NOVEL BINDING PROTEINS FOR PCSK9I.

NOVEL BINDING PROTEINS FOR PCSK9



I. BACKGROUND


[0001] Human proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) is a secreted protein expressed primarily in the kidneys, liver and intestines. It has three domains: an inhibitory pro-domain (amino acids 1-152; ที่รวมถึง a signal sequence at amino acids 1-30), a serine protease domain (or catalytic domain; at amino acids 153-448), and a C-terminal domain (or cysteine/histidine-rich domain) of 210 residues in length (at amino acids 449-692), which is rich in cysteine residues. PCSK9 is synthesized as a zymogen that undergoes autocatalytic cleavage between the pro-domain and catalytic domain in the endoplasmic reticulum. The pro-domain remains bound to the mature protein after cleavage, and the complex is -secreted. The cysteine-rich domain may play a role analogous to the P• (processing) domains of other Furin/Kexin/Subtilisin-like serine proteases, which appear to be essential for folding and regulation of the activated protease.

[0002] PCSK9 is a member of the proteinase K secretory subtilisin-like subfamily of serine proteases (Naureckiene et al., 2003 Arc. Biochem. Biophys. 420:55-67) and functions as a strong negative regulator of hepatic low density lipoprotein receptors (LDL-R). PCSK9 plays a critical role in cholesterol metabolism by controlling the levels of low density lipoprotein (LDL) particles that circulate in the bloodstream. Elevated levels of PCSK9 have been shown to reduce LDL-R levels in the liver, resulting in high levels of low density lipoprotein cholesterol (LDL-c) in the plasma and increased susceptibility to coronary artery disease. (Peterson et a.l, J Lipid Res. 49(7): 1595-9 (2008)).

[0003] The low-density lipoprotein receptor (LDL-R) prevents atherosclerosis and hypercholesterolemia through the clearance of the low-density lipoproteins (LDL) in the bloodstream. LDL-R is regulated at the posttranslational level by PCSK9. PCSK9 knockout mice showed an approximate 50% reduction in the plasma LDL-c levels and showed enhanced sensitivity to statins in reducing plasma LDL-c (Rashid S, et al (2005) Proc Natl Acad Sci 102:5374-5379.Human genetic data also support the role of PCSK9 in homeostasis. Mutations in PCSK9 are associated with abnormal levels of LDL-c in the blood plasma
(Horton et al., 2006 Trends. Biochem. Sci. 32(2):71-77). Two mutations were recently identified that are presumably "loss-of-function" mutations in PCSK9. The individuals with these mutations have an approximately 40% reduction in the plasma levels of LDL-c which translates into an approximate 50-90% decrease in coronary heart disease.

[0004] Therefore, it would be highly advantageous to produce an inhibitor of PCSK9 that antagonizes the activity of PCSK9 and blocks or reduces the corresponding role PCSK9 plays in various pathologic conditions.

11. DEFINITIONS


[0005] The following list defines terms, phrases, and abbreviations used throughout the instant specification. All terms listed and defined herein are intended to encompass all grammatical forms.

[0006] As used herein, the term "ไลโปคาลิน" refers to a polypeptide defined by its supersecondary structure, namely cylindrical ,6-pleatedsheet supersecondary structural region ซึ่งประกอบรวมด้วย eight ,6-strands connected pair-wise by four loops at one end to define thereby a binding pocket. ไลโปคาลินs (Pervaiz and Brew, FASEB J. 1 (1987), 209-214) are a family of small, often monomeric secretory proteins which have been isolated from various organisms (Flower, Biochem. J. 318 (1996), 1-12). The ไลโปคาลินs bear relatively little mutual sequence similarity and their belonging to the same protein structural family was first eluicidated by X• ray structure analysis (Sawyer et al., Nature 327 (1987), 659).

[0007] In this regard, a "ไลโปคาลิน มิวทีน", as used in the present discussed, refers to a มิวทีน derieved from a ไลโปคาลิน and having a cylindrical ,6-pleated sheet supersecondary structural region ซึ่งประกอบรวมด้วย eight ,6-strands connected pair-wise by four loops at one end to define thereby a binding pocket, โดยที่ _at least one amino acid of each of at least three of said four loops has been mutated (see, for example, PCT publication WO 1999/16873). In some particular embodiments, said ไลโปคาลิน มิวทีน may be derived from human tear ไลโปคาลิน. In some other particular embodiments, however, said ไลโปคาลิน มิวทีน may be derived from a ไลโปคาลิน other than human tear ไลโปคาลิน.

