The goal of the present study was t

The goal of the present study was toinve
stigate the effect of different glucose feeding strategies

(batch and fed-batch) on the pDNA productivity of GALG20, a pgi Escherichia coli strain potentially useful in industrial fermentations, which usesthe pentose phosphate pathway (PPP) as the main route for glucose metabolism. The parental strain,MG1655endArecA, and the common laboratory strain, DH5, were used for comparison purposesand pVAX1GFP, a ColE1-type plasmid, was tested as a model. GALG20 produced 3-fold more pDNA(∼141 mg/L) than MG1655endArecA (∼48 mg/L) and DH5 (∼40 mg/L) in glucose-based fed-batchfermentations. The amount of pDNA in lysates obtained from these cells was also larger for GALG20(41%) when compared with MG1655endArecA (31%) and DH5 (26%). However, the final quality ofpDNA preparations obtained with a process that explores precipitation, hydrophobic interaction chro-matography and size exclusion was not significantly affected by strain genotype. Finally, high cell densityfed-batch cultures were performed with GALG20, this time using another ColE1-type plasmid, NTC7482-41H-HA, in pre-industrial facilities using glucose and glycerol. These experiments demonstrated theability of GALG20 to produce high pDNA yields of the order of 2100–2200 mg/L.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เป้าหมายของการศึกษาปัจจุบันถูก toinvestigate ผลของกลูโคสต่างกันที่อาหารกลยุทธ์ (ชุดและชุดงานเลี้ยง) ในผลิต pDNA ของ GALG20, pgi Escherichia coli ต้องใช้อาจมีประโยชน์ในอุตสาหกรรมหมักแหนม ที่ usesthe สฟอสเฟต (PPP) เป็นเส้นทางหลักสำหรับการเผาผลาญกลูโคส สายพันธุ์โดยผู้ปกครอง MG1655 endA recA และ พันธุ์ห้องปฏิบัติการทั่วไป DH5 ใช้สำหรับเปรียบเทียบ purposesand pVAX1GFP, plasmid ชนิด ColE1 ได้รับการทดสอบเป็นแบบ GALG20 ผลิต 3-fold เพิ่มเติม pDNA (∼141 mg/L) มากกว่า MG1655 endA recA (∼48 mg/L) และ DH5 (∼40 mg/L) ในการใช้น้ำตาลในอาหาร-batchfermentations จำนวน pDNA ใน lysates ที่ได้รับจากเซลล์เหล่านี้ยังมีขนาดใหญ่สำหรับ GALG20(41%) เมื่อเปรียบเทียบกับ MG1655 recA endA (31%) และ DH5 (26%) อย่างไรก็ตาม เตรียม ofpDNA คุณภาพขั้นสุดท้ายได้ ด้วยกระบวนการสำรวจฝน โต้ตอบ hydrophobic chro-matography และแยกขนาดได้มากเช่นต้องใช้ลักษณะทางพันธุกรรม สุดท้าย เซลล์สูง densityfed ชุดวัฒนธรรมดำเนินกับ GALG20 เวลานี้ใช้ plasmid ColE1 ชนิดอื่น NTC7482-41H ฮา ในอุตสาหกรรมการใช้กลูโคสและกลีเซอร การทดลองนี้แสดงให้เห็นว่า theability ของ GALG20 ในการผลิตผลผลิตสูง pDNA ลำดับมิลลิกรัม 2100-2200/L.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เป้าหมายของการศึกษาครั้งนี้เป็น toinve
stigate ผลกระทบของกลยุทธ์การให้อาหารกลูโคสที่แตกต่างกัน(batch และอาหารชุด) ในการผลิต pDNA ของ GALG20, PGI Escherichia coli สายพันธุ์อาจมีประโยชน์ในการหมักอุตสาหกรรมซึ่ง usesthe วิถีเพนโตสฟอสเฟต (PPP) ในฐานะ เส้นทางหลักสำหรับการเผาผลาญกลูโคส สายพันธุ์ของพ่อแม่, MG1655? Enda? recA และความเครียดห้องปฏิบัติการทั่วไป, DH5 ?, ถูกนำมาใช้สำหรับการเปรียบเทียบ purposesand pVAX1GFP, พลาสมิด ColE1 ชนิดได้รับการทดสอบเป็นแบบจำลอง GALG20 ผลิต 3 เท่า pDNA เพิ่มเติม (~141 มิลลิกรัม / ลิตร) มากกว่า MG1655? Enda? recA (~48 มิลลิกรัม / ลิตร) และ DH5? (~40 มิลลิกรัม / ลิตร) ในกลูโคสที่ใช้เลี้ยง-batchfermentations ปริมาณของ pDNA ใน lysates ที่ได้จากเซลล์เหล่านี้ก็ยังมีขนาดใหญ่สำหรับ GALG20 (41%) เมื่อเทียบกับ MG1655? Enda? recA (31%) และ DH5? (26%) แต่คุณภาพสุดท้ายเตรียม ofpDNA รับกับกระบวนการที่สำรวจฝนปฏิสัมพันธ์ชอบน้ำ CHRO-matography และการยกเว้นขนาดไม่ได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญโดยพันธุกรรมความเครียด สุดท้ายเซลล์สูงวัฒนธรรม densityfed ชุดได้รับการดำเนินการกับ GALG20 ครั้งนี้โดยใช้พลาสมิดอีก ColE1 ประเภท NTC7482-41H-HA ในสิ่งอำนวยความสะดวกก่อนอุตสาหกรรมโดยใช้กลูโคสและกลีเซอรอล การทดลองนี้แสดงให้เห็นถึง theability ของ GALG20 การผลิตอัตราผลตอบแทน pDNA สูงของคำสั่งของ 2100-2200 มิลลิกรัม / ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป้าหมายของการศึกษาคือ toinve
stigate ผลของกลูโคสที่แตกต่างกันกลยุทธ์การให้อาหาร

