The biochemical characterization and identification of Bacillus cereus isolates using the Microgen Bacillus-ID System revealed that all the isolates fermented Trehalose and most of them fermented Sucrose. Also, all the isolates were positive to voges proskauer, arginine dihydrolase and nitrate reduction tests (Table 2). They were all confirmed Bacillus cereus. The zone of hydrolysis of Bacillus cereus on nutrient agar plates that were supplemented with starch showed that SB2 had the largest zone of hydrolysis of 12mm while the reference strain and SB7 had the smallest zones of hydrolysis of 6.0 mm (Figure 1). Also, the amylase activities of the isolates in amylase production media as shown on Table 3 revealed that SB2 also had the highest amylase activity of 1.62U/ml while the reference strain had the lowest amylase activity. The variation in zone of hydrolysis and amylase activities of the isolate could be due to difference in genetic makeup of microorganisms belonging to the same genera and species; it could also be due to the fact that the isolates were obtained from different environments which made them displayed different zones of hydrolysis and amylase activities.
The effect of incubation time on amylase production showed that 24hrs was the optimum
duration for maximum amylase activity (Table 4). This might be because; after 24hrs, the cells may have reached the decline phase and displayed low amylase synthesis (Sivakumar et al., 2012). In this study the amylase production by Bacillus cereus was found to be maximum at pH 6.5 as shown on Table 4. Further increase in the pH resulted in a decrease in the amylase activity. When pH is altered below or above the optimum, the amylase activity is decreased or becomes denatured ((Vidyalakshmi et al., 2009). Different organisms have different pH optima and decrease or increase in pH on either side of the optimum value results in poor microbial growth (Ramesh and Lonsane, 1991). Ellaiah et al. (2002) stated that at high pH, the metabolic activity of bacterium may be suppressed and thus it inhibits enzyme production.
Maximum amylase activity was recorded at 4% inoculums concentration as shown on Table
5. Further increase in inoculums concentration resulted in a decrease in amylase activity. An
inoculums concentration higher than the optimum value may produce a high amount of biomass
which will rapidly deplete the nutrients necessary for growth and product synthesis. On the other
hand lower inoculums levels may give insufficient biomass and allow the growth of undesirable
organisms in the production medium (Sivakumar et al., 2012).
The effect of varying incubation temperature on starch hydrolysis by Bacillus cereus (SB2) revealed that maximum amylase production was obtained at 35oC (Table 5). Similar optimum temperature (35oC) was observed for the production of amylase from banana stalk using Bacillus subtilis as reported Chandrasekaran et al. (2012). Further increase in incubation temperature decreased the production of enzyme. Production of the enzyme started reducing at 40°C. This might be due to the fact that at high temperatures, the growth of the bacteria is usually inhibited and hence, enzyme formation is also reduced.
The result of the student t-test carried out (using SPSS version 17) to compare the mean
values of the amylase activities of the SB2 under optimized and non-optimized conditions revealed that significant difference exists from day 1 to day 4 at PS0.05. Under non-optimized conditions (pH 6.5, temperature 370C, and inoculums size 5%) amylase activity of 2.1mg/ml was obtained after 24hrs incubation whereas under optimized conditions (pH 6.5, temperature 35°C, inoculums size 4%), 1.3 fold amylase activities (2.85 mg/ml) was enhanced when compared with non-optimized conditions indicating the importance of optimization of cultural parameters on amylase synthesis. Maximum amylase activity of 2.56U/ml) was produced by SB2 in this research work which is higher than the amylase activity (1.3U/ml) obtained by Dipali and Argit (2012) when they produced amylase in submerged fermentation using Bacillus specie. SB2 is therefore a potential isolate for industrial production of amylase.
Conclusions
The results obtained in the present study indicated Bacillus cereus SB2 as a potential strain for 7-amylase production. Since Bacillus cereus SB2 has simple nutritional requirements and can produce a good enzyme yield, this isolate could be exploited for 7-amylase production in submerged conditions using soluble starch as carbon source.
