Authentication of Medicinal Termina

Authentication of Medicinal Terminalia Species, Their
Crude Drugs and Triphala Formulations Vast improvements
in the identification and analysis of SNPs in plants
were noted in last ten years. Such methods as PCR-RFLP and
ARMS, which use PCR markers based on SNPs, have been
adopted for the authentication of herbs.
Of the Terminalia samples collected in Thailand, five had
medicinal value, including T. chebula var. chebula, T. chebula
var. nana, T. citrina, T. bellirica, and T. catappa. We subjected
T. chebula var. chebula, T. bellirica, and T. catappa to PCRRFLP
analysis. Because, examination of the aligned nucleotide
sequences in the ITS1-5.8S-ITS2 regions revealed almost
identical nucleotide sequences in T. chebula var. chebula, T.
chebula var. nana, and T. citrina. Therefore, the PCR-RFLP
method could not differentiate them. The amplified fragments
of these three Terminalia species and P. emblica were approximately
800 bp long. The nucleotide sequences showed
species-specific sequences at sites subjected to the restriction
enzyme analysis. To exclude T. catappa, the XspI restriction
enzyme was used for diagnosis. Three fragments distinct to T.
catappa were found. XspI recognized 5-CTAG-3, which was
found in the ITS region of T. catappa only at two sites, whereas
T. chebula var. chebula, T. bellirica, and P. emblica could
not to be digested at the same sites. XspI digestion cleaved
the nucleotide sequence of T. catappa was cleaved into three
amplicons that were approximately 200, 408, and 200 bp long
(Fig. 1A). The cleaved products of T. catappa appeared as two
bands in 3.0% Tris–acetate–ethylenediaminetetraacetic acid
(TAE) agarose gel electrophoretogram (Fig. 3A). Then, to
discriminate T. chebula var. chebula, T. bellirica, and P. emthe specific nucleotides in the three species. It was found that
Aor13HI recognized 5ʹ-TCC GGA-3ʹ. As shown in Fig. 3B, the
amplified sequence of T. bellirica was cleaved into two fragments
that were approximately 550 and 250 bp long, and that
of T. chebula var. chebula was cleaved into three fragments
that were approximately 200, 350, and 250 bp long, P. emblica
could not to be digested by the same restriction enzyme.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รับรองความถูกต้องของสายพันธุ์สมุนไพรในหูก ของพวกเขาน้ำมันดิบยาตรีผลาสูตรใหญ่ปรับปรุงและในการระบุและการวิเคราะห์ของ SNPs ในพืชถูกตั้งข้อสังเกตในเวลา 10 ปี วิธีดังกล่าวเป็น PCR-RFLP และแขน ที่ใช้เครื่องหมาย PCR อิง SNPs ได้รับนำมาใช้สำหรับการรับรองความถูกต้องของสมุนไพรตัวอย่างหูกเก็บในประเทศไทย 5 มีค่ายา รวม T. chebula var. chebula, T. chebulaนานา var., T. citrina, T. bellirica และต.วาง เราต้องทำT. chebula var. chebula, T. bellirica และต.วางเพื่อ PCRRFLPการวิเคราะห์ เพราะ การสอบของนิวคลีโอไทด์ที่ชิดลำดับ ITS1-5.8S-ITS2 ภูมิภาคเผยเกือบต. chebula var. chebula, T. ลำดับนิวคลีโอไทด์เหมือนกันchebula var. นานา และต. citrina ดังนั้น การ PCR-RFLPวิธีอาจแตกต่างไป ส่วนขยายของหูกเหล่านี้สาม ชนิดและ P. กระชับรูขุมขนได้ประมาณ800 ยาว bp ลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่พบสายลำดับที่ไซต์ภายใต้การข้อจำกัดการวิเคราะห์เอนไซม์ การแยกวางต. จำกัด XspIเอนไซม์ถูกใช้สำหรับการวินิจฉัย สามส่วนที่แตกต่างการต.