[0008] As used herein, the term "subject" includes any vertebrates e.g., mammals. Mammals include, but are not limited to, domesticated animals (e.g., cows, sheep, cats, dogs, and horses), primates (e.g., humans and non-human primates such as monkeys), rabbits, and rodents (e.g., mice and rats). In certain embodiments, the individual or subject is a human.
[0009] The term "proprotein convertase subtilisin kexin type 9" ("PCSK9," interchangeable with "NARC-1") as used herein, refers to any native PCSK9 from any vertebrate source, ที่รวมถึง mammals such as primates (e.g. humans) and rodents (e.g., mice and rats), unless otherwise indicated. The term encompasses "full-length," unprocessed PCSK9 as well as any form of PCSK9 that results from processing in the cell or any ชิ้นส่วนย่อยของมัน. The term also encompasses naturally occurring variants of PCSK9, e.g., splice variants or allelic variants.

[0010] The term "vector," as used herein, refers to a nucleic acid molecule capable of propagating another nucleic acid to which it is linked. The term includes the vector as a self• replicating nucleic acid structure as well as the vector incorporated into the genome of a host cell into which it has been introduced. Certain vectors are capable of directing the expression of nucleic acid sequences to which they are operatively linked. Such vectors are referred to herein as "expression vectors."

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รวมนวนิยายโปรตีนสำหรับ PCSK9I. พื้นหลัง[0001] convertase proprotein มนุษย์ subtilisin/kexin ชนิด 9 (PCSK9) เป็นโปรตีนที่ secreted แสดงหลักในไต ตับ และลำไส้ มีโดเมนที่สาม: เป็นลิปกลอสไขโดเมนสนับสนุน (กรดอะมิโน 1-152 ที่รวมถึงลำดับสัญญาณที่กรดอะมิโน 1-30), โดเมนแถรติเอส (หรือโด เมนของตัวเร่งปฏิกิริยา ที่กรดอะมิโน 153 448), และเทอร์มินัลซีโดเมน (หรือโดเมน cysteine histidine-รวย) ของตก 210 ความยาว (ที่กรดอะมิโน 449-692), ที่มี cysteine ตก PCSK9 จะสังเคราะห์เป็น zymogen ที่ทนี้ปริ autocatalytic ระหว่างโดเมนโดเมนที่สนับสนุน และตัวเร่งปฏิกิริยาในลัม endoplasmic โดเมนที่สนับสนุนยังคงผูกให้โปรตีนสุกหลังปริ และซับซ้อนเป็น - secreted โดเมน cysteine รวยอาจเล่นบทบาทที่คล้ายคลึงกับโดเมน P• (แปรรูป) ของอื่น ๆ Furin/Kexin/Subtilisin-เหมือนแถ proteases ซึ่งปรากฏเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับพับและระเบียบรติเอสเปิดPCSK9 [0002] เป็นสมาชิกของที่ proteinase K secretory เช่น subtilisin subfamily ของ proteases แถ (Naureckiene et al., 2003 ส่วนโค้ง Biochem Biophys 420:55-67) และฟังก์ชันเป็นควบคุมการลบที่แข็งแกร่งของ receptors ไลโพโปรตีนความหนาแน่นต่ำตับ (LDL-R) PCSK9 มีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญไขมัน โดยการควบคุมระดับของความหนาแน่นต่ำ (LDL) ไลโพโปรตีนอนุภาคที่ไหลเวียนในกระแสเลือด ระดับสูงของ PCSK9 ได้รับการแสดงเพื่อลดระดับ LDL-R ในตับ ในระดับสูงของความหนาแน่นต่ำไลโพโปรตีนไขมัน (LDL-c) ในพลาสมาและโรคหลอดเลือดหัวใจเพิ่มขึ้นง่าย (Peterson et a.l ทรัพยากรกระบวนการเจ 49(7): 1595-9 (2008))[0003] ตัวรับ low-density ไลโพโปรตีน (LDL-R) ป้องกัน hypercholesterolemia ผ่านเคลียร์ของ low-density lipoproteins (LDL) ในกระแสเลือดและหลอดเลือด LDL-R จะถูกกำหนดที่ระดับ posttranslational โดย PCSK9 หนูชนะน็อกโดยเทคนิค PCSK9 พบการลดลง 50% โดยประมาณในพลาสมาระดับ LDL-c และพบว่าเพิ่มความไวให้ statins ในการลด LDL-c พลาสม่า (Rashid S, 102:5374 et al (2005) กระบวนการ Natl Acad วิทยาศาสตร์วิศวกรรม-5379.Human ข้อมูลทางพันธุกรรมยังสนับสนุนบทบาทของ PCSK9 ในภาวะธำรงดุล การกลายพันธุ์ใน PCSK9 เกี่ยวข้องกับระดับของ LDL-c ในเลือดผิดปกติ (ใจและ al., 2006 แนวโน้ม Biochem Sci. 32(2):71-77) กลายพันธุ์สองได้เมื่อเร็ว ๆ นี้ระบุที่สันนิษฐานว่า "ขาดทุนของฟังก์ชัน" การกลายพันธุ์ใน PCSK9 บุคคลที่ มีการกลายพันธุ์เหล่านี้มีการลดลงประมาณ 40% ของ LDL-c ซึ่งเป็ลดลงประมาณ 50-90% เป็นโรค ระดับพลาสมา[0004] ดังนั้น มันจะเป็นประโยชน์มากในการผลิตมีผล PCSK9 ที่ antagonizes การ PCSK9 และบล็อก หรือลดบทบาทสอดคล้อง PCSK9 เล่นในเงื่อนไขต่าง ๆ pathologic11. ข้อกำหนด[0005] ต่อไปนี้กำหนดเงื่อนไข วลี และคำย่อที่ใช้ตลอดทั้งเพาะทันที เงื่อนไขทั้งหมดที่แสดงรายการ และกำหนดซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อรอบไวยากรณ์ทุกรูปแบบ[0006] นี้ ใช้คำว่า "ไลโปคาลิน" หมายถึง polypeptide ที่กำหนด โดย supersecondary โครงสร้าง ได้แก่ทรงกระบอก 6 pleatedsheet ภูมิภาคโครงสร้าง supersecondary ซึ่งประกอบรวมด้วย 8, 6-strands เชื่อมต่อ pair-wise โดยวนรอบสี่ที่ปลายด้านหนึ่งผูกกระเป๋าจึงกำหนด ไลโปคาลินs (Pervaiz and Brew, FASEB เจ 1 (1987), 209-214) เป็นครอบครัวขนาดเล็ก มัก monomeric secretory โปรตีนซึ่งได้แยกจากสิ่งมีชีวิตต่าง ๆ (ดอกไม้ Biochem เจ. 318 (1996), 1-12) ค่อนข้างน้อยลำดับซึ่งกันและกันคล้ายหมี ไลโปคาลินs และสำหรับครอบครัวของโครงสร้างโปรตีนที่เป็นสมาชิกของพวกเขาเป็น eluicidated แรก โดยวิเคราะห์โครงสร้างของเรย์ X• (Sawyer et al. ธรรมชาติ 327 (1987), 659)[0007] ในการนี้ เป็น "ไลโปคาลินมิวทีน" ที่ใช้ในปัจจุบันที่กล่าวถึง ถึงมิวทีน derieved จากการไลโปคาลิน และมีการทรงกระบอก แผ่น 6 จีบภูมิภาคโครงสร้าง supersecondary ซึ่งประกอบรวมด้วย 8, 6-strands เชื่อมต่อ pair-wise โดยวนรอบสี่ที่ปลายด้านหนึ่งเพื่อกำหนดจึงผูกกระเป๋า กรดอะมิโน _at อย่างน้อยหนึ่งโดยที่ของแต่ละของวนรอบสี่กล่าวว่ามีการกลาย (ดู ตัวอย่าง PCT ประกาศ WO 1999/16873) มิวทีนไลโปคาลินกล่าวว่าอาจมาจากไลโปคาลินน้ำตามนุษย์ในบาง embodiments เฉพาะ ในบางอื่น ๆ เฉพาะ embodiments ไร มิวทีนไลโปคาลินกล่าวว่าอาจจะมาจากไลโปคาลินไม่ใช่ไลโปคาลินน้ำตามนุษย์[0008] นี้ ใช้คำว่า "เรื่อง" รวม vertebrates ใด ๆ เช่น เลี้ยงลูกด้วยนม เลี้ยงลูกด้วยนมรวมถึง แต่ไม่จำกัดเฉพาะ บ้านสัตว์เลี้ยง (เช่น วัว แกะ แมว สุนัข และม้า), primates (เช่น มนุษย์และไม่ใช่มนุษย์ primates เช่นลิง), กระต่าย และงาน (เช่น หนูและหนู) ในบาง embodiments บุคคล หรือเรื่องที่เป็นมนุษย์ [0009] คำว่า " proprotein convertase subtilisin kexin ชนิด 9" ("PCSK9 เปลี่ยน"NARC-1") ใช้นี้ ถึงใด ๆ PCSK9 พื้นเมืองจากทุกแหล่งหลอด ที่รวมถึงเลี้ยงลูกด้วยนมเช่น primates (เช่นมนุษย์) และงาน (เช่น หนูและหนู), วงเงินสินเชื่อ คำว่า "ปราศจาก ครอบคลุม unprocessed PCSK9 เป็นแบบฟอร์มใด ๆ ของ PCSK9 ที่เป็นผลลัพธ์จากการประมวลผลในเซลล์หรือชิ้นส่วนย่อยของมันใด ๆ คำยังครอบคลุมตัวแปรที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติของ PCSK9 เช่น ประกบตัวแปรหรือตัวแปร allelic[0010] คำว่า "เวกเตอร์ ใช้นี้ ถึงโมเลกุลกรดนิวคลีอิกสามารถเผยแพร่กรดนิวคลีอิกอีกซึ่งเป็นการเชื่อมโยง คำมีเวกเตอร์ที่เป็น self• ในการจำลองโครงสร้างของกรดนิวคลีอิกเป็นเวกเตอร์รวมเป็นกลุ่มของเซลล์โฮสต์ซึ่งจะมีการแนะนำ เวกเตอร์หนึ่งมีความสามารถของผู้กำกับค่าของลำดับกรดนิวคลีอิกซึ่งพวกเขามี operatively เชื่อมโยงกับ เวกเตอร์เช่นอย่างนี้เป็น "เวกเตอร์นิพจน์"

