are shown in Table 2 and Fig. 3A. In this study, isoamyl alcohol was
the alcohol with the highest end-concentration in all fermentations.
Addition of leucine caused a significant increase in isoamyl
alcohol levels; this was not unexpected, considering the mechanisms
involved in the Ehrlich pathway (Hazelwood et al., 2008).
The increase in 2-methyl butanol and isobutanol levels resulting
from isoleucine and valine supplementation, respectively, can be
similarly explained. Amino acid addition significantly increased the
production of the respective higher alcohols (Table 2). Previous
studies have shown that with the addition of different amino acids,
both Saccharomyces and non-Saccharomyces yeast produce
increased amounts of respective higher alcohols. This is achieved
by increasing their capacity to decarboxylate the transaminated aketo
acids and then reduce them to obtain the final alcohols
(Etschmann, Bluemke, Sell, & Schrader, 2002; Hazelwood et al.,
2008; Hernandez-Orte et al., 2005). In this study, cysteine supplementations
had no significant effect on fusel alcohol formation,
which could be due to less added concentrations of cysteine.
Cysteine, in general, is not very abundant in brewer's wort (Krüger
& Anger, 1900). Furthermore, a global increase in propanol formation
after the addition of different amino acids was evaluated
(excluding isoleucine). The cultures with added proline, valine and
glutamine produced significantly higher amounts of propanol than
the control fermentation. These results are not in complete agreement
with the data reported by Garde-Cerdan and Ancin-
Azpilicueta (2008) and Hernandez-Orte, Ibarz, Cacho, and Ferreira
(2006), who have not found positive correlations between the
formation of some higher alcohols and amino acid supplementation.
However, these differences might have been caused by the fact
that their studies used a mixture of amino acids. Our results show
that besides the branched-chain amino acids, proline and glutamine
supplementations enhance the formation of higher alcohols,
especially the formation of propanol. In general, the addition of a
single amino acid resulted in an increase in the total fusel alcohol
concentration (Table 2). Changes in the formation of fusel alcohols
caused by amino acid supplementation might be related to alterations
in the intracellular pools of precursors and intermediates
involved in their synthesis.
Beside the higher alcohols, the formation of esters was studied.
All esters were synthesised relatively slowly during the exponential
growth phase (Fig. 4). The final concentrations of the volatile esters
are shown in Table 2 and Fig. 5A. The impact of amino acid addition
on ester production varied depending on the ester. Most differences
between various profiles of ester formation were very small.
Nevertheless, the statistical analysis revealed a significant effect of
amino acid supplementations on 2-methylbutyl acetate formation,
except for cysteine addition. The addition of isoleucine, in particular,
caused a large increase in the concentration of 2-methylbutyl
acetate. It was also found that the addition of leucine caused an
increase in isoamyl acetate production. However, adding valine did
not affect isobutyl acetate formation. The increased production of
2-methylbutyl acetate and isoamyl acetate was probably caused by
high levels of 2-methyl butanol, isoamyl alcohol and acetyl-CoA.
These molecules are the necessary precursors for the formation
of acetate esters by alcohol acetyltransferases (Viana, Gil, Genoves,
Valles, & Manzanares, 2008). Amino acid supplementation caused a
global decrease in ethyl acetate production in comparison with
standard fermentation. The decreased production of ethyl acetate
might have been caused by the competition for acetyl-CoA, which is
also needed for the synthesis of other acetate esters. Similar findings
have already been reported (Lee, Yu, Curran, & Liu, 2011).
Cysteine, valine, glutamine and proline addition decreased the
formation of ethyl hexanoate. The addition of proline, in particular,
significantly lowered the concentration of ethyl hexanoate
(Table 2). Saerens et al. (Saerens et al., 2008b) have reported that
increasing the levels of nitrogen causes a larger increase in the
formation of acetate esters than in the formation of ethyl esters.
This result was partially confirmed in our study. In general, amino
acid supplementation either enhances or decreases the formation
of some esters. Unlike the total concentration of higher alcohols,
the total ester concentration is not affected by amino acid supplementation
because of the low concentration of ethyl acetate. This
could be related to potential changes in intracellular acetyl-CoA
levels.
