The effects of nisin-induced dnaK e

The effects of nisin-induced dnaK expression in Lactococcus lactis were examined, and this expression was shown to improve stress tolerance and lactic acid fermentation efficiency. Using a nisin-inducible expression system, DnaK proteins from L. lactis (DnaKLla) and Escherichia coli (DnaKEco) were produced in L. lactis NZ9000. In comparison to a strain harboring the empty vector pNZ8048 (designated NZ-Vector) and one expressing dnaKLla (designated NZ-LDnaK), the dnaKEco-expressing strain, named NZ-EDnaK, exhibited more tolerance to heat stress at 40°C in GM17 liquid medium. The cell viability of NZ-Vector was reduced 4.6-fold after 6 h of heat treatment. However, NZ-EDnaK showed 13.5-fold increased viability under these conditions, with a very low concentration of DnaKEco production. Although the heterologous expression of dnaKEco did not effect DnaKLla production, heat treatment increased the DnaKLla level 3.5- and 3.6-fold in NZ-Vector and NZ-EDnaK, respectively. Moreover, NZ-EDnaK showed tolerance to multiple stresses, including 3% NaCl, 5% ethanol, and 0.5% lactic acid (pH 5.47). In CMG medium, the lactate yield and the maximum lactate productivity of NZ-EDnaK were higher than the corresponding values for NZ-Vector at 30°C. Interestingly, at 40°C, these values of NZ-EDnaK were not significantly different from the corresponding values for the control strain at 30°C. Lactate dehydrogenase (LDH) activity was also found to be stable at 40°C in the presence of DnaKEco. These findings suggest that the heterologous expression of dnaKEco enhances the quality control of proteins and enzymes, resulting in improved growth and lactic acid fermentation at high temperature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีการตรวจสอบผลของนิพจน์ Lactococcus lactis เกิด nisin dnaK และนิพจน์นี้ถูกแสดงเพื่อปรับปรุงความเครียดการยอมรับและกรดหมักประสิทธิภาพ ใช้ระบบ nisin inducible นิพจน์ โปรตีน DnaK L. lactis (DnaKLla) และ Escherichia coli (DnaKEco) ถูกผลิตใน L. lactis NZ9000 โดยต้องใช้ harboring pNZ8048 เวกเตอร์ว่าง (กำหนดเวกเตอร์นิวซีแลนด์) และหนึ่งกำลัง dnaKLla (กำหนดนิวซีแลนด์-LDnaK), dnaKEco แสดงพันธุ์ ชื่อนิวซีแลนด์-EDnaK จัดแสดงค่าเผื่อความเครียดความร้อนที่ 40 ° C น้ำใน GM17 เพิ่มเติม ชีวิตเซลล์ของเวกเตอร์นิวซีแลนด์ถูกลด 4.6-fold หลัง h 6 รักษาความร้อน อย่างไรก็ตาม นิวซีแลนด์-EDnaK พบ 13.5-fold ชีวิตที่เพิ่มขึ้นภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ มีความเข้มข้นที่ต่ำมากของผลิต DnaKEco ถึงแม้ว่าค่า heterologous ของ dnaKEco ไม่ได้มีผลผลิต DnaKLla รักษาความร้อนเพิ่มขึ้น DnaKLla ระดับ 3.5 - และ 3.6 - fold ในนิวซีแลนด์เวกเตอร์และนิวซีแลนด์-EDnaK ตามลำดับ นอกจากนี้ นิวซีแลนด์-EDnaK พบว่าค่าเผื่อความเครียดหลาย รวม ถึง 3% NaCl เอทานอล 5%, 0.5% กรด (pH 5.47) ใน CMG ผลผลิต lactate และประสิทธิผลสูงสุด lactate ของนิวซีแลนด์ EDnaK ได้สูงกว่าค่าเกี่ยวข้องสำหรับนิวซีแลนด์เวกเตอร์ที่ 30 องศาเซลเซียส เป็นเรื่องน่าสนใจ ที่ 40° C นิวซีแลนด์-EDnaK ค่าเหล่านี้ไม่แตกต่างอย่างมากจากค่าเกี่ยวข้องสำหรับพันธุ์ควบคุมที่ 30 องศาเซลเซียส นอกจากนี้ยังพบกิจกรรม lactate dehydrogenase (LDH) สภาพที่ 40° C ในต่อหน้าของ DnaKEco ผลการวิจัยเหล่านี้แนะนำว่า นิพจน์ heterologous ของ dnaKEco ช่วยเพิ่มคุณภาพของโปรตีนและเอนไซม์ เกิดขึ้นในการหมักกรดแลกติกและเติบโตดีขึ้นที่อุณหภูมิสูง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลกระทบของการแสดงออก