2. Materials and methods
2.1. Preparation of liquid egg samples
Commercial pasteurized liquid egg white without preservatives
and fresh Grade A shell eggs were purchased from a
local grocery store. Liquid whole egg was made in our lab
by sterilizing the surface of eggs with 70% alcohol, breaking
shells by hand into a stomacher bag and stomaching
at 250 rpm for 30 s. The pH of liquid egg white was 8.20.
The pH of liquid whole egg ranged from 7.50 to 7.65.
Duplicate 1 ml liquid egg white samples or fresh prepared
liquid whole egg samples were plated on tryptic soy agar
(TSA: Difco, Detroit, MI) and incubated at 37 C for
24 h for each experiment to determine the level of background
microorganisms.
2.2. Thermal inactivation apparatus
A new aluminium TDT disk was developed at Washington
State University (Pullman, WA) to allow rapid heating
of samples in water or oil baths and provide close to ideal
isothermal conditions in studies of thermal death kinetics
of microorganisms. Fig. 1 shows the schematic diagram
of the TDT disk. The aluminium test disk consisted of
two parts: a base and a screwed-on cap to allow easy loading
and unloading of the sample. A rubber o-ring between
the two parts provided a hermetic seal. The disk-shaped
cavity is 18 mm in diameter and 4.5 mm height, providing
a sample space of 1.27 ml. A pre-calibrated type K thermocouple
was installed in the center of the TDT disk. The
inside center temperature and outside temperature of the
TDT disk (water bath temperature) were monitored and
recorded by a Fluke 54 II thermometer (Everett, WA)
every second for all experiments. The time/temperature history
was measured for each run using a non-inoculated
sample, and downloaded to a computer. To record a temperature–
time profile of a glass tube, 1 ml liquid egg sample
was added into a glass tube (9 mm diameter by 125 mm
high) and a thermocouple was placed and fixed in the center
of liquid sample. The glass tube was then submerged in
a water bath and temperature–time profiles were recorded.
Before each use, the TDT disks were sanitized using the
following procedure: (1) washed with water, (2) soaked in a
sanitizer (Coverage Plus, E.R. Squibb & Sons, Inc., St.
Louis, MO) for 2 min according to the manufacturer’s
instructions, and (3) rinsed five times with sterile water,
then air dried at room temperature under laminar flow.
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเตรียมการของกลุ่มตัวอย่างไข่ของเหลว
พาณิชย์พาสเจอร์ไรส์ไข่ของเหลวสีขาวไม่มีสารกันบูด
และเกรดสดเปลือกไข่ที่ซื้อมาจาก
ร้านขายของชำในท้องถิ่น ไข่ทั้งของเหลวที่ถูกสร้างขึ้นในห้องปฏิบัติการของเรา
โดยการฆ่าเชื้อพื้นผิวของไข่กับเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 70%, ทำลาย
เปลือกหอยด้วยมือลงในถุง Stomacher และ stomaching
ที่ 250 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 วินาที ค่า pH ของไข่ขาวของเหลวเป็น 8.20.
ค่า pH ของไข่ทั้งของเหลวอยู่ในช่วง 7.50-7.65.
ซ้ำ 1 มิลลิลิตรไข่ของเหลวตัวอย่างสีขาวหรือสีสดที่เตรียมไว้
ของเหลวตัวอย่างไข่ทั้งถูกชุบวุ้นถั่วเหลือง tryptic
(TSA: Difco, ดีทรอยต์, มิชิแกน) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็น
เวลา 24 ชั่วโมงสำหรับแต่ละการทดลองเพื่อตรวจสอบระดับของพื้นหลัง
จุลินทรีย์.
2.2 อุปกรณ์พลังความร้อน
ดิสก์อลูมิเนียม TDT ใหม่ที่ได้รับการพัฒนาขึ้นในวอชิงตัน
มหาวิทยาลัยรัฐ (Pullman, WA) เพื่อให้ความร้อนอย่างรวดเร็ว
ของกลุ่มตัวอย่างในน้ำหรือน้ำมันอาบน้ำและให้ใกล้กับที่เหมาะ
เงื่อนไข isothermal ในการศึกษาจลนพลศาสตร์ตายความร้อน
ของเชื้อจุลินทรีย์ มะเดื่อ. 1 แสดงแผนภาพ
ของดิสก์ TDT ดิสก์ทดสอบอลูมิเนียมประกอบด้วย
สองส่วนฐานและฝาเมาเพื่อช่วยให้การโหลดง่าย
และขนของตัวอย่าง ยาง O-ring ระหว่าง
สองส่วนให้ประทับตราสุญญากาศ ดิสก์รูป
โพรงคือ 18 มิลลิเมตรและมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 4.5 มิลลิเมตรให้
เป็นพื้นที่ตัวอย่าง 1.27 มล. ก่อนการสอบเทียบประเภท K thermocouple
ถูกติดตั้งอยู่ในใจกลางของดิสก์ที่ TDT
อุณหภูมิภายในศูนย์และอุณหภูมิด้านนอกของ
ดิสก์ TDT (อุณหภูมิอ่างน้ำ) ได้รับการตรวจสอบและ
บันทึกไว้โดยความบังเอิญครั้งที่สอง 54 เครื่องวัดอุณหภูมิ (เอเวอเร WA)
ทุกวินาทีสำหรับการทดลองทั้งหมด ประวัติความเป็นมาเวลา / อุณหภูมิ
วัดสำหรับแต่ละทำงานโดยใช้ที่ไม่ใช่เชื้อ
ตัวอย่างและดาวน์โหลดไปยังคอมพิวเตอร์ การบันทึกอุณหภูมิ
รายละเอียดเวลาของหลอดแก้ว 1 มิลลิลิตรตัวอย่างไข่ของเหลว
ถูกบันทึกลงในหลอดแก้ว (9 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง 125 มิลลิเมตร
สูง) และทนถูกวางไว้และคงอยู่ในใจกลาง
ของกลุ่มตัวอย่างที่เป็นของเหลว หลอดแก้วจมอยู่แล้วใน
อ่างน้ำและโปรไฟล์อุณหภูมิเวลาที่ถูกบันทึกไว้.