3.3. Effect of amino acid supplementation on gene expression levels
The expression of 15 genes involved in the synthesis of flavouractive
compounds was quantified in all fermentations (Figs. 3B and
5B). Under our fermentation conditions, we observed signi
ดังแสดงในตารางที่ 2 และรูป 3A ในการศึกษานี้เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isoamyl เป็น
เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ที่มีปลายเข้มข้นสูงสุดในการหมักแหนมทั้งหมด.
นอกเหนือจาก leucine ก่อให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน isoamyl
ระดับแอลกอฮอล์ นี้ไม่ได้คาดคิดพิจารณากลไก
ที่เกี่ยวข้องในการเดิน Ehrlich (เฮเซลวูด et al., 2008).
การเพิ่มขึ้นของบิวทานอ 2-methyl และระดับ isobutanol ที่เกิด
จากไอโซลิวซีนและอาหารเสริม valine ตามลำดับสามารถ
อธิบายในทำนองเดียวกัน นอกจากนี้กรดอะมิโนอย่างมีนัยสำคัญเพิ่ม
การผลิตของแอลกอฮอล์สูงขึ้นตามลำดับ (ตารางที่ 2) ก่อนหน้านี้
การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่ามีการเพิ่มของกรดอะมิโนที่แตกต่างกัน
ทั้ง Saccharomyces และไม่ Saccharomyces ยีสต์ผลิต
ปริมาณของแอลกอฮอล์ที่สูงขึ้นตามลำดับเพิ่มขึ้น นี่คือความสำเร็จ
โดยการเพิ่มความสามารถในการ decarboxylate transaminated aketo
กรดแล้วลดพวกเขาจะได้รับแอลกอฮอล์สุดท้าย
(Etschmann, Bluemke ขายและ Schrader, 2002; เฮเซลวูด, et al.,
2008;?. Hern andez-Orte, et al, 2005) ในการศึกษานี้เสริมอาหาร cysteine
ไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญเกี่ยวกับการก่อ fusel เครื่องดื่มแอลกอฮอล์
ซึ่งอาจจะเกิดจากการเพิ่มความเข้มข้นน้อยของ cysteine.
Cysteine โดยทั่วไปไม่ได้เป็นที่อุดมสมบูรณ์มากในการผลิตเบียร์สาโท (Krüger
และความโกรธ 1900) นอกจากนี้การเพิ่มขึ้นทั่วโลกในการสร้างโพรพาน
หลังจากที่นอกเหนือจากกรดอะมิโนที่แตกต่างกันได้รับการประเมิน
(ไม่รวมไอโซลิวซีน) วัฒนธรรมที่มีโพรลีนเพิ่ม valine และ
กลูตาผลิตปริมาณที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของโพรพานกว่า
การหมักควบคุม ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่ได้อยู่ในข้อตกลงที่สมบูรณ์
กับข้อมูลที่รายงานโดย Garde-Cerdan และ Ancin-
Azpilicueta (2008) และ Hern? andez-Orte, Ibarz, Cacho และ Ferreira
(2006) ที่ยังไม่พบความสัมพันธ์เชิงบวกระหว่าง
การก่อตัวของบางอย่าง แอลกอฮอล์ที่สูงขึ้นและการเสริมกรดอะมิโน.
อย่างไรก็ตามความแตกต่างเหล่านี้อาจมีสาเหตุมาจากความจริงที่
ว่าการศึกษาของพวกเขานำมาใช้เป็นส่วนผสมของกรดอะมิโน ผลของเราแสดงให้เห็น
ว่านอกเหนือจากโซ่กิ่งกรดอะมิโนโพรลีนและกลูตา
เสริมอาหารเพิ่มศักยภาพในการก่อตัวของแอลกอฮอล์ที่สูงขึ้น
โดยเฉพาะอย่างยิ่งการก่อตัวของโพรพาน โดยทั่วไปนอกเหนือจากการให้
กรดอะมิโนเดียวส่งผลให้เกิดการเพิ่มขึ้นของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์รวม fusel
เข้มข้น (ตารางที่ 2) การเปลี่ยนแปลงในการก่อตัวของแอลกอฮอล์ fusel
เกิดจากการเสริมกรดอะมิโนที่อาจจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลง
ในสระว่ายน้ำภายในเซลล์ของสารตั้งต้นและตัวกลาง
ที่เกี่ยวข้องในการสังเคราะห์ของพวกเขา.