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นวนิยายผูกพันโปรตีนสำหรับ PCSK9 ครั้งที่หนึ่ง ภูมิหลัง[0001] มนุษย์ proprotein convertase subtilisin / Kexin 9 ประเภท (PCSK9) เป็นโปรตีนที่หลั่งมาแสดงหลักในไตตับและลำไส้ มันมีสามโดเมน: โปรโดเมนยับยั้ง (กรดอะมิโน 1-152; ที่รวมถึงลำดับสัญญาณที่กรดอะมิโน 1-30) ซึ่งเป็นโดเมนโปรติเอสซีรีน (หรือโดเมนตัวเร่งปฏิกิริยาการที่กรดอะมิโน 153-448) และ โดเมน C ขั้ว (หรือ cysteine ​​โดเมน / ฮิสติดีนที่อุดมไปด้วย) 210 ตกค้างยาว (กรดอะมิโนที่ 449-692) ซึ่งอุดมไปด้วย cysteine ​​ตกค้าง PCSK9 ถูกสังเคราะห์เป็น zymogen ที่ผ่าน autocatalytic ความแตกแยกระหว่างโดเมนอาชีพและโดเมนตัวเร่งปฏิกิริยาในร่างแหเอนโดพลาซึม โปรโดเมนยังคงผูกพันกับโปรตีนผู้ใหญ่หลังจากความแตกแยกและซับซ้อน -secreted cysteine ​​ที่อุดมไปด้วยโดเมนอาจมีบทบาทคล้ายกับ P • (ประมวลผล) โดเมนอื่น ๆ Furin / Kexin / subtilisin เหมือนโปรตีเอสซีรีนซึ่งดูเหมือนจะเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพับและกฎระเบียบของโปรติเอสเปิดใช้งาน. [0002] PCSK9 เป็น สมาชิกคนหนึ่งของโปร K หลั่ง subtilisin เหมือนอนุวงศ์ของโปรตีเอสซีรีน (Naureckiene et al, 2003 Arc Biochem Biophys 420:.... 55-67) และทำหน้าที่เป็นผู้กำกับดูแลในเชิงลบที่แข็งแกร่งของความหนาแน่นต่ำตับผู้รับไลโปโปรตีน (LDL-R) . PCSK9 มีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญคอเลสเตอรอลโดยการควบคุมระดับของไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำ (LDL) อนุภาคที่ไหลเวียนในกระแสเลือด ระดับสูงของ PCSK9 ได้รับการแสดงเพื่อลดระดับ LDL-R ในตับที่มีผลในระดับสูงของความหนาแน่นต่ำไลโปโปรตีนคอเลสเตอรอล (LDL-C) ในพลาสม่าและเพิ่มความไวต่อการเกิดโรคหลอดเลือดหัวใจตีบ (ปีเตอร์สันและอัลเจไขมัน Res 49 (7):. 1595-9 (2008)). [0003] ที่รับไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ (LDL-R) ป้องกันไม่ให้หลอดเลือดและไขมันในเลือดสูงผ่านการกวาดล้างของ lipoproteins ความหนาแน่นต่ำ ( LDL) ในกระแสเลือด LDL-R ถูกควบคุมในระดับ posttranslational โดย PCSK9 PCSK9 หนูที่น่าพิศวงแสดงให้เห็นว่าการลดลงประมาณ 50% ในระดับพลาสมา LDL-C และแสดงให้เห็นการปรับปรุงความไวต่อยากลุ่ม statin ในการลดระดับ LDL-พลาสม่าค (ราชิด S, et al (2005) พร Natl Acad วิทย์ 102: ข้อมูลทางพันธุกรรม 5374-5379.Human นอกจากนี้ยังสนับสนุนบทบาทของ PCSK9 ในสภาวะสมดุลกลายพันธุ์ใน PCSK9 ที่เกี่ยวข้องกับระดับความผิดปกติของระดับ LDL-C ในเลือด. (ฮอร์ตัน, et al, 2006 แนวโน้ม Biochem วิทย์ 32 (2):.... 71-77). สองกลายพันธุ์ ถูกระบุว่าเมื่อเร็ว ๆ นี้ที่มีสันนิษฐานว่า "การสูญเสียของฟังก์ชั่น" การกลายพันธุ์ใน PCSK9. บุคคลที่มีการกลายพันธุ์เหล่านี้มีการลดลงประมาณ 40% ในระดับพลาสมาของ LDL-C ซึ่งแปลเป็นลดลงประมาณ 50-90% ในโรคหลอดเลือดหัวใจ . [0004] ดังนั้นจึงจะเป็นประโยชน์อย่างมากในการผลิตสารยับยั้งของ PCSK9 ที่ antagonizes กิจกรรมของ PCSK9 และบล็อกหรือลด PCSK9 บทบาทที่สอดคล้องกันเล่นในพยาธิสภาพต่างๆ. 