Materials and methods Induction of

Materials and methods
Induction of rat model
Animals : male wistar rats purchased from the national laboratory animal center,mahidol university, eighing etween 275-300g were maintained under standardized laboratory conditions (temperature 22+-2c,12/12hr light/dark cycle)for one week acclimatization.they were allowed free access to drinking water and commercial standard rodent pellets. the study protocol including number of animal use was approved by the animal ethics committee of the facully of medicine,chiang mai university.
Inducton of renal and liver injuries by cadmium chloride :six ofmale wistar rats were randomized into two groups of three. The control group (n=3)was injected subcutaneously with normal saline solution (0.9% Na Cl)the treated group (n=3)was injected with CdCl2 solution at the concentration of 1.2 mg/kg BW subcutaneously for 5 days/weeks for 4 weeks (28 days,d1-d28;20 doses of DdCl2) the dose of CdCl2 and the period of treatment were modified from the study of prozialeck
Collection of rats urine and blood :A urinary sample was collected from each rat over 24hr using metabolic cage on day 0 and day 28 and a blood sample was collected by cardiac puncture on the last day of the experiment after the rats were anesthetized intraperitoneally with sodium phenobaraital solution. After perfusion of the whole animal physiological saline via the portal vein,the kidneys and livers were removed,washed with physiological salution and fixed in 10%
Neutral-buffered formalin for 48 hr for histopathological examination.
Determination of blood and urinary cadmium and creatinine :blood and urinary Cd concentrations were quantified by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GFAAS)with Zeeman-GFAAS background correction (Varian,spectra A800Z)using 5%monobasic ammonium phosphate as a modifier. Blood samples were digested in 5%nitric acid solution with a ratio of 1:3 then mixed ,and centrifuged after standing for an hour.The supernatant was removed for analysis by GFAAS.Urine samples were diluted in 0.1%nitric acid solution with a ratio of 1:1 (v/v).Urinary crertinine levels were measured based on the Jaffe reaction.
Hisopathological study :the rat kidneys and livers were processed and individually embedded in the paraffin wax. Sections (5um) were cut and and stained with

Statistical analysis
All data were expressed as mean Standard error of mean (SEM) The statistical Significance was evaluated by one-way analysis Of variance (ANOVA) using SPSS version 12.0 Values were considered statistically significant When p< 0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ เหนี่ยวนำหนูรุ่น สัตว์: หนู wistar เพศชายซื้อจากสัตว์ศูนย์ห้องปฏิบัติการแห่งชาติ มหาวิทยาลัยมหิดล eighing etween 275-300g ถูกรักษาไว้ภายใต้เงื่อนไขมาตรฐานห้องปฏิบัติการ (อุณหภูมิ 22 + -2c วงจรแสงสว่าง/มืด 12/12 ชั่วโมง) 1 สัปดาห์ acclimatization.they ได้รับอนุญาตเข้าถึงน้ำดื่มและขี้หนูมาตรฐานเชิงพาณิชย์ โพรโทคอลการศึกษารวมทั้งจำนวนการใช้สัตว์ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ของ facully การแพทย์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ Inducton ของการบาดเจ็บที่ไต และตับโดยแคดเมียมคลอไรด์: หนู wistar ofmale หกถูกสุ่มเป็นกลุ่มสองสาม กลุ่มควบคุม (n = 3) เป็นฉีดเข้าใต้ผิวหนัง ด้วยเกลือปกติ (0.9% Na Cl) กลุ่มบำบัด (n = 3) ถูกฉีด ด้วยสารละลาย CdCl2 ที่ความเข้มข้น 1.2 mg/kg BW เข้าใต้ผิวหนังสำหรับ 5 วัน/สัปดาห์สำหรับ 4 สัปดาห์ (28 วัน d1 d28 ปริมาณ 20 ของ DdCl2) ปริมาณของ CdCl2 และระยะเวลาของการรักษาได้ปรับเปลี่ยนจากการศึกษาของ prozialeck หนูปัสสาวะและเลือด: ตัวอย่างปัสสาวะรวบรวมจากหนูละกว่า 24 ชั่วโมงโดยใช้กรงที่เผาผลาญในวันที่ 0 และวันที่ 28 และเลือดถูกรวบรวม โดยเจาะหัวใจวันสุดท้ายของการทดสอบหลังจากที่หนูได้ด้วย intraperitoneally มี phenobaraital โซเดียม หลังจากการกำซาบของเกลือ physiological สัตว์ทั้งหมดทางหลอดเลือดดำพอร์ทัล ไตและตับถูกลบออก ล้าง ด้วย salution สรีรวิทยา และแก้ไขใน 10%บัฟเฟอร์กลาง formalin 48 ชั่วโมงตรวจสอบ histopathological ของเลือด และปัสสาวะแคดเมียม และ creatinine: เลือดและความเข้มข้นซีดีปัสสาวะถูกวัด โดยหลักการดูดกลืนโดยอะตอมเตาเผาแกรไฟต์ (GFAAS) ด้วยการแก้ไขพื้นหลัง Zeeman GFAAS (Varian สเป็ค A800Z) ใช้ 5% monobasic แอมโมเนียฟอสเฟตเป็นตัวปรับเปลี่ยนที่ ตัวอย่างเลือดถูกย่อยสลายในกรดไนตริก 5% อัตรา 1:3 แล้วผสม และเหวี่ยงหลังจากหนึ่งชั่วโมง Supernatant ถูกเอาออกสำหรับการวิเคราะห์ โดย GFAAS ตัวอย่างปัสสาวะถูกเจือจางในโซลูชันกรด 0.1%nitric มีอัตราส่วน 1:1 (v/v) Crertinine ปัสสาวะระดับที่วัดจากปฏิกิริยา Jaffe การศึกษา Hisopathological: หนูไตและตับประมวลผล และแยกฝังในขี้ผึ้งพาราฟิน มีตัดส่วน (5um) และ และย้อมด้วยการวิเคราะห์ทางสถิติ ข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นหมายความว่าข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) นัยสำคัญทางสถิติซึ่งประกอบ ด้วยทางเดียวการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้ SPSS รุ่น 12.0 ค่าพิจารณาว่ามีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อ p < 0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
เหนี่ยวนำของรูปแบบหนู
สัตว์: หนูขาวเพศชายที่ซื้อจากศูนย์สัตว์ทดลองแห่งชาติมหาวิทยาลัยมหิดล eighing etween 275-300g ได้รับการดูแลภายใต้เงื่อนไขมาตรฐานห้องปฏิบัติการ (อุณหภูมิ 22 + -2c, 12 / 12hr แสง / รอบเข้ม) สำหรับ หนึ่งสัปดาห์ acclimatization.they ได้รับอนุญาตให้ใช้บริการฟรีน้ำดื่มและการค้าเม็ดหนูมาตรฐาน โปรโตคอลการศึกษารวมทั้งจำนวนในการใช้สัตว์ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมของสัตว์ facully แพทยศาสตร์มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ได้.
Inducton ของการบาดเจ็บของไตและตับโดยแคดเมียมคลอไรด์: หก ofmale หนูขาวได้รับการสุ่มออกเป็นสองกลุ่มสาม กลุ่มควบคุม (n = 3) ถูกฉีดเข้าใต้ผิวหนังด้วยสารละลายน้ำเกลือ (0.9% ณ Cl) กลุ่มได้รับการรักษา (n = 3) ถูกฉีดด้วยสารละลาย CdCl2 ที่ความเข้มข้น 1.2 มิลลิกรัม / ต่อกิโลกรัมใต้ผิวหนังเป็นเวลา 5 วัน / สัปดาห์สำหรับ 4 สัปดาห์ (28 วัน, D1-D28; 20 ปริมาณ DdCl2) ปริมาณของ CdCl2 และระยะเวลาของการรักษาที่ถูกดัดแปลงมาจากการศึกษาของ prozialeck
เก็บของหนูปัสสาวะและเลือด: ตัวอย่างปัสสาวะที่ถูกเก็บรวบรวมจากแต่ละหนูกว่า 24 ชั่วโมงโดยใช้การเผาผลาญอาหาร กรงในวันที่ 0 และในวันที่ 28 และตัวอย่างเลือดที่เก็บรวบรวมโดยได้รับการเจาะการเต้นของหัวใจในวันสุดท้ายของการทดสอบหลังจากที่หนูได้รับการดมยาสลบ intraperitoneally ด้วยสารละลายโซเดียม phenobaraital หลังจากปะของน้ำเกลือทางสรีรวิทยาทั้งสัตว์ผ่านทางหลอดเลือดดำพอร์ทัลไตและตับถูกถอดออกมาล้างด้วย salution สรีรวิทยาและการแก้ไขใน 10%
ฟอร์มาลินเป็นกลางบัฟเฟอร์สำหรับ 48 ชั่วโมงสำหรับการตรวจสอบทางจุลพยาธิวิทยา.