ข้างแอลกอฮอล์สูงกว่าการก่อตัวของเอสเทอได้ศึกษา.
เอสเตอร์ทั้งหมดสังเคราะห์ค่อนข้างช้าในช่วง ชี้แจง
ระยะการเจริญเติบโต (รูปที่. 4) ความเข้มข้นสุดท้ายของเอสเทอระเหย
จะแสดงในตารางที่ 2 และรูป 5A ผลกระทบของการเติมกรดอะมิโน
ในการผลิตเอสเตอร์ต่าง ๆ ขึ้นอยู่กับเอสเตอร์ ความแตกต่างมากที่สุด
ระหว่างรูปแบบต่างๆของการก่อตัวเอสเตอร์มีขนาดเล็กมาก.
อย่างไรก็ตามการวิเคราะห์ทางสถิติเผยผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญของ
การเสริมอาหารด้วยกรดอะมิโนในวันที่ 2-methylbutyl ก่อน้ำนม
ยกเว้นนอกจาก cysteine นอกจากนี้ของไอโซลิวซีนโดยเฉพาะอย่างยิ่ง
ที่เกิดจากการเพิ่มขึ้นมากในความเข้มข้นของ 2 methylbutyl
อะซิเตท นอกจากนี้ยังพบว่านอกเหนือจาก leucine ทำให้เกิด
การเพิ่มขึ้นของการผลิตอะซิเตท isoamyl อย่างไรก็ตามการเพิ่ม valine ไม่
ได้มีผลต่อการก่อตัวอะซิเตท Isobutyl การผลิตที่เพิ่มขึ้นของ
อะซิเตท 2 methylbutyl และอะซิเตท isoamyl อาจจะมีสาเหตุมาจาก
ระดับสูงของบิวทานอ 2-methyl, เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isoamyl และ acetyl-CoA.
โมเลกุลเหล่านี้เป็นสารตั้งต้นที่จำเป็นสำหรับการก่อตัว
ของเอสเทออะซิเตทโดย acetyltransferases เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (เวียนา, กิล Genoves,
Valles และ Manzanares 2008) อะมิโนเสริมกรดที่เกิดจากการ
ลดลงของโลกในการผลิตเอทิลอะซิเตทในการเปรียบเทียบกับ
การหมักมาตรฐาน การผลิตที่ลดลงของเอทิลอะซิเตท
อาจมีสาเหตุมาจากการแข่งขันสำหรับ acetyl-CoA ซึ่งจะ
ยังจำเป็นสำหรับการสังเคราะห์เอสเทออะซิเตทอื่น ๆ ผลการวิจัยที่คล้ายกัน
ได้รับรายงานแล้ว (ลียูเคอร์แร & หลิว 2011).
Cysteine, วาลีน, กลูตาและโพรลีนนอกจากนี้ยังลด
การก่อตัวของเอทิล hexanoate นอกจากนี้จากโพรลีนโดยเฉพาะอย่างยิ่ง
การลดลงอย่างมีนัยสำคัญความเข้มข้นของเอทิล hexanoate
(ตารางที่ 2) Saerens et al, (Saerens et al., 2008b) ได้รายงานว่าการ
เพิ่มขึ้นของระดับไนโตรเจนทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นของขนาดใหญ่ใน
การก่อตัวของเอสเทอ acetate กว่าในการก่อตัวของเอสเทอเอทิล.
ผลที่ได้นี้ได้รับการยืนยันในส่วนการศึกษาของเรา โดยทั่วไปอะมิโน
เสริมกรดทั้งช่วยเพิ่มหรือลดการก่อตัว
ของเอสเทอบาง ซึ่งแตกต่างจากความเข้มข้นรวมของแอลกอฮอล์สูงกว่า
ความเข้มข้นของเอสเตอร์ทั้งหมดจะไม่ได้รับผลกระทบจากการเสริมกรดอะมิโน
เพราะความเข้มข้นต่ำของน้ำนม นี้
อาจจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงที่อาจเกิดขึ้นในเซลล์ acetyl-CoA
ระดับ.