11. นิยาม[0005] รายการต่อไปนี้คำนิยามคำศัพท์วลี และตัวย่อที่ใช้ตลอดทั้งสเปคทันที เงื่อนไขทั้งหมดที่ระบุไว้และกำหนดไว้ในเอกสารฉบับนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ครอบคลุมรูปแบบไวยากรณ์ทั้งหมด. [0006] เมื่อใช้ในที่นี้คำว่า "ไลโปคาลิน" หมายถึง polypeptide ที่กำหนดโดยโครงสร้าง supersecondary มันคือรูปทรงกระบอก 6 pleatedsheet supersecondary ภูมิภาคโครงสร้างซึ่ง ประกอบรวมด้วยแปด 6 เส้นที่เชื่อมต่อคู่ที่ชาญฉลาดโดยสี่ห่วงที่ปลายด้านหนึ่งเพื่อกำหนดจึงกระเป๋าที่มีผลผูกพัน ไลโปคาลิน s (อัชและเบียร์, FASEB เจ 1 (1987), 209-214) เป็นครอบครัวขนาดเล็กมักจะหลั่งโปรตีน monomeric ซึ่งได้รับการแยกออกจากสิ่งมีชีวิตต่างๆ (ดอกไม้ Biochem. เจ 318 (1996 ), 1-12) ไลโปคาลินของหมีคล้ายคลึงกันตามลำดับซึ่งกันและกันค่อนข้างน้อยและที่อยู่ของพวกเขาเพื่อโปรตีนเดียวกันครอบครัวโครงสร้างถูก eluicidated ครั้งแรกโดยเอ็กซ์•การวิเคราะห์โครงสร้างเรย์ (เลื่อย et al., ธรรมชาติ 327 (1987), 659). [0007] ใน เรื่องนี้เป็น "ไลโปคาลินมิวทีน" ที่ใช้ในปัจจุบันกล่าวถึงหมายถึงมิวทีน derieved จากไลโปคาลินและมีรูปทรงกระบอกแผ่น 6 จีบภูมิภาคโครงสร้าง supersecondary ซึ่งประกอบรวมด้วยแปด 6 เส้นเชื่อมต่อคู่ที่ชาญฉลาดโดยสี่ห่วงที่ปลายด้านหนึ่งเพื่อกำหนดจึงกระเป๋าผูกพันโดยที่ _at น้อยหนึ่งกรดอะมิโนของแต่ละอย่างน้อยสามกล่าวว่าสี่ลูปได้รับการกลายพันธุ์ (ดู ตัวอย่างเช่นสิ่งพิมพ์ PCT WO 1999/16873) โดยเฉพาะอย่างยิ่งใน embodiments บางส่วนกล่าวว่าไลโปคาลินมิวทีนอาจจะมาจากการฉีกขาดของมนุษย์ไลโปคาลิน ในบาง embodiments เฉพาะอื่น ๆ แต่กล่าวว่าไลโปคาลินมิวทีนอาจจะมาจากไลโปคาลินอื่น ๆ นอกเหนือจากการฉีกขาดของมนุษย์ไลโปคาลิน. [0008] เมื่อใช้ในที่นี้คำว่า "เรื่อง" รวมถึงสัตว์มีกระดูกสันหลังใด ๆ เช่นการเลี้ยงลูกด้วยนม เลี้ยงลูกด้วยนมรวมถึง แต่ไม่ จำกัด เฉพาะสัตว์ (เช่นวัวแกะแมวสุนัขและม้า), บิชอพ (เช่นมนุษย์และสัตว์ที่ไม่ใช่มนุษย์เช่นลิง) กระต่ายและหนู (เช่นหนูและ หนู) ใน embodiments บางบุคคลหรือวัตถุที่เป็นมนุษย์. [0009] คำว่า "proprotein convertase subtilisin Kexin ประเภท 9" ("PCSK9" กันกับ "สอดแนม-1") ที่ใช้ในที่นี้หมายถึง PCSK9 พื้นเมืองใด ๆ จากการเลี้ยงลูกด้วยนมใด ๆ แหล่งที่รวมถึงเลี้ยงลูกด้วยนมเช่นนม (เช่นมนุษย์) และหนู (เช่นหนูและหนู) นอกจากที่ระบุ คำว่าโลกไซเบอร์ "ความยาวเต็มรูปแบบ" PCSK9 ที่ยังไม่ได้เช่นเดียวกับรูปแบบของ PCSK9 ที่เป็นผลมาจากการประมวลผลในเซลล์หรือชิ้นส่วนย่อยของมัน คำไซเบอร์ยังเกิดขึ้นตามธรรมชาติสายพันธุ์ของ PCSK9 เช่นสายพันธุ์หรือสายพันธุ์ประกบ allelic. [0010] คำว่า "เวกเตอร์" ที่ใช้ในที่นี้หมายถึงโมเลกุลของกรดนิวคลีอิกความสามารถในการแพร่กระจายกรดนิวคลีอื่นเพื่อที่จะมีการเชื่อมโยง ระยะรวมถึงเวกเตอร์ตัวเอง•การจำลองโครงสร้างกรดนิวคลีอิกเช่นเดียวกับเวกเตอร์รวมอยู่ในจีโนมของเซลล์โฮสต์ลงไปในการที่จะได้รับการแนะนำ เวกเตอร์บางอย่างมีความสามารถในการกำกับการแสดงออกของลำดับนิวคลีอิกกรดที่พวกเขามีการเชื่อมโยงผ่าตัด เวกเตอร์ดังกล่าวไว้ในที่นี้จะเรียกว่าเป็น "พาหะแสดงออก."

