The frozen samples were directly im

The frozen samples were directly immersed in Carnoy solution and stored at −20 °C for 2.5 h. The same solution was used for the fixation of the fresh unfrozen samples and they were stored at 4 °C for 2.5 h. After fixation, the samples were immersed in pure ethanol for 24 h at −20 °C (4 °C for unfrozen meat) and subsequently brought to room temperature for another 24 h. Following this dehydration step, the samples were immersed in 3 baths of pure toluene (for 60, 60 & 60 min) and then immersed in a bath of pure paraffin at 59 °C overnight. At the end of this stage each sample was embedded in paraffin in order to be trapped in paraffin blocks. Slices (3 μm thickness) were acquired transversally to the fibers of the muscle from the blocked samples with the use of a rotary microtome from the middle height of the sample (Microm HM 340E, Thermo Scientific, Massachusetts, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างน้ำแข็งถูกแช่อยู่ใน Carnoy โซลูชันโดยตรง และเก็บไว้ที่ −20 ° C ใน 2.5 h ใช้โซลูชันเดียวกันสำหรับปฏิกิริยาการตรึงตรึงอย่างสด และพวกเขาถูกเก็บไว้ที่ 4 ° C ใน 2.5 h หลังจากเบี ตัวอย่างถูกแช่อยู่ในเอทานอลบริสุทธิ์ใน 24 ชมที่ −20 ° C (4 ° C สำหรับตรึงเนื้อ) และต่อมากับอุณหภูมิห้องในอีก 24 ชม ตามขั้นตอนนี้การคายน้ำ ตัวอย่างถูกแช่อยู่ในอ่างอาบน้ำ 3 ของโทลูอีนบริสุทธิ์ (สำหรับ 60, 60 และ 60 นาที) แล้ว ไปในห้องน้ำของพาราฟินบริสุทธิ์ที่ 59 ° C ค้างคืน เมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้ แต่ละอย่างถูกฝังในพาราฟินเพื่อติดในบล็อกพาราฟิน ชิ้น (3 μm หนา) ได้มา transversally กับเส้นใยของกล้ามเนื้อจากตัวอย่างถูกบล็อคด้วยการใช้ microtome โรตารี่จากสูงกลางของตัวอย่าง (Microm HM 340E เทอร์โมวิทยาศาสตร์ รัฐแมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างแช่แข็งแช่โดยตรงในการแก้ปัญหา Carnoy และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2.5 ชั่​​วโมง วิธีการแก้ปัญหาเดียวกันถูกนำมาใช้ในการตรึงของตัวอย่าง unfrozen สดและพวกเขาก็เก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2.5 ชั่​​วโมง หลังจากที่ตรึงตัวอย่างที่ถูกแช่อยู่ในเอทานอลบริสุทธิ์เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส (4 องศาเซลเซียสสำหรับเนื้อ unfrozen) และนำมาต่อมาที่อุณหภูมิห้องอีก 24 ชั่วโมง ต่อไปนี้ขั้นตอนการคายน้ำนี้ตัวอย่างที่ถูกแช่อยู่ใน 3 ห้องอาบน้ำของโทลูอีนบริสุทธิ์ (ต่อ 60, 60 และ 60 นาที) และแช่อยู่แล้วในห้องอาบน้ำของพาราฟินบริสุทธิ์ที่ 59 ° C ในชั่วข้ามคืน ในตอนท้ายของขั้นตอนนี้กลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกฝังอยู่ในพาราฟินเพื่อที่จะได้ติดอยู่ในบล็อกพาราฟิน ชิ้น (3 ไมครอนหนา) ได้มา transversally กับเส้นใยกล้ามเนื้อจากตัวอย่างบล็อกที่มีการใช้ microtome หมุนจากความสูงที่ตรงกลางของกลุ่มตัวอย่าง (Microm HM 340E, เทอร์โมวิทยาศาสตร์, Massachusetts, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แช่แข็งโดยแช่ในสารละลายตัวอย่าง carnoy เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 ° C − 2.5 ชั่วโมง โซลูชั่นเดียวกันถูกใช้ในการตรึงของสด unfrozen ตัวอย่างและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C 2.5 ชั่วโมง หลังจากการตรึง ตัวอย่าง ( แช่ในเอทานอลบริสุทธิ์ ตลอด 24 ชั่วโมง ที่− 20 ° C ( 4 เมตร C เนื้อ unfrozen ) และต่อมาทำให้อุณหภูมิห้องอีก 24 ชั่วโมงต่อไปนี้การขั้นตอน ตัวอย่าง ( แช่ใน 3 อาบน้ำของโทลูอีนบริสุทธิ์ ( 60 , 60 & 60 นาที ) แล้วแช่ในอ่างพาราฟินบริสุทธิ์ที่ 59 ° C ในชั่วข้ามคืน เมื่อจบขั้นตอนนี้แต่ละตัวอย่างถูกฝังในพาราฟิน พาราฟิน เพื่อติดในบล็อกชิ้น ( 3 μม. หนา ) ได้มา transversally ให้เส้นใยของกล้ามเนื้อ จากบล็อก ตัวอย่างการใช้งานของเครื่องตัดชิ้นเนื้อหมุนจากกึ่งกลางความสูงของตัวอย่าง ( microm HM 340e , เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , Massachusetts , USA )