( Batch และเฟดแบทช์ ) ใน pdna ผลิตภาพของ galg20 , PGI Escherichia coli สายพันธุ์ที่อาจเป็นประโยชน์ใน fermentations อุตสาหกรรม ซึ่ง usesthe วิถีเพนโตสฟอสเฟต ( PPP ) เป็นเส้นทางหลักสำหรับการเผาผลาญกลูโคส ความเครียดของผู้ปกครอง mg1655  enda  รีก้า และ ห้องปฏิบัติการทั่วไป เมื่อยพบว่ามี  ถูกใช้สำหรับการเปรียบเทียบ purposesand pvax1gfp , พลาสมิดชนิด cole1 ถูกใช้เป็นแบบ galg20 ผลิต 3-fold pdna มากขึ้น ( ∼ 141 มิลลิกรัม / ลิตร ) มากกว่า mg1655  enda  รีก้า ( ∼ 48 มก. / ล. ) และพบว่ามี  ( ∼ 40 มิลลิกรัม / ลิตร ) และกลูโคสจากอาหารใน batchfermentations . จำนวน pdna ใน lysates ได้จากเซลล์เหล่านี้มีขนาดใหญ่ galg20 ( ร้อยละ 41 ) เมื่อเทียบกับ mg1655  enda  รีก้า ( 31% ) และพบว่ามี  ( 26% ) อย่างไรก็ตามสุดท้ายคุณภาพ ofpdna เตรียมได้ด้วยกระบวนการที่เสนอการตกตะกอน การ matography โคร ) และขนาดการยกเว้นไม่มีผลอย่างมากกับความเครียด ในที่สุด เซลล์สูง densityfed วัฒนธรรมโดยมีการ galg20 คราวนี้ใช้อีก cole1 ประเภทพลาส ntc7482-41h-ha , ก่อน , อุตสาหกรรมเครื่องใช้กลูโคสและกลีเซอรอล .การทดลองเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความสามารถของ galg20 ในการผลิตผลผลิตสูงของ pdna 2100 – 2 , 200 มิลลิกรัมต่อลิตร