Cyclodextrin glycosyltransferase (C

Cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) was covalently coupled to five oxidized polysaccharides differing in structure and chemical nature. The conjugates were evaluated for the retained activity, kinetic and thermodynamic stability. The conjugated CGTase with oxidized dextran (MW 47000) had the highest retained specific activity (70.05%) and the highest half-life (T1/2) at 80 °C. Compared to the native enzyme, the conjugated preparation exhibited higher optimum temperature, lower activation energy (Ea), lower deactivation constant rate (kd), higher T1/2, and higher D values (decimal reduction time) within the temperature range of 60–80 °C. The values of thermodynamic parameters for irreversible inactivation of native and conjugated CGTase indicated that conjugation significantly decreased entropy (ΔS*) and enthalpy of deactivation (ΔH*). The results of thermodynamic analysis for cyclodextrin production from starch indicated that The enthalpy of activation (ΔH*) and free energy of activation (ΔG*), (free energy of transition state) ΔG*E–T and (free energy of substrate binding) ΔG*E–S values were lower for the conjugated CGTase. Similarly, there was significant impact on improvement of kcat, kcat/Km values. Both native and conjugated enzyme produce α-cyclodextrin from starch.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) แก้ไขควบคู่ไปด้วยจะไรด์ออกซิไดซ์ห้าที่แตกต่างกันในโครงสร้างและสารเคมีธรรมชาติ Conjugates ถูกประเมินสำหรับกิจกรรมสะสม เสถียรภาพทางอุณหพลศาสตร์ และเคลื่อนไหว CGTase รวมกับออกซิไดซ์เดกซ์แทรน (MW 47000) มีกิจกรรมสูงสุดสะสมเฉพาะ (มีจำนวน 70.05 ล%) และครึ่งชีวิต (T1/2) สูงสุดที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส เปรียบเทียบกับเอนไซม์พื้นเมือง การเตรียมการขยายแสดงสูงกว่าอุณหภูมิที่เหมาะสม ลดพลังงานกระตุ้น (Ea), การปิดใช้งานค่าคงอัตรา (kd), สูงกว่า T1/2 และค่า D สูงขึ้น (ลดทศนิยมเวลา) ภายในช่วงอุณหภูมิ 60 – 80 ° c ค่าของพารามิเตอร์ทางอุณหพลศาสตร์สำหรับฤทธิ์ CGTase พื้นเมือง และรวมกลับระบุว่า ผันลดลง entropy (ΔS *) และเอนทาลปีของปิด (ΔH *) ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ทางอุณหพลศาสตร์สำหรับ cyclodextrin ผลิตจากแป้งระบุว่า เอนทาลปีของการเปิดใช้งาน (ΔG *), ΔG (พลังงานฟรีของรัฐเปลี่ยน) และเปิดใช้งาน (ΔH *) * E – T และ ΔG (พลังงานอิสระของพื้นผิวรวม) * ค่า E-S ได้ต่ำสำหรับ CGTase รวม ในทำนองเดียวกัน มีผลกระทบสำคัญในการปรับปรุงของ kcat ค่า kcat/Km เอนไซม์ทั้งพื้นเมือง และขยายผลิตα-cyclodextrin จากแป้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(CGTase) เป็นคู่ covalently ถึงห้า polysaccharides ออกซิไดซ์ที่แตกต่างกันในโครงสร้างและลักษณะของสารเคมี คอนจูเกตได้รับการประเมินสำหรับกิจกรรมที่เก็บไว้เกี่ยวกับการเคลื่อนไหวและความมั่นคงทางอุณหพลศาสตร์ ผัน CGTase กับ dextran ออกซิไดซ์ (MW 47000) มีการเก็บรักษาไว้ที่สูงที่สุดกิจกรรมเฉพาะ (70.05%) และครึ่งชีวิตสูงสุด (T1 / 2) ที่ 80 ° C เมื่อเทียบกับการทำงานของเอนไซม์พื้นเมืองเตรียมผันแสดงอุณหภูมิที่เหมาะสมสูงกว่าพลังงานกระตุ้นต่ำ (EA) เสื่อมที่ต่ำกว่าอัตราดอกเบี้ยคงที่ (KD), T1 สูง / 2 และค่า D สูง (เวลาลดทศนิยม) ภายในช่วงอุณหภูมิ 60 80 ° C ค่าของพารามิเตอร์ทางอุณหพลศาสตร์สำหรับการใช้งานกลับไม่ได้ของพื้นเมืองและผัน CGTase ชี้ให้เห็นว่าการผันลดลงอย่างมีนัยสำคัญเอนโทรปี (ΔS *) และเอนทัลปีของการเสื่อม (ΔH *) ผลการวิเคราะห์ทางอุณหพลศาสตร์สำหรับการผลิตสัมพรรคจากแป้งมันชี้ให้เห็นว่าเอนทัลปีของการเปิดใช้งาน (ΔH *) และพลังงานการเปิดใช้งาน (ΔG *), (พลังงานของรัฐการเปลี่ยนแปลง) ΔG * E-T และ (พลังงานฟรีของพื้นผิวที่มีผลผูกพัน) ค่าΔG * e-S ต่ำสำหรับ CGTase ผัน ในทำนองเดียวกันมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการปรับปรุง kcat, kcat ค่า / กิโลเมตร ทั้งเอนไซม์พื้นเมืองและผันผลิตα-จากแป้งมันสัมพรรค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไซโคลเดกซ์ทรินไกลโคซิลทรานสเฟอ ) คือ covalently คู่ 5 จากพอลิแซ็กคาไรด์ที่มีโครงสร้างเคมีและธรรมชาติ การสะสมสารประกอบที่ได้รับการประเมินกิจกรรมการเคลื่อนไหวและความมั่นคง อุณหพลศาสตร์ ส่วนผลิตภัณฑ์เอนไซม์ด้วยออกซิไดซ์ dextran ( 47 , 000 MW ) มีค่ารักษากิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง ( 70.05 % ) และมีค่าสูงสุด ( T1 / 2 ) ที่อุณหภูมิ 80 องศา เมื่อเทียบกับเอนไซม์พื้นเมือง , และการเตรียมแสดงอุณหภูมิสูงที่เหมาะสม ลดพลังงานกระตุ้นต่ำ เสื่อมคงที่เท่ากัน ( KD ) สูงกว่า T1 , / 2 และสูงกว่า D ค่า ( ลดเวลาทศนิยม ) ภายในช่วงอุณหภูมิ 60 – 80 องศา ค่าของพารามิเตอร์ thermodynamic สำหรับการยับยั้งกลับไม่ได้ของพื้นเมืองและผลิตภัณฑ์เอนไซม์ พบว่า การลดลงเอนโทรปี ( Δ S * ) และเอนทัลปีของเสื่อม ( Δ H * ) ผลของการวิเคราะห์อุณหพลศาสตร์สำหรับการผลิตไซโคลเดกซ์ทรินจากแป้งพบว่า เอนทัลปีของการเปิดใช้งาน ( Δ H * ) และพลังงานของการกระตุ้น ( Δ g * ) ( พลังงานของการเปลี่ยนสถานะ ) Δ G * e ( t ) และพลังงาน ( ผูก ) Δ g * e - S ค่าลดลงสำหรับ ผลิตภัณฑ์เอนไซม์ ในทำนองเดียวกันมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการปรับปรุง kcat kcat / km , ค่า ทั้งพื้นเมืองและผลิตภัณฑ์เอนไซม์แอลฟาไซโคลผลิตจากแป้ง