ลักษณะทางชีวเคมีและบัตรประจำตัวของเชื้อ Bacillus cereus แยกโดยใช้ระบบ Microgen Bacillus-ID เปิดเผยว่าไอโซเลททุกหมัก Trehalose และส่วนใหญ่ของพวกเขาซูโครสหมัก นอกจากนี้ไอโซเลททุกคนบวกกับ Voges Proskauer, อาร์จินี dihydrolase และการทดสอบการลดไนเตรต (ตารางที่ 2) พวกเขาทั้งหมดได้รับการยืนยันเชื้อ Bacillus cereus โซนของการย่อยสลายของเชื้อ Bacillus cereus บนจานอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารที่ได้รับการเสริมด้วยแป้งแสดงให้เห็นว่า SB2 มีโซนที่ใหญ่ที่สุดของการย่อยสลายของ 12mm ในขณะที่สายพันธุ์อ้างอิงและ SB7 มีโซนที่เล็กที่สุดของการย่อยสลายของ 6.0 มิลลิเมตร (รูปที่ 1) นอกจากนี้กิจกรรมอะไมเลสของเชื้อในการผลิตสื่ออะไมเลสดังแสดงในตารางที่ 3 เปิดเผยว่า SB2 ยังมีกิจกรรมอะไมเลสที่สูงที่สุดของ 1.62U / ml ในขณะที่สายพันธุ์อ้างอิงมีกิจกรรมอะไมเลสที่ต่ำที่สุด การเปลี่ยนแปลงในโซนของการย่อยสลายและกิจกรรมของอะไมเลสแยกอาจเป็นเพราะความแตกต่างในการแต่งหน้าทางพันธุกรรมของเชื้อจุลินทรีย์ที่อยู่ในจำพวกเดียวกันและสายพันธุ์; มันก็อาจจะเป็นเพราะความจริงที่ว่าเชื้อที่ได้รับจากสภาพแวดล้อมที่แตกต่างกันซึ่งทำให้พวกเขาแสดงโซนที่แตกต่างกันของการย่อยสลายและอะไมเลสกิจกรรม.
ผลของเวลาการบ่มในการผลิตอะไมเลสแสดงให้เห็นว่า 24 ชั่วโมงเป็นที่ดีที่สุด
ในช่วงระยะเวลากิจกรรมที่อะไมเลสสูงสุด (ตารางที่ 4 ) นี้อาจจะเป็นเพราะ; หลังจาก 24Hrs, เซลล์อาจจะไปถึงขั้นตอนการลดลงและแสดงการสังเคราะห์อะไมเลสต่ำ (Sivakumar et al., 2012) ในการศึกษานี้การผลิตอะไมเลสจากเชื้อ Bacillus cereus ถูกพบว่าเป็นสูงสุดที่ pH 6.5 ตามที่ปรากฏในตารางที่ 4 เพิ่มขึ้นอีกในค่า pH มีผลในการลดลงในกิจกรรมอะไมเลสที่ เมื่อค่า pH คือการเปลี่ยนแปลงด้านล่างหรือข้างต้นที่ดีที่สุดกิจกรรมอะไมเลสจะลดลงหรือกลายเป็นเอทิลแอลกอฮอล์ ((Vidyalakshmi et al., 2009). สิ่งมีชีวิตที่แตกต่างกันมี Optima ค่า pH ที่แตกต่างกันและการลดลงหรือเพิ่มขึ้นในค่า pH ในด้านของค่าผลลัพธ์ที่ดีที่สุดในการที่น่าสงสารอย่างใดอย่างหนึ่ง เจริญเติบโตของจุลินทรีย์ (Ramesh และ Lonsane, 1991). Ellaiah et al. (2002) ระบุว่าที่ pH สูงกิจกรรมการเผาผลาญของแบคทีเรียที่อาจจะเก็บกดจึงยับยั้งการผลิตเอนไซม์.