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นวนิยายโปรตีนที่จับกับ pcsk9






ฉันพื้นหลัง [ 001 ] มนุษย์ proprotein convertase ซับทีลิซิน / เคซิน 9 ชนิด ( pcsk9 ) คือการหลั่งโปรตีนแสดงหลักใน ไต ลำไส้ ตับ และ มันมีสามโดเมน : โดเมนยับยั้งโปร ( กรดอะมิโน 1-152 ; ที่รวมถึงสัญญาณลำดับกรดอะมิโนที่ 1-30 ) , เอนไซม์โปรติเอสโดเมน ( โดเมน หรือ การ ที่ กรดอะมิโน 153-448 )และโดเมน ( หรือกรดอะมิโนฮิสติดีนซึ่ง / รวยโดเมน ) 210 ตกค้างในความยาวที่กรดอะมิโน 449-692 ) ซึ่งอุดมไปด้วยกรดอะมิโนที่ตกค้าง pcsk9 สังเคราะห์เป็นไซโมเจนที่ผ่านการย่อยตัวเองระหว่างโดเมนและโดเมนเร่งปฏิกิริยา Pro ใน endoplasmic reticulum . โปรโดเมนยังคงผูกพันกับผู้ใหญ่โปรตีนหลังลึกและซับซ้อน - หลั่ง .ที่อุดมไปด้วยกรดอะมิโนโดเมนอาจมีบทบาทคล้ายกับ P - ( ประมวลผล ) โดเมนอื่น ๆเช่น ของหวาน / เคซิน / ซับทีลิซินเซอรีนโปรเตส ซึ่งปรากฏเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับพับและกฎระเบียบของการกระตุ้นเอนไซม์โปรตีเอส

