The reaction mixture (50 l) consis

The reaction mixture (50 l) consisted of: 20 ng of fungal DNA,
400 nM of each primer, 250 nM of each dNTP, 2 mM MgCl2, 5 l
10× reaction buffer and 1 U DNA polymerase (VelocityR, Bioline
Ltd, London, UK). The PCR cycling protocols were: denaturation
at 94 ◦C for 5 min followed by 35 cycles of 1 min at 94 ◦C, 1 min
at 58 ◦C, 1 min at 72 ◦C, and a final step of 6 min at 72 ◦C. The
amplification products (5 l) were separated by electrophoresis on 1% agarose gels in 1 × TAE buffer, stained with ethidium
bromide and visualized under UV light. The 100 pb ladder gTPbio size marker was used for electrophoresis (C Viral, Seville,
Spain). The amplicon was excised from the gel and purified using
the Favor/Prep gel/PCR purification mini kit (Favorgen, Vienna,
Austria). Amplification products were sequenced at Stab Vida
(Costa da Caparica, Portugal).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประกอบด้วยส่วนผสมของปฏิกิริยา (50 ลิตร): 20 ฉบับของดีเอ็นเอรา400 nM แต่ละพื้น 250 nM ของ dNTP แต่ละ 2 มม. MgCl2, 5 ลิตรพอลิเมอเรส U DNA 1 (VelocityR, Bioline และบัฟเฟอร์ปฏิกิริยา× 10Ltd ลอนดอน สหราชอาณาจักร) โพรโทคอจักรยาน PCR ถูก: แปรสภาพที่ ◦C 94 5 นาทีตาม ด้วยรอบ 35 ของ 1 นาทีที่ 94 ◦C, 1 นาทีที่ ◦C 58, 1 นาทีที่ 72 ◦C และขั้นตอนสุดท้ายของ 6 นาทีที่ 72 ◦C การขยายผลิตภัณฑ์ (5 ลิตร) ถูกคั่น โดยอิบนเจ 1% agarose ในโรง TAE 1 ×บัฟเฟอร์ ย้อม ด้วย ethidiumโบรไมด์และมองเห็นภายใต้แสงยูวี Pb ขนาด gTPbio บันไดเครื่องหมาย 100 ใช้สำหรับอิ (ไวรัส C เซบีญาประเทศสเปน) Amplicon การแก้ไขสรรพสามิตจากเจ และบริสุทธิ์โดยใช้กระป๋อง/เตรียม เจ/PCR ฟอกมินิชุด (Favorgen เวียนนาประเทศออสเตรีย) ขยายผลิตภัณฑ์ถูกเรียงลำดับใน Vida แทง(Da costa Caparica โปรตุเกส)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผสมปฏิกิริยา (50 ลิตร) ประกอบด้วย: 20 NG ของดีเอ็นเอของเชื้อรา
? 400 นิวตันเมตรแต่ละไพรเมอร์ 250 นิวตันเมตรแต่ละ dNTP, 2 mm MgCl2, 5 ลิตร
10 ×บัฟเฟอร์เกิดปฏิกิริยาและ 1 U DNA Polymerase (VelocityR, Bioline
จำกัด ลอนดอนสหราชอาณาจักร) โปรโตคอลการขี่จักรยานเป็นวิธี PCR: denaturation
ที่ 94 ◦Cเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 35 รอบที่ 1 นาทีที่ 94 ◦C, 1 นาที
ที่ 58 ◦C, 1 นาทีที่ 72 ◦Cและเป็นขั้นตอนสุดท้ายของ 6 นาทีที่ 72 ◦ ซี
ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียง (5? L) ถูกแยกจากกันโดย electrophoresis บน 1% agarose เจลใน 1 × TAE บัฟเฟอร์ย้อมด้วย ethidium
bromide และมองเห็นภายใต้แสงยูวี 100 PB บันได gTPbio เครื่องหมายขนาดที่ใช้สำหรับ electrophoresis (C ไวรัส, เซบียา,
สเปน) amplicon ถูกตัดจากเจลบริสุทธิ์โดยใช้
โปรดปราน / เตรียมเจล / PCR ชุดฟอกมินิ (Favorgen เวียนนา
ออสเตรีย) ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงที่มีลำดับขั้นตอนแทง Vida
(Costa da Caparica, โปรตุเกส)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปฏิกิริยาผสม ( 50 ลิตร ) จำนวน : 20 นาโนที่มีดีเอ็นเอ400 nm ของแต่ละคู่ ของแต่ละ dntp 250 nm , 2 มม. ชุด 5 ลิตรบัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 10 × 1 u DNA polymerase ( velocityr bioline ,จำกัด , ลอนดอน , UK ) ร่วมจักรยานโปรโตคอล ( ) :ที่◦ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 ◦ C , 1 นาที58 ◦ C 1 นาทีที่ 72 ◦องศาเซลเซียส และในขั้นตอนสุดท้ายของ 6 นาทีที่ 72 ◦ C .ผลิตภัณฑ์ขยาย ( 5 ลิตร ) ถูกแยกโดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีสบน 1% ในบัฟเฟอร์ เทเจล ( 1 ×ย้อมด้วยคู่โบรไมด์และมองเห็นภายใต้แสงยูวี 100 PB บันได gtpbio ขนาดเครื่องหมายใช้ electrophoresis ( C ไวรัส เซบียาสเปน ) ที่และถูกตัดจากเจลและบริสุทธิ์ใช้กระป๋อง / / เตรียมเจล PCR Kit Mini บริสุทธิ์ ( favorgen เวียนนาออสเตรีย ) ผลิตภัณฑ์ขยายเป็นลำดับที่แทง วิดา( Costa da Caparica , โปรตุเกส )