3.3 ผลของการเสริมกรดอะมิโนในระดับการแสดงออกของยีน
การแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับ 15 ในการสังเคราะห์ flavouractive
สารประกอบถูกวัดในกระบวนการหมักทั้งหมด (มะเดื่อ. 3B และ
5B) ภายใต้เงื่อนไขการหมักของเราเราสังเกตนัยสำคัญ
การแปล กรุณารอสักครู่..

จะแสดงในตารางที่ 2 และรูปที่ 3A ในการศึกษานี้ในปริมาณแอลกอฮอล์แอลกอฮอล์ที่มีความเข้มข้นสูงสุดในปลาย fermentations .ส่วนต่างๆของอย่างมีนัยสำคัญในปริมาณที่เกิดแอลกอฮอล์ระดับ นี้คือไม่พิจารณากลไกที่เกี่ยวข้องในเส้นทางที่แน่นอน ( ฮาเซิลวูด et al . , 2008 )เพิ่มขึ้นในระดับที่เป็นผลและพบว่าบิวทานอลไอโซบิวทานอลและ วาลีนเสริมจาก isoleucine ) สามารถในทํานองเดียวกัน อธิบาย นอกจากนี้กรดอะมิโนอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มขึ้นการผลิตของตนสูงกว่าแอลกอฮอล์ ( ตารางที่ 2 ) ก่อนหน้านี้มีการศึกษาแสดงให้เห็นว่ามีการเพิ่มกรดอะมิโนที่แตกต่างกันทั้งในและนอก Saccharomyces ยีสต์ผลิตเพิ่มปริมาณของตนสูงกว่า แอลกอฮอล์ นี้คือโดยการเพิ่มกำลังการผลิตของพวกเขาที่จะมี transaminated aketo สฤษฎ์กรด และลดพวกเขาเพื่อให้ได้แอลกอฮอล์ สุดท้าย( etschmann bluemke , ขาย และ ชเรเดอร์ , 2002 ; ฮาเซิลวูด et al . ,2008 ; Hernandez orte et al . , 2005 ) ในการศึกษานี้ supplementations ซิสเทอีนไม่มีผลต่อการเกิด fusel แอลกอฮอล์ ,ซึ่งอาจเป็นเพราะน้อยเพิ่มความเข้มข้นของกรดอะมิโน .ซีสเตอีนในทั่วไปจะไม่อุดมสมบูรณ์มากในเบียร์สาโท ( KR และเยอรมัน& ความโกรธ , 1900 ) นอกจากนี้ เพิ่ม ใน การ สร้าง โพรพานอลระดับโลกหลังจากเติมกรดอะมิโนที่แตกต่างกัน คือ ประเมิน( ยกเว้น ไอโซลิวซีน ) วัฒนธรรมกับการเพิ่มและโพรลีนวาลีนและผลิตสูงกว่าปริมาณของโพรพานอลมากกว่าการหมัก ควบคุม ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่ได้อยู่ในข้อตกลงที่สมบูรณ์กับข้อมูลที่รายงานจาก แซร์ดอง และ ancin - การ์ซปิลิกวยต้า ( 2008 ) และ เฮอร์นันเดซ orte ibarz cacho ร่า , , , และ( 2006 ) ที่ยังไม่พบความสัมพันธ์ระหว่างการก่อตัวของแอลกอฮอล์ที่สูงขึ้นและการเสริมกรดอะมิโน .อย่างไรก็ตาม ความแตกต่างเหล่านี้อาจเกิดจากความเป็นจริงศึกษาการใช้ส่วนผสมของกรดอะมิโน ผลของเราแสดงว่า นอกจากกิ่งโซ่กรดอะมิโนโพรลีนและกลูตามีนsupplementations เพิ่มการก่อตัวของแอลกอฮอล์สูงโดยเฉพาะอย่างยิ่ง การก่อตัวของโพรพานอล . ทั่วไป นอกจากนี้ของกรดอะมิโนเดี่ยว มีผลทำให้มีการเพิ่มขึ้นในการดื่มแอลกอฮอล์ fusel ทั้งหมดสมาธิ ( ตารางที่ 2 ) การเปลี่ยนแปลงในโครงสร้างของ fusel แอลกอฮอล์เกิดจากกรดอะมิโนเสริมอาจจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงในเซลล์ตั้งต้น