and CarboPac
PA20 (3×150mm, Thermo Scientific Dionex, USA) column as previously
described (Tian & Karboune, 2012). The total conversion
yield was calculated as the concentration of the converted sucrose
divided by the initial concentration of sucrose, multiplied by 100.
One unit of total activity was defined as the amount of the biocatalyst
that liberates 1mol of the reducing sugars (glucose and
fructose) from sucrose at the initial stage of the reaction per min.
The sucrose conversion by levansucrase releases glucose and fructose,
which can be transferred to the fructosyl 6-hydroxyl of the
acceptor products (levan, FOSs). Since the free fructose cannot act as
donor or acceptor substrate, its concentration reflects the extent of
the hydrolysis reaction of sucrose. Moreover, subtracting the concentration
of free fructose from that of glucose gives the extent of
the transfructosylation reaction. The extent of the hydrolysis reaction
was estimated as the concentration of free fructose divided
by the concentration of the converted sucrose, multiplied by 100%.
One hydrolytic unit of activity is defined as the amount of the biocatalyst
that produces 1mol of the fructose at the initial stage
of the reaction per min. On the other hand, one transfructosylation
unit of LS is defined as the amount of the biocatalyst that
releases 1mol of glucose as a result of transferring fructose, per
min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. หลักสูตรเวลาตอบสนองสำหรับการแปลงเอนไซม์ของซูโครสจากน้ำเชื่อมเมเปิ้ลเลือก3 น้ำเชื่อมเมเปิ้ล 15◦Bx, 30◦Bx และ 66◦Bx ถูกจัดทำขึ้นจากเมเปิ้ล sap เดียวกันถูกใช้เป็นสื่อปฏิกิริยาและซูโครสแหล่งที่มา หลักสูตรปฏิกิริยาเวลาถูกตรวจสอบที่อุณหภูมิสอง8 ◦C และ 30 ◦C มีการเริ่มต้นปฏิกิริยา โดยเพิ่มเอนไซม์ levansucrase (72 U/mL) ใน 0.1M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.0) ให้ผล 2 และ 6 U/mL ของน้ำเชื่อมเมเปิ้ล Aliquots ของปฏิกิริยาเอนไซม์ถูกถอนในช่วงเวลาที่เลือกภายใน h 48 รอบระยะเวลา หยุดปฏิกิริยา aliquots ถูกต้ม 5 นาที โพลิเมอร์โปรตีนและ levan ได้ตกตะกอนด้วยเมทานอล (1:1, v/v) การตรวจสอบการแปลงรวมซูโครสผลผลิตและความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์ transfructosylationซูโครส กลูโคส และฟรักโทสถูกกำหนด โดยระบบ HPAECหัวตัวตรวจจับ (PAD) และ CarboPacPA20 (3 × 150 มม. เทอร์โม Dionex วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) คอลัมน์เป็นก่อนหน้านี้อธิบาย (เทียน & Karboune, 2012) การแปลงทั้งหมดผลคำนวณเป็นความเข้มข้นของซูโครสแปลงหาร ด้วยความเข้มข้นเริ่มต้นของซูโครส คูณ ด้วย 100กำหนดหน่วยของกิจกรรมทั้งหมดจำนวน biocatalystที่ liberates 1 โมลของน้ำตาลลดลง (กลูโคส