To gain more insight into the molec

To gain more insight into the molecular mechanisms of Colletotrichum gloeosporioides pathogenesis, Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT) was used to identify mutants of C. gloeosporioides impaired in pathogenicity. An ATMT library of 4128 C. gloeosporioides transformants was generated. Transformants were screened for defects in pathogenicity with a detached copper brown leaf assay. 32 mutants showing reproducible pathogenicity defects were obtained. Southern blot analysis showed 60.4% of the transformants had single-site T-DNA integrations. 16 Genomic sequences flanking T-DNA were recovered from mutants by thermal asymmetric interlaced PCR, and were used to isolate the tagged genes from the genome sequence of wild-type C. gloeosporioides by Basic Local Alignment Search Tool searches against the local genome database of the wild-type C. gloeosporioides. One potential pathogenicity genes encoded calcium-translocating P-type ATPase. Six potential pathogenicity genes had no known homologs in filamentous fungi and were likely to be novel fungal virulence factors. Two putative genes encoded Glycosyltransferase family 28 domain-containing protein and Mov34/MPN/PAD-1 family protein, respectively. Five potential pathogenicity genes had putative function matched with putative protein of other Colletotrichum species. Two known C. gloeosporioides pathogenicity genes were also identified, the encoding Glomerella cingulata hard-surface induced protein and C. gloeosporioides regulatory subunit of protein kinase A gene involved in cAMP-dependent PKA signal transduction pathway.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อให้เข้าใจกลไกระดับโมเลกุลของ Colletotrichum gloeosporioides พยาธิ การแปลงสื่อ tumefaciens อโกรแบคทีเรียม (ATMT) ถูกใช้เพื่อระบุสายพันธุ์ของ C. gloeosporioides  pathogenicity อยู่ สร้างไลบรารีมี ATMT ของ 4128 C. gloeosporioides transformants Transformants คัดสำหรับข้อบกพร่องใน pathogenicity อยู่ด้วยการทดสอบเดี่ยวใบสีน้ำตาลทองแดง การกลายพันธุ์ 32 แสดงข้อบกพร่อง pathogenicity อยู่จำลองที่ได้รับ วิเคราะห์น้าภาคใต้แสดงให้เห็น 60.4% ของ transformants ที่มีการรวมดีเอ็นเอได้ ลำดับออก 16 ขนาบดีเอ็นเอถูกกู้คืนจากการกลายพันธุ์ โดย PCR อินเตอร์เลซสมมาตรความร้อน และใช้ในการแยกยีนที่ถูกแท็กจากป่าชนิด C. gloeosporioides ลำดับจีโนมที่ โดยการค้นหาพื้นฐานท้องถิ่นค้นหาเครื่องมือการจัดกับฐานข้อมูลกลุ่มท้องถิ่นของป่าชนิด C. gloeosporioides หนึ่งยีน pathogenicity อยู่ศักยภาพเข้ารหัสแคลเซียม translocating ATPase ชนิด P หกมีศักยภาพ pathogenicity อยู่ยีนมี homologs ไม่รู้จักในเชื้อราด้าย และมีแนวโน้ม ปัจจัยความรุนแรงเชื้อรานวนิยาย สองยีน putative รหัส Glycosyltransferase ครอบครัว 28 โดเมนที่ประกอบด้วยโปรตีนและโปรตีนครอบครัว Mov34/MPN/แผ่น-1 ตามลำดับ Putative ฟังก์ชันจับคู่กับโปรตีน putative พันธุ์อื่น ๆ Colletotrichum ยีน pathogenicity อยู่ห้าที่อาจเกิดขึ้นได้ สองรู้จัก C. gloeosporioides pathogenicity