2. Materials and methods
2.1. Chemicals
Benzene, glycerol, glucose, sucrose, fructose, toluene, ethyl benzene,
xylene (mixture of isomers), chloroform and ethanol, were
provided from Merck Company, all in analytical grade. Olive oil was
purchased from Vital Oil Company in Spain. Gachsaran (API = 32.1)
and Soroosh crude oils (API = 18.5) were selected from two main
oil fields in the south of Iran to represent the light and heavy crude
oil samples. All other chemicals were also of analytical grade and
purchased from Merck Company.
2.2. Bacteria
Biosurfactant producing strains that were found to be active
under extreme environmental conditions were isolated from samples
of Soroosh crude oil-contaminated soil using Pokethityook
et al. medium [24]. The isolation, screening and selection program
of the biosurfactant producing bacteria were performed in
the Shiraz University Institute of Biotechnology. Samples of the
heavy crude oil-contaminated soil were collected in pre-sterilized
glass bottles and transported to the laboratory for analyses. Enrichment
of the bacterial cultures was done using a serial dilution-agar
plating technique on nutrient agar medium. The isolated bacteria
were characterized by using standard biochemical tests and 16S
rDNA analysis (API 20E kit, Biomérieux, Mercy, France). The screening
procedure resulted in three pure cultures which belonged
to the genera Enterobacter cloacae, Enterobacter sakazakii and
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สารเคมี
เบนซิน กลีเซอรอล กลูโคส ซูโครส ฟรักโทส เอทิลเบนซีน โทลูอีน , ไซลีน ,
( ส่วนผสมของสารอินทรีย์ ) คลอโรฟอร์มและเอทานอล )
ให้จากบริษัทเมอร์คทั้งหมดในการวิเคราะห์ระดับ น้ำมันมะกอกถูก
ซื้อจากบริษัทน้ำมันสำคัญในสเปน gachsaran ( API = 32.1 )
soroosh และน้ำมันดิบ ( API = 18.5 ) ได้รับเลือกจากสองหลัก
น้ำมันในตอนใต้ของอิหร่านที่จะเป็นตัวแทนของ แสง และ ตัวอย่างดิบ
หนักน้ำมัน สารเคมีอื่น ๆนอกจากนี้ยังวิเคราะห์ที่ซื้อมาจาก บริษัท เมอร์ค เกรดและ
.
2.2 . แบคทีเรีย
) ผลิตสายพันธุ์ที่พบจะอยู่ภายใต้สภาวะแวดล้อมที่รุนแรงได้
ที่แยกได้จากตัวอย่างดินที่ปนเปื้อนด้วยน้ำมัน soroosh pokethityook
et al . กลาง [ 24 ]การแยก , การคัดกรองและเลือกโปรแกรม
ของสารลดแรงตึงผิวแบคทีเรียที่ผลิตได้ใน
Shiraz มหาวิทยาลัยสถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ ตัวอย่างของ
น้ำมันดิบหนักปนเปื้อนดินเก็บตัวก่อนฆ่าเชื้อ
ขวดแก้วและส่งไปยังห้องทดลองสำหรับวิเคราะห์ข้อมูล เสริม
ของวัฒนธรรมแบคทีเรีย โดยใช้อนุกรม agar dilution
การชุบแบบปานกลาง NUMB3RS . การแยกแบคทีเรีย
มีลักษณะโดยใช้การทดสอบทางชีวเคมี มาตรฐาน และการวิเคราะห์ 16S rDNA
( API 20e ชุด biom é rieux , ความเมตตา , ฝรั่งเศส ) ภาพยนตร์
ขั้นตอนส่งผลให้เกิดสามเชื้อบริสุทธิ์ซึ่งเป็นของ
กับสกุลเชื้อ Enterobacter sakazakii อย่างมีนัยสำคัญ , และ
การแปล กรุณารอสักครู่..