การกำหนดของเลือดและแคดเมียมปัสสาวะและ creatinine เลือด และความเข้มข้น Cd ปัสสาวะถูกวัดโดยเตาเผาแกรไฟต์อะตอมดูดซึม spectrometry (GFAAS) กับการแก้ไขพื้นหลัง Zeeman-GFAAS (Varian, สเปกตรัม A800Z) โดยใช้ 5% แอมโมเนียมฟอสเฟต monobasic เป็นตัวปรับ ตัวอย่างเลือดย่อยในสารละลายกรดไนตริก 5% ในอัตราส่วน 1: 3 แล้วผสมและปั่นหลังจากที่ยืนสำหรับใส hour.The ถูกลบออกสำหรับการวิเคราะห์โดยตัวอย่าง GFAAS.Urine ถูกเจือจางในสารละลายกรดไนตริก 0.1% มีอัตราส่วน 1: 1. (v / v) ระดับ crertinine .Urinary วัดขึ้นอยู่กับปฏิกิริยา Jaffe
ศึกษา Hisopathological: หนูไตและตับถูกประมวลผลและฝังตัวอยู่ในพาราฟินเป็นรายบุคคล ส่วน (5um) ถูกตัดและและย้อมด้วยการวิเคราะห์สถิติข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นหมายถึงข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) นัยสำคัญทางสถิติถูกประเมินโดยหนึ่งในวิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้รุ่น SPSS 12.0 ค่าได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อ p <0.05

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการการเหนี่ยวนำแบบหนูสัตว์ : หนูพันธุ์วิสตาร์เพศผู้ ซื้อจากศูนย์สัตว์ทดลองแห่งชาติ มหาวิทยาลัยมหิดล eighing etween 275-300g ถูกเก็บรักษาภายใต้สภาวะห้องปฏิบัติการมาตรฐาน ( อุณหภูมิ 22 + - 2 , 12 / หน้าจอแสง / มืดรอบ ) สำหรับ acclimatization.they หนึ่งสัปดาห์จะได้รับอนุญาตให้เข้าฟรี น้ำดื่ม และสัตว์ฟันแทะมาตรฐานทางการค้า เม็ด การศึกษาขั้นตอนรวมถึงหมายเลขของการใช้สัตว์ สัตว์ที่ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมของงานวิจัย คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่นดัคชั่นของไตและตับบาดเจ็บ โดยแคดเมียมคลอไรด์ : หกชายพันธุ์วิสตาสุ่มออกเป็นสองกลุ่มสาม กลุ่มควบคุม ( N = 3 ) ถูกฉีด subcutaneously ด้วยโซลูชั่นน้ำเกลือ ( 0.9% na CL ) การรักษากลุ่ม ( n = 3 ) ถูกฉีดด้วย cdcl2 สารละลายความเข้มข้น 1.2 มิลลิกรัม / น้ำหนักตัว 1 กิโลกรัม subcutaneously 5 วัน / สัปดาห์ เป็นเวลา 4 สัปดาห์ ( 28 วัน d1-d28 ; 20 ( ddcl2 ) ปริมาณและระยะเวลาของการรักษา cdcl2 ดัดแปลงจากการศึกษา prozialeckคอลเลกชันของหนูปัสสาวะและเลือด : ตัวอย่างปัสสาวะถูกเก็บรวบรวมจากแต่ละจุดใช้กรงหนูผ่านการเผาผลาญอาหารในวันที่ 0 และ 28 วัน และมีการเก็บตัวอย่างเลือด โดยเจาะหัวใจในวันสุดท้ายของการทดลอง หลังจากหนูถูกวางยาสลบและพบ phenobaraital ด้วยสารละลายโซเดียม หลังจากผ่านของทั้งสัตว์สรีรวิทยาน้ำเกลือทางหลอดเลือดไตและตับ , ถูกลบ , ล้างด้วย salution ทางสรีรวิทยาและคงที่ใน 10%ฟอร์มาลินใน 48 ชั่วโมง สำหรับ เป็นกลางทางตรวจการหาปริมาณแคดเมียมในปัสสาวะและเลือดและเลือดและความเข้มข้นของปัสสาวะ หรือ ซีดี มี quantified โดยแกรไฟต์ Atomic absorption spectrometry ( เตาปริมาณกับอดีต gfaas พื้นหลังแก้ไข ( Varian Spectra a800z ) ใช้ 5 % ฟอสเฟต monobasic แอมโมเนียเป็นส่วนขยาย . ตัวอย่างเลือดถูกย่อยในสารละลายที่มีกรดไนตริก 5% อัตราส่วน 1 : 3 ที่ผสมแล้ว และระดับ หลังจากยืนรอเป็นชั่วโมง นำออกสำหรับการวิเคราะห์โดย gfaas ตัวอย่างปัสสาวะลด 0.1% สารละลายที่มีกรดไนตริกในอัตราส่วน 1 : 1 ( v / v ) ในระดับ crertinine วัดขึ้นอยู่กับ ปฏิกิริยาของเจฟฟี่การศึกษา hisopathological : หนูไตและตับและประมวลผลแบบฝังตัวอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟิน ส่วน ( 5um ) ที่ถูกตัดและคราบด้วยสถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นค่าเฉลี่ยความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย ( SEM ) สถิติวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว ( ANOVA ) โดยใช้โปรแกรม SPSS เวอร์ชั่น 12.0 มีค่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ p < 0.05 เมื่อพิจารณา