อยู่ยีนยังถูกระบุ รหัส Glomerella cingulata ฮาร์พื้นผิวเกิดจากโปรตีนและ C. gloeosporioides ย่อยกำกับดูแลของไคเนสรี A ยีนเกี่ยวข้องกับทางเดินส่งสัญญาณ PKA ค่ายขึ้นอยู่กับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อให้ได้รับความเข้าใจมากยิ่งขึ้นในกลไกระดับโมเลกุลของ Colletotrichum gloeosporioides เกิดโรค Agrobacterium tumefaciens พึ่งการเปลี่ยนแปลง (ATMT) ถูกนำมาใช้ในการระบุการกลายพันธุ์ของ C. gloeosporioides ลดในการเกิดโรค ห้องสมุดของ ATMT 4128 C. gloeosporioides transformants ถูกสร้างขึ้น Transformants ถูกคัดกรองสำหรับข้อบกพร่องในการก่อให้เกิดโรคที่มีทองแดงเดี่ยวสีน้ำตาลใบทดสอบ 32 กลายพันธุ์แสดงข้อบกพร่องที่ทำให้เกิดโรคที่สามารถทำซ้ำได้รับ วิเคราะห์ blot ภาคใต้แสดงให้เห็นว่า 60.4% ของ transformants มีสถานที่เดียว integrations T-DNA 16 ลำดับจีโนมขนาบ T-DNA ถูกกู้คืนจากการกลายพันธุ์โดยการระบายความร้อนไม่สมมาตร interlaced PCR และถูกนำมาใช้เพื่อแยกแท็กยีนจากลำดับจีโนมของป่าชนิด C. gloeosporioides โดยการจัดข้อความค้นหาเครื่องมือพื้นฐานในพื้นที่ค้นหากับฐานข้อมูลจีโนมของท้องถิ่น ชนิดป่า gloeosporioides ซี หนึ่งยีนก่อให้เกิดโรคที่มีศักยภาพการเข้ารหัสแคลเซียม translocating P-ATPase ประเภท หกยีนโรคที่อาจเกิดขึ้นไม่มี homologs รู้จักกันดีในเชื้อราและมีแนวโน้มที่จะเป็นนวนิยายเรื่องปัจจัยความรุนแรงของเชื้อรา สองยีนสมมุติเข้ารหัสครอบครัวไกลโคซิโปรตีน 28 โดเมนที่มีส่วนผสมของโปรตีนและ Mov34 / MPN / PAD-1 ครอบครัวตามลำดับ ห้ายีนโรคที่อาจเกิดขึ้นได้ฟังก์ชั่นสมมุติจับคู่กับโปรตีนสมมุติของสายพันธุ์ Colletotrichum อื่น ๆ สองรู้จักกัน C. gloeosporioides ยีนโรคนี้ยังมีการระบุการเข้ารหัส Glomerella cingulata หนักผิวเหนี่ยวนำโปรตีนและ C. gloeosporioides subunit กฎระเบียบของโปรตีนไคเนสยีนที่เกี่ยวข้องในค่ายขึ้นอยู่กับ PKA สัญญาณทางเดิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อให้ได้ข้อมูลเชิงลึกมากขึ้นในกลไกระดับโมเลกุลของ Colletotrichum gloeosporioides พยาธิกำเนิด Agrobacterium tumefaciens ) การเปลี่ยนแปลง ( atmt ) คือใช้ในการระบุสายพันธุ์ของ C . gloeosporioides ที่บกพร่องในการ . การ atmt ห้องสมุดของ 4128 C . gloeosporioides transformants ถูกสร้างขึ้น พลาสมิดจากข้อบกพร่องในการทำให้เกิดโรคกับแฝดทองแดงสีน้ำตาลใบ ตามลำดับ 32 สายพันธุ์ ซึ่งการแสดงข้อบกพร่องได้ การทำ Southern blot analysis พบ 60.4% ของพลาสมิดมีการผนวกรวม t-dna เว็บไซต์เดียว จีโนมลำดับ 16 จ t-dna พบสายพันธุ์โดยความร้อนแบบ interlaced PCR และถูกใช้เพื่อแยกแท็กยีนจากโครโมโซมลำดับของ C . gloeosporioides โดยพื้นฐานของการค้นหาเครื่องมือค้นหาท้องถิ่นกับท้องถิ่นฐานข้อมูลจีโนมของ C . gloeosporioides . หนึ่งในการสร้างศักยภาพ translocating แคลเซียม ATPase ยีนพี . 6 ยีนก้ำศักยภาพไม่มีโฮโมลอกส์ในเส้นใยเชื้อราและมีแนวโน้มที่จะเป็นนวนิยายของเชื้อราโรคปัจจัย 2 การแสดงออกยีนเข้ารหัสเดกซ์โดเมนที่มีโปรตีนและครอบครัว 28 mov34 / MPN / pad-1 ครอบครัวโปรตีน ยีนที่มีศักยภาพมีฟังก์ชันการ 5 ซึ่งตรงกับการแสดงออกของโปรตีนชนิด ชนิดอื่น ๆ 2 C . gloeosporioides ก้ำจักยีนยังระบุการเข้ารหัส glomerella cingulata และ C . gloeosporioides โปรตีนพื้นผิวที่ยากและบริษัทย่อยของโปรตีนไคเนสยีนที่เกี่ยวข้องในค่ายขึ้นอยู่กับความสัญญาณผ่านทาง