กิจกรรมอะไมเลสสูงสุดเป็นบันทึกที่ความเข้มข้นของหัวเชื้อแบคทีเรีย 4% ตามที่ปรากฏ ตารางที่
5 เพิ่มขึ้นอีกในความเข้มข้นของหัวเชื้อแบคทีเรียมีผลในการลดลงในกิจกรรมอะไมเลสได้.
ความเข้มข้นของหัวเชื้อแบคทีเรียสูงกว่ามูลค่าที่เหมาะสมอาจเป็นจำนวนเงินที่สูงของชีวมวล
ซึ่งจะหมดสิ้นลงอย่างรวดเร็วสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตและการสังเคราะห์สินค้า. ในอื่น ๆ
ด้านล่าง ระดับหัวเชื้อแบคทีเรียอาจให้ชีวมวลไม่เพียงพอและช่วยให้การเจริญเติบโตของที่ไม่พึงประสงค์
มีชีวิตในระดับปานกลางผลิต (Sivakumar et al., 2012).
ผลของการที่แตกต่างกันอุณหภูมิบ่มในการย่อยสลายแป้งโดยเชื้อ Bacillus cereus (SB2) เปิดเผยว่าการผลิตอะไมเลสสูงสุดได้ที่ 35 องศาเซลเซียส (ตารางที่ 5) อุณหภูมิที่เหมาะสมที่คล้ายกัน (35 องศาเซลเซียส) เป็นข้อสังเกตสำหรับการผลิตอะไมเลสจากก้านกล้วยโดยใช้เชื้อ Bacillus subtilis ตามที่รายงาน Chandrasekaran et al, (2012) เพิ่มขึ้นอีกในอุณหภูมิบ่มการผลิตลดลงของเอนไซม์ การผลิตเอนไซม์เริ่มลดที่ 40 ° C นี้อาจจะเป็นเพราะความจริงที่ว่าที่อุณหภูมิสูง, การเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียที่มักจะยับยั้งและด้วยเหตุนี้การสร้างเอนไซม์จะลดลง.
ผลของนักเรียน t-test ดำเนินการ (โดยใช้โปรแกรม SPSS รุ่น 17) เพื่อเปรียบเทียบค่าเฉลี่ย
ค่า ในกิจกรรมของอะไมเลส SB2 ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดและไม่เหมาะสมเปิดเผยว่าความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่มีอยู่ตั้งแต่วันที่ 1 ถึงวันที่ 4 PS0.05 ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่เหมาะสม (pH 6.5 370C อุณหภูมิและหัวเชื้อแบคทีเรียขนาด 5%) กิจกรรมอะไมเลสของ 2.1mg / ml ที่ได้รับหลังจากการบ่ม 24 ชั่วโมงในขณะที่ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุด (pH 6.5 อุณหภูมิ 35 ° C ขนาดหัวเชื้อแบคทีเรีย 4%) 1.3 พับกิจกรรมอะไมเลส (2.85 mg / ml) คือการเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับเงื่อนไขที่ไม่เหมาะสมแสดงให้เห็นถึงความสำคัญของการเพิ่มประสิทธิภาพของพารามิเตอร์ทางวัฒนธรรมในการสังเคราะห์สารอะไมเลส กิจกรรมอะไมเลสสูงสุด 2.56U / ml) ถูกผลิตโดย SB2 ในงานวิจัยนี้ซึ่งสูงกว่ากิจกรรมอะไมเลส (ที่ 1.3U / ml) ที่ได้จากการ Dipali และ Argit (2012) เมื่อพวกเขาผลิตอะไมเลสในการหมักจมอยู่ใต้น้ำโดยใช้พันธุ์ Bacillus SB2 จึงเป็นแยกที่มีศักยภาพสำหรับการผลิตภาคอุตสาหกรรมของอะไมเลส.