วางพบ XspI 5 - CTAG-3 ซึ่งเป็นที่ยอมรับพบว่าในพื้นที่ของของต.วางเฉพาะที่ไซต์ที่สองT. chebula var. chebula, T. bellirica, P. กระชับรูขุมขน และสามารถไม่สามารถย่อยได้ที่ไซต์เดียวกัน ย่อยอาหาร XspI แหวกต.วางลำดับนิวคลีโอไทด์ถูกแบ่งออกเป็นสามamplicons ที่ประมาณ 200, 408 และ 200 bp นาน(รูปที่ 1A) ผลิตภัณฑ์ของต.วาง cleaved ปรากฏเป็นสองวงดนตรีใน 3.0% กรดทริสเรทติ้ง – อะซิเตท-ethylenediaminetetraacetic(เต้) agarose เจ electrophoretogram (รูปที่ 3A) แล้ว การแยกแยะ T. chebula var. chebula, T. bellirica และ P. emthe เฉพาะนิวคลีโอไทด์ในสามสายพันธุ์ จะพบว่าAor13HI รู้จัก 5ʹ TCC GGA-3ʹ ดังแสดงในรูปที่ 3B การขยายลำดับของ T. bellirica ถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนที่ได้ประมาณ 550 และ 250 bp นาน และที่ของ T. chebula var. chebula ถูกแบ่งออกเป็นสามส่วนที่ได้ประมาณ 200, 350 และ 250 bp นาน P. กระชับรูขุมขนอาจจะไม่ถูกย่อย โดยเอนไซม์จำกัดเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รับรองความถูกต้องของสมุนไพร Terminalia พันธุ์ของพวกเขา
ยาเสพติดมันดิบและ Triphala สูตรปรับปรุงมากมาย
ในการระบุและการวิเคราะห์ SNPs ในพืช
ได้รับการบันทึกไว้ในช่วงสิบปีที่ผ่านมา วิธีการเช่น PCR-RFLP และ
แขนซึ่งใช้เครื่องหมาย PCR ขึ้นอยู่กับ SNPs ได้รับการ
รับรองสำหรับการรับรองความถูกต้องของสมุนไพร.
จากตัวอย่างที่เก็บรวบรวม Terminalia ในประเทศไทยห้ามี
ค่ายารวมทั้ง T. chebula var chebula ตัน chebula
var นานา, T. citrina ตัน bellirica และ T. catappa เราอยู่ภายใต้
ตัน chebula var chebula ตัน bellirica และ T. catappa เพื่อ PCRRFLP
วิเคราะห์ เพราะตรวจสอบการเบื่อหน่ายชิด
ลำดับในภูมิภาค ITS1-5.8S-ITS2 เผยเกือบ
ลำดับเบสเหมือนกันในที chebula var chebula ตัน
chebula var นานาและ T. citrina ดังนั้น PCR-RFLP
วิธีการไม่สามารถแยกความแตกต่าง ชิ้นส่วนขยาย
ของทั้งสามสายพันธุ์ Terminalia พีมะขามป้อมประมาณ
800 bp ยาว ลำดับเบสที่แสดงให้เห็นว่า
ลำดับเฉพาะสายพันธุ์ที่เว็บไซต์ภายใต้ข้อ จำกัด
การวิเคราะห์การทำงานของเอนไซม์ หากต้องการยกเว้น T. catappa, ข้อ จำกัด XspI
เอนไซม์ที่ใช้ในการวินิจฉัยโรค สามเศษเล็กเศษน้อยแตกต่างกันไปที
catappa ถูกพบ ได้รับการยอมรับ XspI 5? -CTAG-3 ?, ซึ่งถูก
พบในภูมิภาคของ T. catappa เพียงสองเว็บไซต์ในขณะ
ที chebula var chebula ตัน bellirica และพีมะขามป้อมอาจ
จะไม่ถูกย่อยในสถานที่เดียวกัน XspI ย่อยอาหารเกาะติด
ลำดับเบสของ T. catappa ถูกแยกออกเป็นสาม
amplicons ที่ประมาณ 200, 408, และ 200 bp ยาว
(รูป. 1A) ผลิตภัณฑ์ cleaved ที catappa ปรากฏเป็นสอง
วงดนตรีในระดับ 3.0% Tris-acetate-Ethylenediaminetetraacetic กรด
(TAE) agarose เจล electrophoretogram (รูป. 3A) จากนั้นจะ
แตกต่าง T. chebula var chebula ตัน bellirica และพี emthe นิวคลีโอที่เฉพาะเจาะจงในสามชนิด มันก็พบว่า
Aor13HI ได้รับการยอมรับ 5'-TCC-GGA 3' ดังแสดงในรูป 3B ที่
ลำดับขยายของ T. bellirica ถูกแยกออกเป็นสองชิ้นส่วน
ที่มีประมาณ 550 และ 250 bp ยาวและที่
ที chebula var chebula ถูกแยกออกเป็นสามชิ้นส่วน
ที่มีประมาณ 200, 350, 250 และระยะยาว BP, P. มะขามป้อม
อาจจะไม่ถูกย่อยโดยเอนไซม์ จำกัด เดียวกัน