[ ] pcsk9 0002 เป็นสมาชิกของโปรตีน k secretory ซับทีลิซินเหมือน subfamily ของน้ำหนักโมเลกุล ( naureckiene เซอรีน et al . , 2003 อาร์ค วิชาเคมี biophys . 420 :55-67 ) และฟังก์ชั่นควบคุมเชิงลบที่แข็งแกร่งของเอนไซม์ไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ ( ldl-r receptors ) pcsk9 เล่นบทบาทสำคัญในการเผาผลาญไขมัน โดยการควบคุมระดับของไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ ( LDL ) อนุภาคที่ไหลเวียนในกระแสเลือด ระดับสูงของ pcsk9 ได้รับการแสดงเพื่อลดระดับ ldl-r ในตับผลในระดับสูงของคอเลสเตอรอลไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ ( LDL-C ) ในพลาสมา และเพิ่มความไวต่อการเกิดโรคหลอดเลือดหัวใจ ( Peterson et a.l J p res . 49 ( 7 ) : 1595-9 ( 2008 ) )

[ 0003 ] ความหนาแน่นต่ำไลโปโปรตีนรีเซพเตอร์ ( ldl-r ) และป้องกันหลอดเลือดให้อาหารสำเร็จรูปผ่านพิธีการของไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ ( LDL ) ในเลือดldl-r มีระเบียบที่ posttranslational ระดับโดย pcsk9 . pcsk9 น็อกหนูมีประมาณ 50 % ในการลดระดับพลาสมามีความไวและเพิ่มระดับในการลดระดับพลาสมา ( ราชิด , et al ( 2005 ) , วิทย์ 102: proc NATL 5374-5379.human พันธุกรรมข้อมูลนอกจากนี้ยังสนับสนุนบทบาทของ pcsk9 ในความสมดุลของร่างกายการกลายพันธุ์ใน pcsk9 เกี่ยวข้องกับความผิดปกติของระดับ LDL-C ในพลาสมา
( ฮอร์ตัน et al . , 2006 แนวโน้ม วิชาเคมี สภาวะโลกร้อน 32 ( 2 ) : 71-77 ) สองเรื่องล่าสุดที่ระบุว่า " มีการสูญเสียการทำงานของ " การกลายพันธุ์ใน pcsk9 .บุคคลที่มีการกลายพันธุ์เหล่านี้มีประมาณ 40 % ในการลดระดับของพลาสมา LDL-C ซึ่งแปลเป็นประมาณ 50-90 ลดลงในโรคหลอดเลือดหัวใจ จดจํา

[ ] ดังนั้น จึงต้องขอใช้ประโยชน์ในการผลิตของ pcsk9 ที่ antagonizes กิจกรรมของ pcsk9 และบล็อกหรือลด pcsk9 สอดคล้องกันในบทบาทเล่น

สภาพพยาธิวิทยาต่างๆ11 . ความหมาย


[ 0005 ] รายการต่อไปนี้กำหนดคำศัพท์ วลี และคำย่อที่ใช้ตลอดข้อกําหนดทันที เงื่อนไขที่ระบุไว้ในที่นี้ทั้งหมด และมีวัตถุประสงค์เพื่อให้ครอบคลุมรูปแบบไวยากรณ์ทั้งหมด