สรุป
ผลที่ได้รับในการศึกษาครั้งนี้ชี้ให้เห็น Bacillus cereus SB2 เป็นสายพันธุ์ที่มีศักยภาพสำหรับ 7 อะไมเลสผลิต ตั้งแต่ Bacillus cereus SB2 มีความต้องการทางโภชนาการที่เรียบง่ายและสามารถผลิตเอนไซม์ที่อัตราผลตอบแทนที่ดีแยกนี้สามารถใช้ประโยชน์ในการผลิต 7 อะไมเลสในสภาพจมอยู่ใต้น้ำโดยใช้แป้งที่ละลายน้ำได้เป็นแหล่งคาร์บอน
การแปล กรุณารอสักครู่..

ส่วนลักษณะทางชีวเคมีและการจำแนกชนิดของเชื้อ Bacillus cereus โดยใช้ microgen Bacillus รหัสระบบ พบว่า ทั้งจากการหมักและส่วนใหญ่ของพวกเขาจากซูโครส นอกจากนี้ ทุกสายพันธุ์เป็นบวก Voges proskauer dihydrolase , อาร์จินีนและการทดสอบการลดไนเตรท ( ตารางที่ 2 ) พวกเขาทั้งหมดยืนยัน Bacillus cereus . ในโซนของเอนไซม์ของ Bacillus cereus ในอาหารวุ้นที่ถูกเสริมด้วยแผ่นแป้ง พบว่า sb2 มีโซนที่ใหญ่ที่สุดของการย่อยสลายของ 12mm ในขณะที่อ้างอิงเมื่อยและ sb7 มีโซนที่เล็กที่สุดของการย่อยสลายของ 6.0 มม. ( รูปที่ 1 ) นอกจากนี้ จากกิจกรรมต่างๆ ของเชื้อในการผลิตสื่อเลสดังตารางที่ 3 เปิดเผยว่า sb2 ได้สูงสุดจากกิจกรรมของ 1.62u/ml ในขณะที่การอ้างอิงสายพันธุ์มีกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสที่ถูกที่สุด การเปลี่ยนแปลงในโซนของเอนไซม์อะไมเลสและกิจกรรมของแยก อาจเนื่องจากความแตกต่างในการแต่งหน้าทางพันธุกรรมของจุลินทรีย์เป็นสกุลเดียวกัน และชนิด มันก็อาจจะเนื่องจากความจริงที่แยกได้จากสภาพแวดล้อมที่แตกต่างกันซึ่งทำให้พวกเขาแสดงโซนที่แตกต่างกันของกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสและ .ผลของเวลาในการบ่มต่อการผลิตเอนไซม์อะไมเลสพบว่าพร้อมเป็นสูงสุดระยะเวลากิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสสูงสุด ( ตารางที่ 4 ) นี้อาจเป็นเพราะ หลังจาก 24 ชั่วโมง เซลล์อาจจะถึงระยะที่แสดงการสังเคราะห์อะไมเลสและลดลงต่ำ ( ( มารยาทของ et al . , 2012 ) ในการศึกษาการผลิตเอนไซม์อะไมเลสจาก Bacillus cereus พบได้สูงสุดที่พีเอช 6.5 ดังตารางที่ 4 เพิ่มใน pH ) พบลดลงจากกิจกรรม เมื่อ pH มีการเปลี่ยนแปลงด้านล่างหรือด้านบนให้เหมาะสม จากกิจกรรมที่ลดลง หรือจะใช้ ( ( vidyalakshmi et al . , 2009 ) สิ่งมีชีวิตต่างมี Optima ระดับพีเอชและลดหรือเพิ่มในค่า pH บนด้านใดด้านหนึ่งของผลค่าที่เหมาะสมในการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่ไม่ดี ( ราเมซ และ lonsane , 1991 ) ellaiah et al . ( 2002 ) ระบุว่า ที่ pH สูง กิจกรรมการสลายของแบคทีเรีย อาจจะเก็บกด และดังนั้นจึง ช่วยยับยั้งการสร้างเอนไซม์กิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสสูงสุดเท่ากับร้อยละ 18 ชั่วโมง เท่ากับที่แสดงบนโต๊ะ5 . เพิ่มใน 18 