To determine if the inhibition of t

To determine if the inhibition of the 1-MA-induced Ca release by LAT-A, U73122, and JAS is related to local changes in the cortical actin network, we stained the actin filaments with Alexa Fluor 488-conjugated phalloidin. In the post-fixation method (Figs. 6a and b),LAT A treatment(3 uM for 15 min) significantly depolymerized cortical actin filaments. Likewise, the same treatment with LAT-A produced similar disassembly of the cortical actin filaments in live oocytes(Figs. 6c and d) Curiously, we have noted that the LAT-A disassembled cortical actin filaments pass through an intermediate stage where short phalloidin-stained actin filaments display an aggregated form(Fig. 6d, arrows). However, within 30 min the aggregated disappeared
completely from the cortex(not shown).In agreement with the dose-dependent inhibition of the 1-MA-induced Ca2 signaling by JAS(Fig. 5b), we have observed that treatment with the same concentration of JAS produced the formation of many more cortical actin filaments(Fig. 6e). Finally, the U73122 treatment, which completely blocked 1-MA-induced Ca signals(Fig.2a), resulted in a remarkable increase of actin filaments in the cortex(Fig. 6f. To our surprise, the effect of the PLC-inhibitor U73122 was almost identical to that of JAS in altering the structure of the cortical actin cytoskeleton (Figs. 6e and f), except that U73122 produced an additional increase of actin filaments in the inner cytoplasm. Taken together with the data indicating the inhibitory effects of these drugs on Ca2+ signaling(Figs.
2 and 5), the morphological data demonstrate that the cortical actin cytoskeleton is implicated in the modulation of 1-MA-induced CA2+ signaling.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจ Ca 1-MA-เกิดยับยั้งการปล่อยโดยลาด-A, U73122 และโรงแรมเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงภายในเครือข่ายของแอกตินเนื้อแน่น เราสี filaments แอกตินกับ phalloidin Alexa Fluor 488 กลวง ในวิธีหลังเบี (Figs. 6a และ b, filaments แอกตินเนื้อแน่นรักษา (3 อุ่มสำหรับ 15 นาที) อย่างมีนัยสำคัญ depolymerized A ลาด ทำนองเดียวกัน การรักษาเดียวกัน ด้วยลาดผลิตถอดคล้ายของ filaments แอกตินเนื้อแน่นสดแช่สารละลาย (Figs. 6c และ d) ใน Curiously เราได้กล่าวว่า filaments ลาด A แยกชิ้นสามารถถอดเนื้อแน่นแอกตินผ่านการระยะกลางที่แอกตินสี phalloidin สั้น filaments แสดงแบบรวม (Fig. 6 d ลูกศร) อย่างไรก็ตาม ภายใน 30 นาที รวมที่หายไป สมบูรณ์จากคอร์เทกซ์ (ไม่แสดง) ยังคงยับยั้งการขึ้นอยู่กับปริมาณของ 1-MA-เกิด Ca2 ตามปกติโดย JAS(Fig. 5b) เราได้สังเกตว่า รักษา ด้วยความเข้มข้นเดียวของโรงแรมผลิตราคาการก่อตัวของ filaments(Fig. 6e) แอกตินเนื้อแน่นมากมาก ในที่สุด การรักษา U73122 ซึ่งทั้งหมดบล็อก 1-MA-ทำให้เกิด Ca signals(Fig.2a) ส่งผลให้เพิ่มความโดดเด่นของแอกติน filaments ในคอร์เทกซ์ (Fig. 6f จะแปลกใจของเรา ผลของ U73122 เตอร์จำกัด(มหาชน)ได้เหมือนกับที่โรงแรมในการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของ cytoskeleton แอกตินเนื้อแน่น (Figs. 6e และ f), ยกเว้นที่เพิ่มเติมของแอกติน filaments ในไซโทพลาซึมภายในผลิต U73122 ดำเนินการกับข้อมูลเพื่อแสดงผลของยาเหล่านี้ใน Ca2 + สัญญาณลิปกลอสไข (มะเดื่อ 2 และ 5), ข้อมูลของสาธิตว่า cytoskeleton แอกตินเนื้อแน่นเกี่ยวข้องในเอ็มของ 1-MA-เกิด