2.2. Extraction procedureA. niger s

2.2. Extraction procedure
A. niger strain SS10 was grown on PDA (Difco, USA) at
30 ± 2 C for seven days and obtained as mycelia in a liquid
culture of potato dextrose broth (PDB) (Difco, USA), prepared
as per the manufacturer’s instructions. Aliquots of the
media (250 mL) were decanted into individual 1000-mL Erlenmeyer
flasks, closed with cotton wool stoppers placed over the
flask mouths, and then autoclaved at 121 C and 1.4 kg cm1
for 15 min. After the flask cooled down, the fungal mycelium
on the culture plates was cut in disks, 5 mm in diameter, and
placed in the center of the broth-cultured flask. The cotton
wool stoppers were then wrapped with aluminum foil, sealed
with parafilm, and incubated at 30 ± 2 C (12-h-darkness/
12-h-light cycle) on a rotary shaker for 14 days at 120 rpm
for the culturing of A. niger.
The cultured inoculums of A. niger were processed according
to the extraction procedures, shown in Supplementary
Fig. 1, to collect broth containing both extracellular (excreted
into the medium) and intracellular volatile compounds. Then,
225 mL of ethyl acetate were added into the inoculums cultured
in an Erlenmeyer flask, and the mixture was incubated
overnight to ensure that the fungal cells died. The mixtures
were then applied to UltraTurrax homogenizer for 10 min
(for cell destruction), followed by filtration using a Bu¨chner
vacuum separation funnel. The extracted mycelia (cell debris)
were thrown away, and the filtrate containing the ethyl acetate
phase was collected for further processing.
The ethyl acetate phase was washed with distilled water
twice. The ethyl acetate extracts were diluted in 100-mL each
of methanol and n-hexane to remove fatty acids (polar elements)
and other nonpolar elements. The solvents were then
separated using a Bu¨chner vacuum separation funnel. The solvents
were evaporated at 40 C on a rotary evaporator–shaker
until a 5-mL solvent volume was reached; then this sample was
immediately used for GC–MS analysis or stored in the deep
freezer at 20 C. Each solvent was subjected to three replications
in the experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. Extraction procedureA. niger strain SS10 was grown on PDA (Difco, USA) at30 ± 2 C for seven days and obtained as mycelia in a liquidculture of potato dextrose broth (PDB) (Difco, USA), preparedas per the manufacturer’s instructions. Aliquots of themedia (250 mL) were decanted into individual 1000-mL Erlenmeyerflasks, closed with cotton wool stoppers placed over theflask mouths, and then autoclaved at 121 C and 1.4 kg cm1for 15 min. After the flask cooled down, the fungal myceliumon the culture plates was cut in disks, 5 mm in diameter, andplaced in the center of the broth-cultured flask. The cottonwool stoppers were then wrapped with aluminum foil, sealedwith parafilm, and incubated at 30 ± 2 C (12-h-darkness/12-h-light cycle) on a rotary shaker for 14 days at 120 rpmfor the culturing of A. niger.The cultured inoculums of A. niger were processed accordingto the extraction procedures, shown in SupplementaryFig. 