และ intermediates ของน้ําที่เกี่ยวข้องในการสังเคราะห์ของนอกจากแอลกอฮอล์ที่สูงขึ้น , การก่อตัวของเอสเทอร์ที่ศึกษาทั้งหมดเอสเทอร์สังเคราะห์ค่อนข้างช้าในช่วงเลขชี้กำลังระยะการเจริญเติบโต ( รูปที่ 4 ) ส่วนสุดท้ายของเอสเทอร์ที่ระเหยจะแสดงดังตารางที่ 2 และภาพที่หลากหลาย ผลกระทบของการเติมกรดอะมิโนการผลิตเอสเตอร์แตกต่างกัน ขึ้นอยู่กับเอสเตอร์ ความแตกต่างมากที่สุดระหว่างรูปแบบต่างๆของการเกิดเอสเทอร์มีขนาดเล็กมากอย่างไรก็ตาม ผลการวิเคราะห์ทางสถิติพบว่าผลของกรดอะมิโนอะซิเตท 2-methylbutyl supplementations ในการพัฒนา ,ยกเว้นเพิ่มกรดอะมิโน . นอกจากนี้ของ isoleucine , โดยเฉพาะอย่างยิ่งเกิดจากการเพิ่มขนาดใหญ่ในความเข้มข้นของ 2-methylbutylอะซิเทต นอกจากนี้ยังพบว่า นอกจากทำให้ ลูซีนเพิ่มผลผลิตน้ำนมในปริมาณ . อย่างไรก็ตาม การเพิ่มวาลีนทำไม่มีผลต่อการสร้างน้ำนม 2 . การผลิตที่เพิ่มขึ้นของ2-methylbutyl ในปริมาณอะซิเตทและอะซิเตทเป็นอาจเกิดจากระดับสูงของบิวทานอลและพบว่า แอลกอฮอล์ในปริมาณทิล COA .โมเลกุลเหล่านี้เป็นสารจำเป็นสำหรับการสร้างของอะซิเตทเทอร์ โดยแอลกอฮอล์ ( Viana , กิล genoves ฟ้องกลับ ,วอลเลส แอนด์ แมนซานาเรส , 2008 ) กรดอะมิโนเสริมทำให้เกิดทั่วโลกลดลงในการผลิตเอทิลอะซีเตทในการเปรียบเทียบกับแบบมาตรฐาน การผลิตลดลงของเอทิลอะซิเตทอาจเกิดจากการแข่งขันทิล COA ซึ่งเป็นยังเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์เอสเทอร์ , อื่น ๆ ผลคล้ายได้รายงานไปแล้ว ( ลี ยู เคอร์แรน และ หลิว , 2011 )กรดอะมิโนวาลีน , และโพรลีน กลูตาเพิ่มลดลงการก่อตัวของเอทิล hexanoate . นอกจากนี้การเปลี่ยนแปลง โดยเฉพาะในอย่างมีนัยสำคัญลดลงความเข้มข้นของเอทิล hexanoate( ตารางที่ 2 ) saerens et al . ( saerens et al . , 2008b ) ได้รายงานว่าเพิ่มระดับของไนโตรเจนให้เพิ่มขนาดใหญ่ในการก่อตัวของอะซิเตทเทอร์ มากกว่าในการก่อตัวของเอทิลเอสเทอร์ .ผลที่ได้นี้เป็นเพียงบางส่วนได้รับการยืนยันในการศึกษาของเรา ในทั่วไป , กรดอะมิโนกรดเสริมให้เพิ่มหรือลดการเกิดของเอสเทอร์ . ซึ่งแตกต่างจากผลรวมของแอลกอฮอล์ความเข้มข้นสูงความเข้มข้นของทั้งหมด จะไม่ได้รับผลกระทบ โดยการเสริมกรดอะมิโนเพราะความเข้มข้นต่ำของเอทิลอะซิเทต นี้อาจจะเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงที่อาจเกิดขึ้นภายในอะเซอร์ระดับ3.3 . ผลของการเสริมกรดอะมิโนในระดับการแสดงออกของยีนการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องในการสังเคราะห์ 15 flavouractiveสารประกอบเป็นวัดใน fermentations ( Figs 3B และ5B ) ภายใต้สภาวะการหมักของเรา เราสังเกต signi
การแปล กรุณารอสักครู่..