CA2 + ตามปกติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อตรวจสอบว่าการยับยั้งของ Ca 1-MA เหนี่ยวนำให้เกิดการเปิดตัวโดย LAT-A U73122 และ JAS ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของท้องถิ่นในเครือข่ายโปรตีนเยื่อหุ้มสมองเราย้อมสีเส้นใยโปรตีนกับ Alexa Fluor phalloidin 488-ผัน ในวิธีการโพสต์ตรึง (มะเดื่อ. 6a และ b), LAT การรักษา (3 UM 15 นาที) อย่างมีนัยสำคัญ depolymerized เส้นใยโปรตีนเยื่อหุ้มสมอง ในทำนองเดียวกันการรักษาเดียวกันกับ LAT-A ผลิตถอดชิ้นส่วนที่คล้ายกันของเส้นใยโปรตีนเยื่อหุ้มสมองในการพัฒนาของไข่สด (มะเดื่อ. 6c และง) อยากรู้อยากเห็นเราได้ตั้งข้อสังเกตว่า LAT-A เส้นใยโปรตีนถอดชิ้นส่วนเยื่อหุ้มสมองผ่านเวทีกลางที่ phalloidin- สั้น เส้นใยโปรตีนสีแสดงรูปแบบรวม (รูปที่. 6 d ลูกศร) อย่างไรก็ตามภายใน 30
นาทีรวมหายไปอย่างสมบูรณ์จากเยื่อหุ้มสมอง(ไม่แสดง) สัญญาได้ในหัวเรื่องที่มีปริมาณขึ้นอยู่กับการยับยั้งการ 1-MA-เหนี่ยวนำให้เกิดการส่งสัญญาณ Ca2 โดย JAS (รูป. 5b) เราได้สังเกตเห็นว่าการรักษาด้วยเหมือนกัน ความเข้มข้นของ JAS ผลิตการก่อตัวของอื่น ๆ อีกมากมายเส้นใยโปรตีนเยื่อหุ้มสมอง (รูปที่. 6 จ) ในที่สุดการรักษา U73122 ที่สมบูรณ์บล็อก 1-MA ที่เกิดสัญญาณ Ca (Fig.2a) ส่งผลให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างโดดเด่นของเส้นใยโปรตีนในเยื่อหุ้มสมอง (รูปที่. 6. ที่แปลกใจของเราผลกระทบของ PLC-ยับยั้ง U73122 ก็เกือบจะเหมือนกันกับที่ของ JAS ในการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของโครงร่างของเซลล์โปรตีนเปลือกนอก (มะเดื่อ. 6 จและฉ) ยกเว้น U73122 ที่ผลิตเพิ่มขึ้นที่เพิ่มขึ้นของเส้นใยโปรตีนในเซลล์ภายใน. ที่ร่วมกันกับข้อมูลที่แสดงให้เห็นผลกระทบที่ยับยั้งเหล่านี้ ยาเสพติดใน Ca2 + สัญญาณ (มะเดื่อ.
2 และ 5) ข้อมูลทางสัณฐานวิทยาแสดงให้เห็นว่าโครงร่างของเซลล์เยื่อหุ้มสมองเป็นโปรตีนที่เกี่ยวข้องในการปรับ CA2 1-MA ที่เกิดขึ้น + การส่งสัญญาณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อตรวจสอบว่าชนิดของ 1-ma-induced CA ปล่อยโดย lat-a u73122 , และแจ๊ส เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงภายในในเครือข่าย actin เปลือกเราเปื้อนเครื่องปรับ Alexa Fluor 488 conjugated phalloidin . ในการโพสต์การตรึงวิธี ( Figs 6a และ b ) , ลาดการรักษา 3 . 15 นาที ) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ depolymerized เปลือก actin filaments . อนึ่งเหมือนการรักษาด้วย lat-a ผลิตที่คล้ายกัน disassembly ของเส้นใย actin เปลือกสดไข่ ( Figs 6 D ) ซอกแซก , เราได้กล่าวไว้ว่า lat-a ถอดเปลือกเครื่องปรับผ่านกลางเวทีที่สั้น phalloidin เปื้อนเครื่องปรับจอแสดงผลรวมรูปแบบ ( ภาพที่ 6 D , ลูกศร ) อย่างไรก็ตาม ภายใน 30 นาทีหรือหายไป
ทั้งหมดจากนอก ( ไม่แสดง ) ในข้อตกลงกับการรายงานของ 1-ma-induced แคลเซียมสัญญาณโดย JAS ( มะเดื่อ 5B ) , เราได้พบว่า การรักษาด้วยความเข้มข้นเดียวกันของแจ๊สที่สร้างเส้นใย actin คอร์มากขึ้น ( ภาพที่ 6e ) ในที่สุด การรักษา u73122 ซึ่งปิดสนิท 1-ma-induced CA สัญญาณ ( fig.2a )มีผลในการเพิ่มที่โดดเด่นของเครื่องปรับในเปลือกสมอง ( ภาพที่ 6F เพื่อเซอร์ไพรส์ของเรา ผลของการ จำกัด ซึ่ง u73122 คือเกือบจะเหมือนกันกับที่ของแจ๊สในการดัดแปลงโครงสร้างของขาดตอน actin เปลือก ( ลูกมะเดื่อ . 6e และ F ) ยกเว้นว่า u73122 ผลิตเพิ่มเติมเพิ่มเครื่องปรับในไซโทพลาสซึมชั้นในถ่ายร่วมกับข้อมูลแสดงผลการยับยั้งของยาเสพติดเหล่านี้ในการส่งสัญญาณแคลเซียม ( มะเดื่อ .
2 และ 5 ) , ข้อมูลลักษณะทางสัณฐานวิทยาแสดงว่าไซโทสเกเลตอน actin เปลือกจะเกี่ยวข้องในการปรับของ 1-ma-induced ส่งสัญญาณแคลเซียม .