ชั่วโมงสมาธิมีผลในการลดกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส . เป็น18 ชั่วโมงความเข้มข้นสูงกว่ามูลค่าที่เหมาะสมอาจผลิตได้ปริมาณสูงจากชีวมวลซึ่งจะหมดสิ้นลงอย่างรวดเร็ว สารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตและการสังเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ ในอื่น ๆมือระดับต่ำกว่า 18 ชั่วโมง อาจให้ปริมาณไม่เพียงพอ และช่วยการเจริญเติบโตที่ไม่พึงประสงค์สิ่งมีชีวิตในระดับการผลิต ( ( มารยาทของ et al . , 2012 )ผลของการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิในการย่อยแป้งโดย Bacillus cereus ( sb2 ) เปิดเผยว่า การผลิตเอนไซม์อะไมเลสสูงสุดได้ 35oc ( ตารางที่ 5 ) อุณหภูมิสูงสุดที่คล้ายกัน ( 35oc ) พบว่าในการผลิตเอนไซม์อะไมเลสจากก้านดอกกล้วยใช้ Bacillus subtilis รายงาน chandrasekaran et al . ( 2012 ) เพิ่มอุณหภูมิที่ลดลงในการผลิตเอนไซม์ การผลิตเอนไซม์เริ่มลดอุณหภูมิ 40 องศา นี้อาจจะเนื่องจากที่อุณหภูมิสูงในการเจริญเติบโตของแบคทีเรียมักจะยับยั้งและดังนั้นการสร้างเอนไซม์จะลดลงผลการทดสอบของนักเรียนดำเนินการ ( ใช้รุ่น SPSS 17 ) เปรียบเทียบค่าเฉลี่ยคุณค่าของกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสจาก sb2 ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมและไม่พบว่ามีความแตกต่างจากวันที่ 1 ถึงวันที่ 4 ที่ ps0.05 . ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดไม่ ( pH 6.5 , 370c 18 ชั่วโมง อุณหภูมิและขนาด 5 % ) จากกิจกรรมของ 2.1mg/ml ได้หลังจาก 24 ชั่วโมงในขณะที่ภายใต้เงื่อนไขการบ่มที่ดีที่สุด ( pH 6.5 อุณหภูมิ 35 องศา C , 18 ชั่วโมงขนาด 4 % ) 1.3 เท่ากิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส ( 2.85 มก. / มล. ) เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับเงื่อนไขที่ระบุไม่เหมาะ ความสำคัญของการเพิ่มประสิทธิภาพของพารามิเตอร์ทางวัฒนธรรมในการสังเคราะห์อะไมเลส . กิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสสูงสุด 2.56u / ml ) ผลิตโดย sb2 ในงานวิจัยนี้ซึ่งสูงกว่ากิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส ( 1.3u / มิลลิลิตร ) และได้ dipali argit ( 2012 ) เมื่อพวกเขาผลิตอะไมเลสในการหมักน้ำใช้ Bacillus สายพันธุ์ . sb2 จึงเป็นศักยภาพการผลิตของเอนไซม์อะไมเลสจากโรงงานอุตสาหกรรม .สรุปผลลัพธ์ที่ได้ในการศึกษาครั้งนี้พบว่า Bacillus cereus สายพันธุ์ sb2 เป็นศักยภาพในการผลิต 7-amylase . เนื่องจาก Bacillus cereus sb2 มีความต้องการทางโภชนาการที่ง่าย และสามารถผลิตเอนไซม์ ผลผลิตดี แยกสามารถใช้ประโยชน์เพื่อ 7-amylase การผลิตในสภาวะน้ำละลายแป้งที่ใช้เป็นแหล่งคาร์บอน
การแปล กรุณารอสักครู่..