และฟรักโทส) จากน้ำตาลซูโครสในขั้นเริ่มต้นของปฏิกิริยาต่อนาทีการแปลงซูโครส โดย levansucrase ปล่อยกลูโคสและฟรักโทสซึ่งสามารถโอนย้ายไป fructosyl ไฮดรอก 6 - ของให้เป็นผู้รับสินค้า (levan, FOSs) ตั้งแต่ฟรักโทสฟรีไม่สามารถทำหน้าที่เป็นพื้นผิวผู้บริจาคหรือให้เป็นผู้รับ ความเข้มข้นสะท้อนถึงขอบเขตของปฏิกิริยาการสลายของน้ำตาลซูโครส นอกจากนี้ ลบความเข้มข้นของฟรีฟรักโทสจากกลูโคสที่ให้ขอบเขตของปฏิกิริยา transfructosylation ขอบเขตของปฏิกิริยาย่อยประมาณเป็นความเข้มข้นของฟรักโทสและแบ่งโดยความเข้มข้นของซูโครสแปลง คูณ ด้วย 100%หน่วยไฮโดรไลติกของกิจกรรมถูกกำหนดให้เป็นจำนวน biocatalystที่ผลิต 1 โมลของฟรักโทสที่ในระยะแรกของปฏิกิริยาต่อนาที บนมืออื่น ๆ transfructosylation หนึ่งกำหนดหน่วยของ LS biocatalyst ในจำนวนที่รุ่น 1 โมลของกลูโคสจากโอนฟรักโทส ต่อนาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ปฏิกิริยาเวลาที่แน่นอนสำหรับการแปลงเอนไซม์ของน้ำตาลซูโครส
จากเมเปิ้ลไซรัปเลือก
สามน้ำเชื่อมเมเปิ้ล15◦Bx, 30◦Bxและ66◦Bxที่เตรียมจาก
ทรัพย์เมเปิ้ลเหมือนกันและถูกนำมาใช้เป็นสื่อการเกิดปฏิกิริยาและซูโครส
แหล่งที่มา หลักสูตรเวลาปฏิกิริยาถูกตรวจสอบที่สองอุณหภูมิ
8 ◦Cและ 30 ◦C ปฏิกิริยาถูกริเริ่มโดยการเพิ่ม
การทำงานของเอนไซม์ levansucrase (72 U / มิลลิลิตร) ใน 0.1M โพแทสเซียมฟอสเฟต
บัฟเฟอร์ (pH 6.0) ที่จะให้ผลผลิตที่ 2 และ 6 U / มิลลิลิตรน้ำเชื่อมเมเปิ้ล aliquots ของ
ปฏิกิริยาของเอนไซม์ถูกถอนออกในช่วงเวลาที่เลือก
ภายในระยะเวลา 48 ชั่วโมง ที่จะหยุดปฏิกิริยา aliquots ถูก
ต้ม 5 นาที โปรตีนและโพลีเมอ Levan ถูกตกตะกอน
ด้วยเมทานอล (1: 1, v / v) เพื่อตรวจสอบการแปลงรวมซูโครส
อัตราผลตอบแทนและความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์ transfructosylation ที่
ซูโครสกลูโคสและฟรุกโตสได้รับการพิจารณาโดยระบบ HPAEC
พร้อมกับชีพจรตรวจจับ amperometric (PAD) และ CarboPac
PA20 (3 × 150 มมเทอร์โมวิทยาศาสตร์ Dionex, สหรัฐอเมริกา) คอลัมน์ไว้ก่อนหน้านี้
อธิบาย (ท่าเตียน & Karboune 2012) การแปลงรวม
อัตราผลตอบแทนที่คำนวณได้เป็นความเข้มข้นของน้ำตาลซูโครสแปลง
หารด้วยความเข้มข้นเริ่มต้นของน้ำตาลซูโครสคูณด้วย 100
หน่วยหนึ่งของกิจกรรมทั้งหมดถูกกำหนดเป็นจำนวนเงิน biocatalyst ที่
ว่าปล่อย 1 mol ของน้ำตาลลด (กลูโคสและ
ฟรุกโตส) จากน้ำตาลซูโครสในระยะเริ่มแรกของการเกิดปฏิกิริยาต่อนาที.
แปลงซูโครสกลูโคส levansucrase ประชาสัมพันธ์และฟรุกโตส
ซึ่งสามารถถ่ายโอนไปยัง fructosyl 6 -hydroxyl ของ
ผลิตภัณฑ์ใบเสร็จ (Levan, ฟอสส์) ตั้งแต่ฟรุกโตสฟรีไม่สามารถทำหน้าที่เป็น
ผู้บริจาคหรือสารตั้งต้นยอมรับความเข้มข้นสะท้อนให้เห็นถึงขอบเขตของ
การเกิดปฏิกิริยาการย่อยสลายน้ำตาลซูโครส นอกจากนี้การลบความเข้มข้น
ของฟรุกโตสฟรีจากที่ของน้ำตาลกลูโคสให้ขอบเขตของ
ปฏิกิริยา transfructosylation ขอบเขตของการเกิดปฏิกิริยาไฮโดรไลซิ
เป็นที่คาดกันว่าเป็นความเข้มข้นของฟรุกโตสฟรีแบ่ง
โดยความเข้มข้นของน้ำตาลซูโครสแปลงคูณด้วย 100%.