dnaK ไนซินที่เกิดขึ้นใน Lactococcus lactis มีการตรวจสอบและการแสดงออกนี้ก็แสดงให้เห็นในการปรับปรุงความทนทานต่อความเครียดและกรดแลคติกที่มีประสิทธิภาพการหมัก โดยใช้ระบบการแสดงออก Nisin-inducible โปรตีน DnaK จาก L. lactis (DnaKLla) และ Escherichia coli (DnaKEco) มีการผลิตใน L. lactis NZ9000 เมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์เยิ้มเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า pNZ8048 (กำหนด NZ-เวกเตอร์) และเป็นหนึ่งในการแสดง dnaKLla (กำหนด NZ-LDnaK), สายพันธุ์ dnaKEco-แสดงชื่อ NZ-EDnaK, แสดงความอดทนมากขึ้นเพื่อให้ความร้อนความเครียดที่ 40 ° C ใน GM17 อาหารเหลว มีชีวิตเซลล์ของ NZ-เวกเตอร์ลดลง 4.6 เท่าหลังจาก 6 ชั่วโมงของการรักษาความร้อน อย่างไรก็ตาม NZ-EDnaK แสดงให้เห็นว่ามีศักยภาพเพิ่มขึ้น 13.5 เท่าภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้มีความเข้มข้นที่ต่ำมากของการผลิต DnaKEco แม้ว่าการแสดงออก heterologous ของ dnaKEco ไม่ได้มีผลกระทบต่อการผลิต DnaKLla, การรักษาความร้อนที่เพิ่มขึ้นระดับ DnaKLla 3.5 และ 3.6 เท่าใน NZ-เวกเตอร์และ NZ-EDnaK ตามลำดับ นอกจากนี้ NZ-EDnaK แสดงให้เห็นความอดทนกับความเครียดหลายรวมถึง 3% โซเดียมคลอไรด์, เอทานอล 5%, และ 0.5% กรดแลคติก (pH 5.47) ในระยะกลาง CMG ให้ผลผลิตน้ำนมและผลผลิตน้ำนมสูงสุดของ NZ-EDnaK มีค่าสูงกว่าค่าที่สอดคล้องกันสำหรับ NZ-เวกเตอร์ที่ 30 ° C ที่น่าสนใจที่ 40 ° C ค่าเหล่านี้ของ NZ-EDnaK ไม่แตกต่างจากค่าที่สอดคล้องกันสำหรับการควบคุมความเครียดที่ 30 ° C lactate dehydrogenase (LDH) กิจกรรมก็พบว่ามีความคงที่ที่ 40 องศาเซลเซียสในการปรากฏตัวของ DnaKEco การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการแสดงออกของ heterologous dnaKEco ช่วยเพิ่มการควบคุมคุณภาพของโปรตีนและเอนไซม์ที่มีผลในการเจริญเติบโตที่ดีขึ้นและการหมักกรดแลคติกที่อุณหภูมิสูง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลของการ dnak หลังการแสดงออกในแลคโตค คัส lactis ถูกตรวจสอบ และการแสดงออกนี้แสดงการปรับปรุงความอดทนต่อความเครียดและประสิทธิภาพของกระบวนการหมักกรดแลคติก . ใช้ปุ่ม inducible การแสดงออกระบบ dnak โปรตีนจาก L . lactis ( dnaklla ) และ Escherichia coli ( dnakeco ) ถูกผลิตใน L . lactis nz9000 .ในการเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่กรมเจ้าท่า pnz8048 เวกเตอร์ที่ว่างเปล่า ( เขตเวกเตอร์ NZ ) และหนึ่งในการแสดง dnaklla ( เขตที่ NZ ldnak ) , dnakeco แสดงสายพันธุ์ที่ชื่อ ednak NZ มีความอดทนมากขึ้น ความร้อน ความเครียดที่ 40 °องศาเซลเซียสใน gm17 เหลวปานกลาง เซลล์มีชีวิตของเวกเตอร์นิวซีแลนด์ลดลง 4.6-fold หลังจาก 6 ชั่วโมงของการรักษาความร้อน อย่างไรก็ตาม , NZ ednak พบ 13เพิ่มขึ้นของผู้อื่นภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้มีความเข้มข้นต่ำมากของการผลิต dnakeco . แม้ว่าการแสดงออกของ dnakeco ชนิดไม่มีผลต่อการผลิต dnaklla , การรักษาความร้อนเพิ่มขึ้น dnaklla ระดับ 3.5 - 3.6-fold เวกเตอร์นิวซีแลนด์นิวซีแลนด์ ednak ตามลำดับ นอกจากนี้ มีความอดทน ednak NZ หลายความเครียดรวมทั้ง 3% NaCl , เอทานอล , ร้อยละ 5 และ 05 % กรด ( pH 5.47 ) ใน R สื่อ ผลผลิต และผลผลิตสูงสุดแลคแลคของ NZ ednak สูงกว่าค่าที่สอดคล้องกันสำหรับเวกเตอร์ NZ ที่ 30 องศา แต่ที่ 40 ° C เหล่านี้ค่าของ NZ ednak ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติจากค่าเดียวกันในการควบคุมความเครียดที่ 30 องศาlactate dehydrogenase ( LDH ) กิจกรรมก็พบว่าเป็นมีเสถียรภาพที่ 40 ° C ในการปรากฏตัวของ dnakeco . จากการวิจัยครั้งนี้มีข้อเสนอแนะว่า การแสดงออกของ dnakeco ชนิดช่วยเพิ่มคุณภาพของโปรตีนและเอนไซม์ เป็นผลในการปรับปรุงการเจริญเติบโตและปริมาณกรดแลคติคการหมักที่อุณหภูมิสูง