1, to collect broth containing both extracellular (excretedinto the medium) and intracellular volatile compounds. Then,225 mL of ethyl acetate were added into the inoculums culturedin an Erlenmeyer flask, and the mixture was incubatedovernight to ensure that the fungal cells died. The mixtureswere then applied to UltraTurrax homogenizer for 10 min(for cell destruction), followed by filtration using a Bu¨chnervacuum separation funnel. The extracted mycelia (cell debris)กระเด็นออกไป และสารกรองที่ประกอบด้วย acetate เอทิลขั้นตอนรวบรวมประมวลผลต่อไประยะเอทิล acetate ถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นสอง สารสกัดเอทิล acetate ถูกผสมใน 100-mL แต่ละเมทานอลและเอ็นเฮกเซนเอากรดไขมัน (องค์ประกอบขั้วโลก)และองค์ประกอบอื่น ๆ nonpolar หรือสารทำละลายถูกแล้วแยกใช้ปล่องดูดแยก Bu¨chner หรือสารทำละลายได้หายไปที่ 40 C บนที่ evaporator – เชคเกอร์โรตารี่จนถึงระดับเสียงเป็นตัวทำละลาย 5 mL แล้ว อย่างนี้ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ GC – MS หรือเก็บไว้ในทันทีตู้ที่ 20 เซลเซียส ตัวทำละลายแต่ละถูกต้องระยะสามในการทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2
ขั้นตอนการสกัดเอ ไนเจอร์ความเครียด SS10 ปลูกบน PDA (Difco, USA) ที่
30 ± 2
องศาเซลเซียสเป็นเวลาเจ็ดวันและได้รับเป็นเส้นใยในของเหลววัฒนธรรมของน้ำซุปมันฝรั่งเดกซ์โทรส(PDB) (Difco, USA)
จัดทำขึ้นตามคำแนะนำของผู้ผลิต aliquots
ของสื่อ(250 มิลลิลิตร) ถูก decanted ลงในแต่ละ 1,000 มิลลิลิตร Erlenmeyer
ขวด,
ปิดด้วยจุกสำลีวางไว้กว่าปากขวดและเบาแล้ว121 ซีและ 1.4 กก. CM1
เป็นเวลา 15 นาที หลังจากกระติกน้ำเย็นลงเส้นใยของเชื้อราบนจานวัฒนธรรมที่ถูกตัดในดิสก์ 5 มมและวางอยู่ในใจกลางของขวดน้ำซุปเลี้ยงที่ ผ้าฝ้ายstoppers ขนสัตว์ถูกห่อไว้แล้วกับลูมิเนียมฟอยล์ปิดผนึกด้วยparafilm และบ่มที่ 30 ± 2 C (12-H-มืด / วงจร 12 ชั่วโมงแสง) บนเครื่องปั่นหมุนเป็นเวลา 14 วันที่ 120 รอบต่อนาทีสำหรับการเพาะเลี้ยงของA. ไนเจอร์. หัวเชื้อแบคทีเรียที่เพาะเลี้ยงของไนเจอร์เอที่ถูกประมวลผลตามขั้นตอนการสกัดที่แสดงในเสริมรูป 1, การเก็บรวบรวมน้ำซุปที่มีทั้งสาร (ซึมซาบเข้าไปในกลาง) และเซลล์สารระเหย จากนั้น225 มิลลิลิตรเอทิลอะซิเตทที่ถูกเพิ่มเข้ามาในหัวเชื้อแบคทีเรียที่เพาะเลี้ยงในขวดErlenmeyer และส่วนผสมที่ถูกบ่มในชั่วข้ามคืนเพื่อให้แน่ใจว่าเสียชีวิตเซลล์เชื้อรา ผสมถูกนำไปใช้แล้ว UltraTurrax homogenizer เป็นเวลา 10 นาที (สำหรับการทำลายเซลล์) ตามด้วยการกรองโดยใช้ Buchner ช่องทางแยกสูญญากาศ เส้นใยสกัด (มือถือเศษ) ถูกโยนออกไปและการกรองที่มีน้ำนมในขั้นตอนการรวบรวมสำหรับการประมวลผลต่อไป. ระยะน้ำนมที่ได้รับการล้างด้วยน้ำกลั่นเป็นครั้งที่สอง สารสกัดเอทิลอะซิเตถูกเจือจางใน 100 มิลลิลิตรแต่ละเมทานอลและเฮกเซนที่จะเอากรดไขมัน(องค์ประกอบขั้วโลก) และองค์ประกอบอื่น ๆ ที่ไม่มีขั้ว สารละลายจากนั้นก็แยกออกจากกันโดยใช้ช่องทางแยก Buchner สูญญากาศ สารละลายถูกระเหยที่ 40 C ในระเหย-ปั่นหมุนจนตัวทำละลายปริมาณ5 มิลลิลิตรถึง; แล้วตัวอย่างนี้ได้รับการใช้งานได้ทันทีสำหรับการวิเคราะห์ GC-MS หรือเก็บไว้ในลึกแช่แข็งที่20 ซีแต่ละตัวทำละลายได้ภายใต้การสามซ้ำในการทดลอง