หนึ่งหน่วยย่อยสลายของกิจกรรมจะถูกกำหนดเป็นจำนวนเงิน biocatalyst ที่
ที่ผลิต 1 โมลของฟรุกโตสที่ ในระยะเริ่มต้น
ของการเกิดปฏิกิริยาต่อนาที ในทางกลับกันคนหนึ่ง transfructosylation
หน่วยของ LS ถูกกำหนดให้เป็นจำนวนเงิน biocatalyst ที่
ออก 1 โมลของน้ำตาลกลูโคสเป็นผลมาจากการถ่ายโอนฟรุกโตสต่อ
นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 แน่นอนเวลาปฏิกิริยาสำหรับการแปลงเอนไซม์ของน้ำตาลซูโครสคัดเลือกจากน้ำเชื่อมเมเปิ้ลสามต้นเมเปิลน้ำเชื่อม BX 15 ◦ 30 ◦ BX และ 66 ◦ BX ที่เตรียมจากเหมือนเมเปิ้ล SAP และใช้เป็นสื่อปฏิกิริยา และซูโครสแหล่งที่มา เวลาปฏิกิริยาหลักสูตรศึกษาที่ 2 อุณหภูมิ8 ◦ C และ 30 ◦ C . ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยการเพิ่มการ levansucrase เอนไซม์ ( 72 U / ml ) ใน 0.1m โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.0 ) ผลผลิตที่ 2 และ 6 U / ml ของน้ำเชื่อมเมเปิ้ล เฉยๆของปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่ถูกถอน เลือกช่วงเวลาเวลาภายใน 48 ชั่วโมงระยะเวลา เพื่อหยุดการเกิดปฏิกิริยา , เฉยๆคือต้มประมาณ 5 นาที และมีการตกตะกอนโปรตีน 4 โพลิเมอร์กับเมธานอล ( 1 : 1 v / v ) เพื่อตรวจสอบการแปลงโดยรวมปริมาณและความเข้มข้นของ transfructosylation ผลิตภัณฑ์ ,ซูโครสกลูโคสและฟรักโทสถูกกำหนดโดยระบบ hpaecติดตั้งเครื่องตรวจจับชีพจรสำคัญ ( พธม. ) และ carbopacpa20 ( 3 × 150mm DIONEX , เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , USA ) คอลัมน์ก่อนหน้านี้เป็นอธิบาย ( เทียน & karboune , 2012 ) การแปลงทั้งหมดผลผลิตมีค่าความเข้มข้นของซูโครสที่แปลงเป็นแบ่งตามความเข้มข้นเริ่มต้นของน้ำตาลซูโครส คูณด้วย 100หน่วยหนึ่งของกิจกรรมทั้งหมดถูกกำหนดไว้เป็นปริมาณของตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่ช่วยชำระล้าง 1mol ของลดน้ำตาล ( กลูโคสฟรักโทส ) จากซูโครสในขั้นเริ่มต้นของปฏิกิริยาต่อนาทีการแปลงโดย levansucrase ซูโครสกลูโคสออก และฟรุคโตสซึ่งสามารถย้ายไป 6-hydroxyl ของฟรุกโตซิลผลิตภัณฑ์พระนาสิก ( 4 , ฟอสส์ ) ตั้งแต่ฟรักโทสฟรีไม่สามารถแสดงเป็นผู้บริจาคหรือพระนาสิกตั้งต้นความเข้มข้นของมันสะท้อนให้เห็นถึงขอบเขตของเอนไซม์ปฏิกิริยาของน้ำตาลซูโครส นอกจากนี้การลบความเข้มข้นของฟรักโทสฟรีจากกลูโคสที่ให้ขอบเขตของการ transfructosylation ปฏิกิริยา ขอบเขตของปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสซึ่งเป็นความเข้มข้นของฟรักโทสฟรีแบ่งโดยความเข้มข้นของซูโครสที่แปลงคูณด้วย 100 %หนึ่งหน่วยย่อยสลายของกิจกรรม หมายถึง ปริมาณของตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่ผลิต 1mol ของฟรักโทสที่เริ่มแรกของปฏิกิริยาต่อนาที บนมืออื่น ๆ หนึ่ง transfructosylationหน่วยนี่ หมายถึง ปริมาณของตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่ข่าว 1mol เป็นผลของการถ่ายโอนของกลูโคส ฟรักโทส ต่อมิน