ก่อนที่จะใช้ในแต่ละดิสก์ TDT ถูกสุขอนามัยโดยใช้
ขั้นตอนต่อไปนี้ (1) ล้างด้วยน้ำ (2) แช่ใน
เจลทำความสะอาด (ครอบคลุมพลัส ER Squibb & Sons, Inc, St.
Louis, มิสซูรี) เป็นเวลา 2 นาทีตามที่ผู้ผลิต
คำแนะนำและ (3) ล้างห้าครั้งด้วยน้ำหมัน
แล้วอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้องภายใต้การไหล
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . การเตรียมตัวอย่างไข่เหลวโฆษณาไข่เหลวขาวปราศจากสารกันบูดพาสเจอร์ไรซ์และสดเกรดเปลือกไข่ที่ซื้อจากร้านขายของชำท้องถิ่น ของเหลวทั้งหมดไข่ทำแล็บของเราโดยฆ่าเชื้อพื้นผิวของไข่ด้วยแอลกอฮอล์ 70% , แตกหอยด้วยมือลงในถุง และ stomaching แผงประดับหน้าอกที่ 250 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 วินาที ของไข่ขาวเหลว 8.20 .พีเอชของของเหลวทั้งไข่ตั้งแต่ 7.50 7.65 .ซ้ำ 1 ml ไข่เหลวขาวตัวอย่างอาหารสดที่เตรียมไว้ หรือไข่เหลวทั้งจำนวนในอาหารวุ้นถั่วเหลือง ชุบ( TSA : difco ดีทรอยท์ มิ ) และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา24 ชั่วโมงในแต่ละการทดลองเพื่อตรวจสอบระดับของพื้นหลังจุลินทรีย์2.2 . เครื่องมือที่ทำให้ร้อนดิสก์ TDT อลูมิเนียมใหม่ถูกพัฒนาขึ้นในวอชิงตันมหาวิทยาลัยแห่งรัฐ ( พูลแมน , WA ) เพื่อให้ความร้อนอย่างรวดเร็วตัวอย่างในน้ำหรือน้ำมันอาบน้ำและให้ใกล้ชิดกับเหมาะเงื่อนไขในการศึกษาจลนศาสตร์ความร้อนคงที่ของความตายของจุลินทรีย์ รูปที่ 1 แสดงแผนภาพของ TDT ดิสก์ อลูมิเนียมทดสอบดิสก์ประกอบด้วยสองส่วนฐานและเมาบนหมวกเพื่อให้โหลดง่ายและขนถ่ายของตัวอย่าง ยางโอริง ระหว่างสองส่วนให้ประทับตราลึกลับ . การ disk-shapedโพรง 18 มม. และความสูง 4.5 มิลลิเมตร ให้ตัวอย่างพื้นที่ 1.27 มล. ก่อนทำการพิมพ์ K thermocoupleถูกติดตั้งในศูนย์ของ TDT ดิสก์ ที่อุณหภูมิภายในศูนย์และอุณหภูมิภายนอกของTDT ดิสก์ ( อาบน้ำอุณหภูมิน้ำ ) มีการติดตามและบันทึกโดย ฟลุค 54 II ( Everett , วอชิงตัน ) เครื่องวัดอุณหภูมิทุกวินาทีในทุกการทดลอง เวลา / อุณหภูมิประวัติวัดแต่ละที่ไม่วิ่ง โดยใช้เชื้อตัวอย่าง และดาวน์โหลดไปยังคอมพิวเตอร์ บันทึกอุณหภูมิจำกัดเวลาโปรไฟล์ของหลอดแก้ว ไข่เหลว จำนวน 1 มิลลิลิตรถูกเพิ่มลงในหลอดแก้ว ( 9 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางโดย 125 มม.สูง ) และมีจำหน่ายอยู่ในศูนย์ และคงที่ตัวอย่างของเหลว ท่อแก้วแล้วแช่ในอาบ น้ำ และอุณหภูมิ และเวลา โปรไฟล์ที่ถูกบันทึกไว้ .ก่อนที่จะใช้แต่ละ , TDT ดิสก์ถูกสุขอนามัยโดยใช้ทำตามขั้นตอน : ( 1 ) ล้างหน้าด้วยน้ํา ( 2 ) แช่ในเจลล้างมือ ( คุ้มครองฉุกเฉินด้านบวก & Sons , Inc . , St .หลุยส์ โม ) สำหรับ 2 นาทีตามของผู้ผลิตคําแนะนําการใช้ และ ( 3 ) ล้างห้าครั้งด้วยน้ำหมัน ,แล้วอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้องภายใต้การไหลแบบราบเรียบ .
การแปล กรุณารอสักครู่..