[ 0006 ] ที่ใช้ในที่นี้ คำว่า " ไลโปคาลิน " หมายถึง การกำหนดโครงสร้างของพอลิเพปไทด์ supersecondary ) ทรงกระบอก6-pleatedsheet เขต supersecondary โครงสร้างซึ่งประกอบรวมด้วยแปด 6-strands เชื่อมปัญญาคู่สี่ห่วงที่ปลายด้านหนึ่งเพื่อกำหนดงบกระเป๋าผูก ( และไลโปคาลินเปอร์วา ซ เชาชงฟาเซบเจ 1 ( 1987 ) , 209-214 ) เป็นครอบครัวขนาดเล็ก มักพบเกิดเป็นโปรตีนซึ่งถูกโดดเดี่ยวจากสิ่งมีชีวิตต่างๆ ( Biochem ลายดอกไม้ เจ 318 ( 1996 ) , 1-12 )การไลโปคาลิน s แบกความเหมือนลำดับร่วมกันค่อนข้างน้อยและเป็นของเดียวกันโปรตีนโครงสร้างครอบครัวเป็นครั้งแรก eluicidated โดย X - ray การวิเคราะห์โครงสร้าง ( ซอว์เยอร์ et al . , ธรรมชาติ 327 ( 1987 ) , 659 )

[ 0007 ] ในส่วนนี้เป็น " ไลโปคาลินมิวทีน " ดังที่ใช้ในปัจจุบัน กล่าวถึงหมายถึง การมิวทีน derieved จากไลโปคาลินและมีรูปทรงกระบอก 6-pleated แผ่น supersecondary โครงสร้างเขตซึ่งประกอบรวมด้วยแปด 6-strands เชื่อมปัญญาคู่สี่ห่วงที่ปลายด้านหนึ่งเพื่อกำหนดงบกระเป๋าผูก โดยที่ _at อย่างน้อยหนึ่งของกรดอะมิโนแต่ละอย่างน้อยสามกล่าวว่าสี่ห่วงได้กลายพันธุ์ ( ดู ตัวอย่างPCT สิ่งพิมพ์ wo 1999 / 16873 ) ใน embodiments โดยเฉพาะ กล่าวว่า ไลโปคาลินมิวทีนอาจได้มาจากไลโปคาลินน้ำตาของมนุษย์ ใน embodiments โดยเฉพาะ อื่น ๆ , อย่างไรก็ตาม , กล่าวว่าไลโปคาลินมิวทีนอาจได้มาจากไลโปคาลินนอกจากไลโปคาลินฉีกมนุษย์

[ 0008 ] ที่ใช้ในที่นี้ คำว่า " เรื่อง " รวมถึงสัตว์มีกระดูกสันหลัง เช่นสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมรวมถึง แต่ไม่ จำกัด กับ สัตว์ ( เช่น วัว แกะ แมว สุนัข และ ม้า ) , สัตว์ ( เช่นมนุษย์และไม่ใช่มนุษย์ - สัตว์ เช่น ลิง , กระต่ายและสัตว์ฟันแทะ เช่น หนู และหนู ) ใน embodiments บางอย่าง บุคคล หรืออาจเป็นมนุษย์
[ 0009 ] คำว่า " proprotein convertase ซับทีลิซินเคซิน 9 ชนิด " ( pcsk9 " ," เปลี่ยน " narc-1 " ) ที่ใช้ในที่นี้ หมายถึง pcsk9 พื้นเมืองใด ๆจากสัตว์มีกระดูกสันหลังแหล่ง ที่รวมถึงสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเช่นสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ( เช่นมนุษย์ ) และสัตว์ฟันแทะ เช่น หนู และหนูหนู ) นอกจากที่ระบุ ระยะครอบคลุม " เต็มตัว " ยังไม่ได้ pcsk9 เช่นเดียวกับรูปแบบใด ๆของ pcsk9 ที่ผลลัพธ์ที่ได้จากการประมวลผล ในเซลล์ หรือชิ้นส่วนย่อยของมัน .ระยะยังครอบคลุมเกิดขึ้นตามธรรมชาติของ pcsk9 สายพันธุ์ เช่น พันธุ์หรือสายพันธุ์ต่อยาฆ่าแมลง

[ 0010 ] คำว่า " เวกเตอร์ " ที่ใช้ในที่นี้ หมายถึง โมเลกุลกรดนิวคลีอิกกรดนิวคลีอิกสามารถเผยแพร่อีก ซึ่งมันเชื่อมโยงกันระยะรวมเวกเตอร์เป็นตนเองที่ประสบความสำเร็จ - กรดนิวคลีอิกโครงสร้าง ตลอดจนเวกเตอร์รวมอยู่ในพันธุกรรมของเซลล์โฮสต์ที่ได้รับการแนะนำ เวกเตอร์หนึ่งมีความสามารถในการกำกับการแสดงออกของกรดนิวคลีอิกดังนี้ ซึ่งพวกเขาจะ operatively เชื่อมโยง เวกเตอร์ดังกล่าวเรียกในที่นี้ว่า " เวกเตอร์การแสดงออก . "