tA novel method for stepwise in vit

tA novel method for stepwise in vitro affinity maturation of antigen-specific shark vNAR domains isdescribed that exclusively relies on semi-synthetic repertoires derived from non-immunized sharks.Target-specific molecules were selected from a CDR3-randomized bamboo shark (Chiloscyllium plagio-sum) vNAR library using yeast surface display as platform technology. Various antigen-binding vNARdomains were easily isolated by screening against several therapeutically relevant antigens, includingthe epithelial cell adhesion molecule (EpCAM), the Ephrin type-A receptor 2 (EphA2), and the human ser-ine protease HTRA1. Affinity maturation was demonstrated for EpCAM and HTRA1 by diversifying CDR1 oftarget-enriched populations which allowed for the rapid selection of nanomolar binders. EpCAM-specificvNAR molecules were produced as soluble proteins and more extensively characterized via thermal shiftassays and biolayer interferometry. Essentially, we demonstrate that high-affinity binders can be gen-erated in vitro without largely compromising the desirable high thermostability of the vNAR scaffold.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตา วิธีนวนิยายสำหรับพ่อแม่ความสัมพันธ์ในหลอดทดลองที่ยังคง isdescribed โดเมน vNAR antigen เฉพาะฉลามที่อาศัยเฉพาะ repertoires กึ่งสังเคราะห์มาจากฉลามไม่ใช่ immunized เลือกไม้ไผ่สุ่ม CDR3 ฉลาม (Chiloscyllium plagio รวม) vNAR ราใช้ยีสต์ผิวแสดงเป็นแพลตฟอร์มเทคโนโลยีโมเลกุลเป้าหมายเฉพาะ VNARdomains antigen รวมต่าง ๆ ได้อย่างง่ายดายแยก โดยคัดกรองกับหลายที่เกี่ยวข้องหลากหลาย antigens, includingthe โมเลกุลยึดเกาะของเซลล์เยื่อบุผิว (EpCAM) รับพิมพ์ A Ephrin 2 (EphA2), และรติเอสมนุษย์ ser-โดย HTRA1 การเจริญเติบโตของความสัมพันธ์ถูกแสดงสำหรับ EpCAM และ HTRA1 โดยภาคพื้น CDR1 oftarget อุดมประชากรซึ่งได้รับอนุญาตในการเข้าเล่ม nanomolar เลือกอย่างรวดเร็ว EpCAM specificvNAR โมเลกุลถูกผลิตเป็นโปรตีนที่ละลายน้ำได้และอื่น ๆ อย่างกว้างขวางลักษณะทางความร้อน shiftassays biolayer interferometry หลัก เราแสดงให้เห็นว่า ความสัมพันธ์สูงเข้าเล่มสามารถพล erated ในหลอดทดลองโดยส่วนใหญ่ thermostability สูงต้องการนั่งร้าน vNAR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

tA วิธีการใหม่สำหรับขั้นตอนในการเจริญเติบโตของความสัมพันธ์ในหลอดทดลองของแอนติเจนเฉพาะฉลามโดเมน vNAR isdescribed ที่เฉพาะอาศัย repertoires กึ่งสังเคราะห์ที่ได้มาจากการไม่รับวัคซีนโมเลกุล sharks.Target เฉพาะได้รับการคัดเลือกจาก CDR3-สุ่มปลาฉลามไม้ไผ่ (Chiloscyllium plagio ผลรวม ) ห้องสมุด vNAR ใช้จอแสดงผลพื้นผิวยีสต์เป็นเทคโนโลยีแพลตฟอร์ม vNARdomains แอนติเจนผูกพันต่างๆที่แยกได้อย่างง่ายดายโดยการคัดกรองกับแอนติเจนที่เกี่ยวข้องการรักษาหลาย includingthe เซลล์เยื่อบุผิวยึดเกาะโมเลกุล (EpCAM) ประเภท-A Ephrin รับ 2 (EphA2) และมนุษย์ ser-INE HTRA1 น้ำย่อย เจริญเติบโตได้แสดงให้เห็นความเป็นพี่น้องกันสำหรับ EpCAM และ HTRA1 โดยกระจาย CDR1 ประชากร oftarget อุดมซึ่งได้รับอนุญาตสำหรับการเลือกอย่างรวดเร็วของสาร nanomolar โมเลกุล EpCAM-specificvNAR ถูกผลิตเป็นโปรตีนที่ละลายน้ำได้และลักษณะทาง shiftassays ความร้อนและอินเตอร์เฟ biolayer อย่างกว้างขวางมากขึ้น โดยพื้นฐานแล้วเราแสดงให้เห็นว่าสารสูงสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดสามารถ GEN-erated ในหลอดทดลองโดยไม่ต้องสูญเสียส่วนใหญ่ทนต่อความร้อนสูงที่พึงประสงค์ของนั่งร้าน vNAR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทาในหลอดทดลองโดยใช้วิธีใหม่ในสุขภาพการเจริญพันธุ์ของ antigen-specific ฉลาม vnar โดเมนที่เฉพาะ isdescribed อาศัย กึ่งสังเคราะห์ ที่ได้จากการฉีด repertoires ไม่ใช่โมเลกุล sharks.target-specific ได้รับเลือกจาก cdr3 สุ่มไม้ไผ่ ฉลาม ( chiloscyllium plagio ผลรวม ) ห้องสมุด vnar ใช้แสดงพื้นผิวยีสต์เป็นเทคโนโลยีแพลตฟอร์ม ต่าง ๆ vnardomains แอนติเจนผูกได้ง่ายๆโดยการแยกหลายที่เกี่ยวข้องกับแอนติเจนในทางทฤษฏี รวมทั้งเซลล์เยื่อบุผิวยึดเกาะโมเลกุล ( epcam ) , ephrin - A receptor 2 ( epha2 ) , และมนุษย์เซอร์น้ำนมโปรตีน htra1 . จากการเป็นผู้นำและ epcam htra1 โดย diversifying cdr1 oftarget อุดมสมบูรณ์ ประชากรที่ได้รับอนุญาตสำหรับการอย่างรวดเร็วของ nanomolar วัสดุยึดประสาน epcam specificvnar โมเลกุลโปรตีนที่ถูกผลิตและผ่าน shiftassays อย่างกว้างขวางมากขึ้นลักษณะความร้อนและ biolayer การสนับสนุน . เป็นหลัก เราแสดงให้เห็นว่าสาร affinity สูงสามารถสร้างเคาน์เตอร์ในหลอดทดลองโดยส่วนใหญ่สูญเสียทดลสูงที่พึงประสงค์ของนั่งร้าน vnar .